三基训练-简记版+缩略版999

PAGEPAGE53三基训练--临床检验医学九九重阳君§1临床检验医学§1.1概述l临床检验医学不断进展近年来，我国临床检验医学事业取得飞跃发展，首先在仪器设备和技术方面进展迅速，大量先进的自动化仪器取代或部分取代了一般仪器和手工操作，有些技术和方法涉及最新的尖端学科；检验人员的伦理道德、法制观念、基础理论和业务素质不断提高，又有一些临床医师、检验医师以及大专以上学历的检验人员充实检验队伍，使检验与临床关系更加密切，检验质量和水平可持续地稳步提高更有了保证；检验工作的任务从简单地为临床提供实验信息，进一步积极参加临床的诊断、治疗和预防工作；有的检验科不仅担负一般的实验室检测，还要承担教学、单独或与临床协作承担科研任务；为保证检验质量，检验科全面质量管理日益受到重视和强化。2．努力学习推陈出新先进的自动化仪器已进入实验室，正在逐渐替代部分手工操作，检验人员如何适应这个转变，使实验结果更精确和准确；基础医学的发展及与临床医学的密切结合，要求把有限的实验数据变为高效的诊断信息，更直接地、有效地参与临床疾病的诊治，这些都要求检验工作者不仅要学好专业，还要充实基础和临床知识。中华人民共和国卫生部已于1991年发布命令分步淘汰35项临床检验项目，随后又公布了有关替代项目和方法。目前临床实验室化验项目已有上千种，随着基础科学和临床医学的不断发展，推陈出新是必然的规律，如除卫生部过去公布的淘汰项目以外，有些其他化验项目和方法在实践中已经或将被淘汰。如作尿蛋白半定量的艾氏试管法已被分光光度法取代；卫生部于2000年又发出通知，停止使用出血时间测定项目的Duke法，使用出血时间测定器检测出血时间；停止使用凝血时间测定的玻片法和毛细血管法，用活化部分凝血活酶时间(APTT)或全血凝固时间(CT，试管法)测定替代。目前虽然化验项目众多，检验工作者应努力探索，科学论证，寻求对疾病能高效、科学的诊断、监测项目，以取代方法欠妥、高耗低效甚至无效、操作繁杂的化验。3．严格质量管理，加强质量控制为保证检验质量，必须强化质量控制，首先应搞好室内质控。要抓好每一环节质控，保证终末质量。自梅毒、伤寒等血清学检验即康氏试验、华氏反应和肥达反应等应用于临床以来，即强调要作阳性、阴性对照，实际上此即室内质控措施。20世纪60年代初，有的医院自制简易的质控血清，开展了临床化学的室内质量控制。20世纪70年代末、80年代初在全国范围逐步开展了临床化学、临床微生物学、临床血液学及临床免疫学等检验的室内质控和室间评价，这些科学、适用的质控措施对检查和提高检验质量起着不可估量的作用。卫生部颁布的综合医院分级管理标准中规定检验科几项质量控制指标为必备的统计指标，可见质量控制工作的重要性。质量控制是一个不断发展、不断更新的过程，随着检验技术和方法的不断改进，质量管理理论不断提高，实践经验不断丰富，对质量控制又将有不同要求和采取不同手段，这也要求检验人员提高质量意识，在日常工作中养成严谨的工作作风，学习适应和执行更新的质控方法，确保各项质控指标高水平和室间质评好成绩。4．了解各种客观因素对化验的影响，争取最佳的化验结果检验工作者除应重视仪器、操作、方法及试剂等实验室自身影响因素外，还应该了解和排除一些客观影响因素，以获得最佳的化验结果，如：(1)某些检验特别是血液常规检验项目可因某些生理因素影响而产生很大变化。如激动、兴奋、恐惧等均可使血红蛋白暂时升高；白细胞计数在一天内最高值与最低值可相差一倍。(2)很多药物对检验也会产生影响。巳知有上百种药物可影响尿常规检验，如右旋糖酐、放射造影剂可使尿比密增高；非那西丁、阿司匹林、磺胺药以及青霉素、庆大霉素等可使尿蛋白定性试验出现假阳性。(3)样品质量不高或代表性不强往往可以造成误诊。如作血气分析的血样品不能有气泡，也不能凝固；标本溶血对很多试验是不适宜的；多数试验特别是酶学试验要求新鲜样品；作细菌培养时采集样品，如病人已用过某细菌对之敏感的药物，则培养结果阴性，其临床意义也是有限的。(4)选择最佳时期采样。由于病原体感染机体后周围血中出现变化的时间不一；各种化学成分代谢各有其规律性以及病理条件下的变化，故应掌握在最佳时期采样。如要找间日疟原虫或三日疟原虫最好是发作后数小时至十余小时采血；心肌梗死做酶学检查，则要求在发病后2—4小时采样，如肌酸激酶(CK)在这一时间即开始增高。(5)注意饮食对某些检验结果的影响。由于进餐可使血液中很多化学成分发生变化，临床化学的参考值一般均用空腹血，故抽血化验除某些急症化验外，一般均应空腹，特别是进餐后对血糖和血脂影响更明显。另外食高蛋白饮食或高核酸食物，可分别引起血中尿素或尿酸增高；而营养不足可使血中总胆固醇浓度降低长期饥饿、营养不足还可使尿中酮体出现阳性反应。如检查粪便隐血试验化学法除愈创木酯法外，于实验前3天内禁食动物血、肉、肝脏及含丰富叶绿素食物等等。因此，有关影响检验结果的客观因素，检验人员必须非常熟悉并能鉴别。5．争取临床检验医学可持续发展临床检验医学的可持续发展，除检验工作者自身业务不断充实外，还需基础和临床医学的支持和参与。如对实验项目的开发和研究，除需实验室与临床知识外，还需较好的基础知识，有效地运用高科技手段，以提高实验的灵敏度和特异性。对化验结果临床价值的评估；对本专业已开展或待开展的实验项目的临床评价；寻求对疾病最直接、最有效、最准确、最合理、最经济的实验项目及其组合，以用于临床的预测、诊断、治疗和监测；等等，均需临床医师的参与和合作，才能达到更佳效果。1．2基础理论和基本知识问答1.简述普通生物显微镜的基本结构。普通生物显微镜的基本结构分光学系统和机械系统两大部分。光学系统由反光镜、光栅(光栏)、聚光器、接物镜、接目镜等部件组成。机械系统由镜座、镜臂、载物台、转换器、镜筒、粗和细聚焦旋钮、载物台移动控制旋钮(推尺)等部件组成。2.试述物镜上常用的一些数字。物镜上常用一些数字表示其光学性能和使用条件。如“40／0．65”中“40'’(或“40X”、“40：1”)表示放大倍数，“0．65”(或“N．A．0．65”或“A0．65”)表示数值孔径。又如“160／0．17'’中“160”表示使用该物镜时，显微镜的“机械筒长”应为160mm，“0．17'’有的低倍物镜(如“4X”)在有无盖玻片的情况下均可使用，所以以“一”代替“0．17"o3．简述物镜所使用的介质及其折射率。空气(折射率为1)用于干燥系物镜；水(折射率为1．333)用于水浸物镜；香柏油(折射率为1．515)、甘油(折射率为1．405)或石蜡油(折射率为1．471)等用于油浸系物镜。4．如何按放大倍数区分物镜?放大1～5倍者称为低倍物镜，5—25倍者为中倍物镜，25—65倍者为高倍物镜，90—100倍者为油镜。5．何谓镜口角?它与数值孔径有何关系?镜口角是指从标本射过来的光线，伸展到接物镜下组透镜边缘所张的角，通常以。表示。数值孔径(numericalaperture，N．A．)又称为镜口率。N．A．是指光线从聚光器经盖片折射后所成光锥底面的孔径数字，为判断物镜或聚光镜能力的重要依据。提高N．A.可采取提高镜口角和介质折射率的办法。采取提高镜口角的办法即让标本尽可能靠近物镜；采取提高折射率的办法，即在物镜与标本之间加入折射率较大的介质，如香柏油，此即为什么要使用油镜的道理。6．简述显微镜的维护。防潮、防尘、防震、防腐蚀、防热。7．试述常用的天平及其用途。普通天平：灵敏度差，感量一般为0.1-1分析天平：摆动天平、双盘空气阻尼天平、双盘电光天平(半机械加码)、双盘全自动电光天平(机械加码)和单盘电光分析天平等。此类天平灵敏度高，感量一般为0.1mg，适用于定量分析。8．写出均数、标准差、标准误及变异系数的符号、公式及意义。均数：符号为X-。均数代表一组观察值的集中趋势。标准差：符号为S。标准差代表一组观察值的离散程度。标准误；符号为Sx或SE。标准误是样本均数的标准差，即样本均数与总体均数的接近程度。变异系数：艾称离散系数，符号为CV。变异系数是相对数，没有单位，因此更便于资料之间的分析比较。CV常用于比较均数相差悬殊的几组资料的变异度，或比较度量衡单位不同的几组资料的变异度。9．如何计算抗体的平均滴度?简答：采用几何均数法。公式略。10．如何进行两均数的显著性检验?简答：进行显著性检验可用t检验法，不同类型的资料可用不同的方法。常用样本均数与总体(理论)均数的比较、配对资料的比较、两样本均数的比较及两样本含量较大时的比较。两个样本均数比较使用t检验时，如两样本方差相差太大，则应先检验两组方差的差别是否有显著性；如差别有显著性，须用校正t’检验，即t’检验代替t检验。11何谓卡方检验?简答：检验两个或两个以上样本率或构成比之间差别的显著性，用卡方检验。基本数据只有二行二列，则用四格表；如行数或列数大于2，则用行X列表。12．何谓真值、定值、准确度及精密度?简答：真值是用最可靠的决定性方法，即没有偏差或只有已知偏差的最佳条件下定量测得的数值。在生化检验时，真值在绝大多数情况下是不能确切测得的。定值是指标定的质控材料的已知值。准确度是指测定结果与真值接近的程度。精密度是指对同一样品多次测定，每次测定结果和多次结果均值接近的程度，即对同一样品重复分析的结果间的符合程度。13．何谓决定性方法、参考方法、医学决定水平、允许误差?简答：决定性方法：这类方法的准确度最高，系统误差最小，经过详细的研究，没有发现产生不准确性的原因和不明确的方面。测定结果为确定值，与真值最接近。参考方法：指精密度与准确度稍微低于决定性方法，其各种轻度干扰因素为已知的分析方法。医学决定水平：是指某项待测成分的某一浓度，围绕该浓度的升高或降低，对确定疾病的诊断或治疗起帮助甚至关键的作用。允许误差有两种提法：(1)按照医学使用时有决定性作用的浓度为依据。允许误差一般采用X-土2SD。．(2)根据参考值范围或生物学变异决定，Tonks提出以参考值范围的1／4为允许误差，后又提出以测定值的土10％为允许误差。14．什么是室内质量控制?其目的是什么?室内质量控制系务实验室为了监测和评价本室工作质量，以决定常规检验报告能否发出所采取的一系列检查、控制手段，旨在检测和控制本室常规工作的精密度，并检测其准确度的改变，提高本室常规工作中批间和日间标本检测的一致性。15．什么是“OCV'’和“RCV"?OCV(optimalconditionsvariance)：即最佳条件下的变异。它是指在某一实验室内，在最理想和最恒定的条件下，对同一质控物进行反复测定，能得出的最低变异。是在目前条件下本室该项目检测所能达到的最好的精密度水平，是本室工作水平的一个基础指标。RCV(routineconditionsvariance)；即常规条件下的变异。是指在某一实验室内，常规条件下测定，质控物所得出的变异。它反映常规条件下该项目的精密度水平。它不仅可以用于比较不同方法、仪器、操作者等在常规工作下的精密度，而且是室内质量控制中靶值和允许误差范围确定的依据。16．在质量控制中，如何判断失控?对失控的判断标准有许多不同主张。目前，采用最广泛的原则是当质量控制血清的检测结果超出X-土3SD范围时，即判断为失控。因为按统计学的原理，由随机误差引起结果超出X-土3SD范围的可能性小于0．3％。对于几十次测定而言，实际上是不可能发生的，一旦发生则提示可能存在非随机误差或特殊情况。17．什么是室间质量评价?评分方法是什么?室间质量评价即由实验室以外的某个机构对各实验室常规工作的质量进行监测和评定，以评价各实验室工作质量，逐步提高常规检测的准确性和可比性。在我国，室间质量评价由各级临床检验中心组织实施。室间质量评价最常用的评分方法为VIS法。18．何谓变异指数及变异指数得分?变异指数(Variancelndex简写为VI)：室间评价通过测定控制血清，可得到两个主要指标：一是均数，二是变异指数。前者作为室间评价的参考靶值，后者是表示实验误差的指标。变异指数得分(VIS)，即用变异指数计分，当VI<400时，VIS=VI；当VI≥400时，VIS＝400。室间质量评价活动中，VIS≤80为优秀；VIS≤150为及格；VIS最大值为400。一般认为VIS>200，表明结果有临床上不允许的误差；VIS=400的测定结果则会造成临床上的严重失误，是绝对不许可的。19．Westgard多规则质控常用规则有哪些?有（X-平均数；s标准差)12s：一个质控结果超过；X-土2s，为违背此规则，提示警告。l2。5s：一个质控结果超过X-土2．5s，为违背此规则，提示存在随机误差。13s：一个质控结果超过王土35，为违背此规则，提示存在随机误差。R4s：同批两个质控结果超过4s，即一个质控结果超过X-+2s，另一质控结果超过X2s。为违背此规则，表示存在随机误差。22s：两个连续质控结果同时超过X-+2s或X2s，为违背此规则，表示存在系统误差。41s：一个质控品连续四次测定结果都超过X-+1s或X1s，两个质控品连续两次测定都超过X-+1s或X1s，为违背此规则，表示存在系统误差。10X-：十个连续的质控结果在平均数一侧，为违背此规则，表示存在系统误差。20．为什么要参加室间质量评价?简答：室间质量评价的目的是相互校正各参与实验室测定结果的准确性，要求保持在临床所能接受的误差范围内，从而使参加活动的实验室之间结果有可比性。故室间质评着重考察检验操作的整体状态。21．室内质量控制与室间质量评价有何关系?简答：只有首先搞好室内质量控制，保证检验结果达到一定的精密度，才能得到较好的室间质评成绩和达到室间质评结果可比性的目的。室间质量评价活动是借助外部力量进行回顾性检查，而不能控制实验室每天所发出的报告质量，故不能代替室内质量控制。当室间质量评价中某一项目出现明显差异时，又要从室内质量控制中寻找原因，订出改进计划，确切地保证本实验室检验结果质量。22．解释几个有关质量控制名词：参考物、校准物、质控物、质控方法、质控图。(1)参考物(referencematerials)：所含欲测物的量是用参考方法或用与参考方法可比的其他方法测出来的，其所定的值应有高度准确性。参考物常由权威或官方机构所承认。(2)校准物(calibrationmaterials)：含有已知量的欲测物，用以校准该测定方法的数值。商品试剂盒中常带有校准物并有标示值，它与该方法及试剂相关联，由于有介质效应，所标示的值可能与真值有偏差。(3)质控物(controlmaterials)：用于和待测标本共同测定，以控制样品的测定误差。最理想的质控物是用与待测标本相同的介质制备，而且要求保存期间十分稳定。(4)质控方法(controlprocedures)：以统计学方法确定质控测定值是否不同于已知值的方法，也称统计质量控制方法。(5)控制图(controlcharts)：系评价测定结果是否处于统计控制状态的一种图表。控制限(controllimits)是在控制图上作出需要行动信号的标准，或判断一组数据是否处于控制状态之中的标准。控制限由上限和下限规定可接受的范围。23．诊断灵敏度、诊断特异性、预期值和总有效率如何计算?注TP为真阳性；TN为真阴性；FP为假阳性；FN为假阴性。简答：诊断灵敏度为所有病人(TP+FN)中获得阳性(TP)结果的百分数。诊断特异性为所有这类疾病的人群(TN+FP)中获得阴性结果(TN)的可能性。阳性结果的预期值(PV+)为所有阳性结果中正确的阳性百分率。阴性结果的预期值(PV一)为所有阴性结果中正确阴性的百分率。总有效率指所有检验结果中正确结果的百分率。在临床运用中，主要以阳性结果的预期值观察检测结果的使用价值。24．什么是分析范围、干扰和介质效应?简答：分析范围是指使用某法可以测定到准确结果的浓度范围，可以从标准曲线来估计，但要注意介质效应。干扰是指由于存在于标本或试剂中的其他物质干扰了该法的反应。干扰带来的误差属于恒定误差。介质效应分析标本中除了分析物以外的所有其他组分称为介质。它是指分析方法在分析测定时，介质参与反应的影响。它可以是加强反应也可以是抑制反应。从方法学讲介质效应并不是干扰。25．临床检验各项报告如何将惯用单位改为国际单位(SI)制?简答：一般有下面几种变换方法：(1)凡一价元素改为mmol／L，其值不变。如多价者，即“mEq／L÷价数＝mmol／L”。(2)除蛋白质(包括血红蛋白)及酶以外，所有临床化学项目，均以“mol／l”(因数值不一，可用“mmol／L”或“／μmol／L”)报告。(3)蛋白质类使用“g／L”或“mg／L”报告方式。(4)凡使用“％”者改为“0．XX”。如白细胞分类中“N60％”改为“N0．60'；其他如PSP、蛋白电泳均改为“0．XX”。(5)血细胞和体液细胞计数过去报告为XX／mm’(或PL)，现改为1升(1L)中细胞数，分子以X10’表示，如；WBC5600／mm3改为5．6X109／L；RBC520万／mm3改为5．2X1012／L；血小板20．5万／mm3改为205X109／L26试述血液的一般物理性质；简答：血液是由血细胞和血浆两部分组成的红色粘稠混悬液，血浆约占55％，血细胞约占45％。血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。血浆是一种复杂的胶体溶液，组成非常恒定，其中固体成分占8％一9％，水分占91％一92％。固体成分包括各种血浆蛋白、营养成分、无机盐、维生素和代谢终产物等。血液pH为7．35-7．45，比重为1．050—1．060，相对粘度为4—5，血浆渗量(渗透压)为300mOsm／kgH2O，血液离体后数分钟即自行凝固。27．简述枸橼酸钠、草酸盐及肝素的抗凝机制。简答：(1)枸橼酸钠与血中钙离子形成可溶性螯合物，从而阻止血液凝固。(2)草酸盐可与血中钙离子生成草酸钙沉淀，从而阻止血液凝固。(3)肝素是一种含硫酸基团的粘多糖，可以加强抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)灭活丝氨酸蛋白酶，因而具有阻止凝血酶形成的作用。28．什么抗凝剂最适宜于血液常规检验?试简述其原理。简答：乙二胺四乙酸(EDTA)盐最适宜于血液常规检验。其原理是EDTA与血中钙离子结合形成螯合物，从而阻止血液凝固。EDTA盐通常有二钠、二钾或三钾盐。29．简述改良牛鲍(Neubauer)型计数盘的结构。简答：改良牛鲍型计数盘具有两个同样结构的计数室。加血盖片后其高度为0.1mm。计数室长宽均为3mm，平分为9个大方格，每个大方格(又平分为16个中方格)长宽均为1mm，故加盖充液后每大方格容积为0.1mmg。为便于计数，中央大方格又用双线分为25个中方格，每个中方格又再分为16个小方格。通常四角的四个大方格为计数白细胞用；中央大方格内取五个中方格(四角四个及正中一个)为计数红细胞和血小板用。30．血细胞计数时，常见的误差有哪些?简答：(1)技术误差：①取血部位不当；②稀释倍数不准；③血液凝固；④充液不当；⑤稀释血液后混合不匀；⑧计数红细胞时，白细胞过多的影响，或计数白细胞时，有核红细胞影响；⑦计数红细胞时，血浆自身凝集素或球蛋白过高；⑧仪器误差。(2)固有误差：即使技术熟练者，使用同一仪器，用同一稀释血液多次充池计数，结果也常有一定差异。31测定血红蛋白的推荐方法是什么?简述其原理。简答：氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法是国际血液学标准化委员会推荐，并经世界卫生组织确认的测定血红蛋白的参考方法。其原理：血液在血红蛋白转化液中溶血后，除硫化血红蛋白(SHb)以外的各种血红蛋白均可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白(Hi)，其与CN-结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋(HiCN)。32．氰化高铁血红蛋白法测定血红蛋白的主要优点是什么?有什么缺点?简答：主要优点是操作简便，结果稳定可靠，试剂容易保存，能测定除SHb以外的所有血红蛋白，并易于建立质量控制。主要缺点是血红蛋白转化液中，KCN为剧毒试剂，故严禁用口吸转化液，使用时应严加防范，比色废液应妥善处理。33．氰化高铁血红蛋白法测定血红蛋白后的废液应如何处理?简答：比色废液可按每升加次氯酸钠液(安替福民)约35mL的比例混匀敞开过夜(使CN—氧化成CO2和N2挥发，或水解成CO2-3和NH+4)，再排人下水道。简记为：比色废液加入次氯酸钠液处理，比例为1000：35，敞口过夜后排入下水道。34．试解释氰化高铁血红蛋白法测定血红蛋白的计算公式。计算公式为：血红蛋白（g/L）=测定管吸光度*64458/44000*251=测定管吸光度*367.7公式中，64458为目前国际公认的血红蛋白平均分子量。44000为1965年国际血液学标准化委员会公布的血红蛋白摩尔吸光系数。251为稀释倍数。35．按计数细胞的原理，电子血细胞计数仪可分为多少型?目前通用的是什么型?简答：可分为光电型、电容型、电阻抗型和激光型。由于电阻变化容易检测，性能稳定，因此应用最广。目前国产电子血细胞计数仪多为电阻抗型。简记为：激光光电，电容电阻等四型，电阻易测，国产多为电阻。36．何谓库尔特原理。简答：20世纪50年代库尔特(W.H.Coulter)发明并申请了粒子计数技术的设计专利。其原理是根据血细胞非传导的性质，以电解质溶液中悬浮的白细胞在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础，进行血细胞计数和体积测定，此法被称为电阻抗法，亦被称为库尔特原理。37．显微镜法校正血液分析仪用什么公式计算?简答：白细胞计数及分类有两种方法，一种是显微镜目视法，一种是血液分析仪法。前者是基础，血细胞分析仪要根据显微镜法准确计数结果进行校正后方能使用。但这种计数应根据统计学研究白细胞计数结果的总变异系数进行分析。总变异系数的公式为：略公式中nb为所见细胞实际数目，nc为用计算盘次数，np为用吸管的次数。38．使用自动血细胞分析仪对血标本有什么要求?简答：(1)从采集部位上一般要求用静脉抗凝血，因不同部位皮肤穿刺血的细胞成分和细胞与血浆比例常不一致，与静脉血差别较大；毛细血管采血量少，对自动化仪器而言，不易达到检测要求量，更不便于有疑问时复查；从病人角度，静脉穿刺更可防止因毛细管采血消毒不严带来的交叉感染；从仪器设计上讲静脉抗凝血有利于对仪器的保护。(2)一般而言，采用抗凝血在室温下，WBC、RBC、PLT可稳定24小时(但PLT不宜在低温下贮存)，白细胞分类可稳定6—8小时，Hb可稳定数日。如作镜下白细胞分类，2小时后粒细胞形态即有变化，故应及时推制血片。上述保存时间还需根据各仪器说明书酌定，因各型仪器所用试剂各异。简记为：标本为静脉血，及时检测。39．病理因素对血细胞分析仪使用有何影响?简答：①某些疾病血中含有冷球蛋白或冷纤维蛋白(如骨体瘤、血栓性疾病等)等，均可导致血液中某些物质凝集，致使血细胞计数增高；②血液中白细胞显著增高而影响红细胞计数或出现有核红细胞影响白细胞计数；⑧低色素性贫血或红细胞内含有大量SHb或Hb—CO，或某些新生儿、某些肝病病人红细胞膜质异常，抵抗溶血剂作用，导致溶血不完全；④多发性骨髓瘤的M蛋白增多时，在pH低的情况下，M蛋白可与溶血剂发生反应而使结果偏高；⑤各种病因引起的血栓前状态使血小板易于聚集而影响结果。40.血细胞分析仪在白细胞分类上进展如何?简答：血细胞分析仪的改进主要体现在白细胞分类部分，即由电阻抗法三分群发展为多项技术联合同时检测一个细胞，综合分析实验数据，得出较为准确的白细胞分群结果。目前主要有以下四种类型。(1)容量、电导、光散射(VCS)白细胞分类法。VCS技术可使血细胞未经任何处理，与体内形态完全相同的自然状态下得出检测结果。(2)阻抗与射频技术联合的白细胞分类法。这类仪器通过四个不同白细胞的检测系统完成分群。(3)光散射与细胞化学技术联合应用于白细胞分类计数。本仪器系联合应用激光散射和过氧化物酶染色技术。(4)多角度偏振光散射白细胞分类技术。其原理是一定体积的全血标本用鞘流液按适当比例稀释，其白细胞内部结构似乎自然状态。41.血细胞计数仪进行白细胞分类计数可否代替显微镜涂片分类?简答：不可以。近年来血细胞计数仪已可进行五分类，使细胞分析更精确、更准确，但仍有不足之处，如不能对单个细胞完全识别，特别是白血病细胞和正常单核细胞、异常的不典型的淋巴细胞等的区别；而显微镜涂片染色除细胞大小外，还要根据细胞的染色反应，核的形态、有无核仁及染色质着色情况，胞质的着色及颗粒等确定细胞类别，故血细胞分析仪的白细胞分类计数不能完全代替显微镜法。42．哪些病理情况可见红细胞增多或减少?简答：I、增多可见于：①真性红细胞增多症J②相对性增多，由于大量失水，使血浆减少，血液浓缩，血中各种血细胞包括红细胞均相对增多，如连续呕吐、反复腹泻、出汗过多、大面积烧伤等；③绝对性增多，如长期缺氧，可引起红细胞代偿性增生，如慢性肺心病。II、减少可见于：①造血原料不足；②造血功能障碍；③红细胞丢失或破坏过多所致的各种贫血。43．哪些生理因素可引起红细胞和血红蛋白增加或减少?简答：(1)年龄与性别：新生儿期红细胞与血红蛋白均明显增高，出生两周后逐渐下降到正常水平；女性由于月经、内分泌等因素，21—35岁者红细胞和血红蛋白均维持最低水平。(2)精神因素：感情冲动、兴奋、恐惧、寒冷等刺激均可使肾上腺素过多分泌，导致红细胞和血红蛋白增加。(3)高山居民和登山运动员等可因缺氧而导致红细胞和血红蛋白增高。(4)长期多次献血者红细胞可代偿性增加。(5)妊娠中后期、某些老年人及6个月至2岁婴儿均可出现生理性贫血。44．为什么有时已知血红蛋白量，还要作红细胞计数?简答：如只需了解有无贫血和贫血恢复程度，可以只测血红蛋白；但在各种贫血时，由于红细胞平均血红蛋白含量不同，红细胞和血红蛋白两者减少程度可不一致，因此必须同时测定，以鉴别贫血类型。简记为：贫血类型不同红细胞平均血红蛋白含量不同二者减少程度不一致，同时测定以鉴别贫血类型。45．什么是网织红细胞?简答：网织红细胞是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间尚未完全成熟的红细胞。因其胞质内尚存留多少不等的嗜碱性物质RNA，经煌焦油蓝、新亚甲蓝等活体染色后，嗜碱物质凝聚成颗粒，其颗粒又可联缀成线，而构成网织状，此种红细胞即网织红细胞。简记为晚幼红成熟未完全，嗜碱性物质爱上煌焦油蓝新亚甲蓝。46．检测网织红细胞有些什么方法?如何评价?简答：常规采用玻片法，由于玻片法容易使混合血液中的水分蒸发，染色时间偏短，因此结果偏低。试管法容易掌握，重复性较好，被列为手工法网织红细胞计数的参考方法。近年来，国内使用米勒窥盘进行计数，规范了计算区域，减少了实验误差，使结果准确性有所提高。目前，国外逐步使用网织红细胞仪器法测定，可自动染色、自动分析，自动打印出各阶段网织红细胞的分布图，结果准确。最新血细胞分析仪的应用，为网织红细胞计数提供了更先进的测试手段，这类仪器采用荧光染色和激光测量的原理，不但能客观地测量大量网织红细胞，而且还能根据荧光强度，将其分为高荧光强度、中荧光强度和低荧光强度三类，这种分类法对估计化疗后骨髓造血功能的恢复及骨髓移植效果有较重要的意义。简记为：玻片试管，米勒窥盘，两个仪器（网织红细胞仪器，带有网织红细胞的血细胞分析仪）5种。玻片法，水分易挥发，染色时间短，结果偏低；试管法：容易掌握，重复性好；米勒窥盘：较为规范，误差减少，准确性提高。网织红细胞仪器，自动染色分析打印分布图，结果准确；带有网织红细胞的血细胞分析仪，简便快速准确，并且三分类，对估计化疗后骨髓造血功能恢复及骨髓移植有重要意义。47．测定网织红细胞有何意义?网织红细胞参考值：成人为0.008—0.02，或(25--75)*109／L；初生儿为0.02—0.06。(1)网织红细胞计数可以判断骨髓红细胞系统造血功能，如溶血性贫血和急性失血后5—10天，网织红细胞增高，而典型再生障碍性贫血病例，则降低。(2)可作为疗效观察指标，故网织红细胞计数为对贫血病人经常随访检查项目之一。(3)有人认为仅用网织红细胞百分比或绝对值表达还不够确切，为此提出在贫血时最好计算网织红细胞生成指数(RPI)。它代表网织红细胞的生成相当于正常人的多少倍。（4）也可用网织红细胞校正值报告。简记为：参考值成人网织红，008-0爱0。判断骨髓红细胞系统造血功能，鉴别诊断贫血类型，观察贫血疗效。48.目视法计数白细胞的质量考核办法有哪些?简答：集体考核可用变异百分率评价法；个人考核可用两差比值法、双份计数标准差评价法或常规考核标准(RoutineCheckingStandard，RCS)法。双份计数标准差评价法亦可用于两个单位对口检查。简记为：集体变异百分率，个人两差比值和常规法，双份计数标准差，个人及两个单位对口查。49.简述变异百分率评价法的评分方法。变异百分率评价法采用下面公式：略。式中：V：变异百分率。X-m：靶值，可用同一样品多人计算的均值代替，X：被考核者报告值。计分：质量得分＝100一(V*2)评价：90—100分为A级(优)80—89分为B级(良)70—79分为C级(中)；60—69分为D级(及格)；<60分为E级(不及格)本法适用于人数较多(如30人以上)的技术考核，或市、区集体考核。50．白细胞计数时，如有有核红细胞，如何扣除?简答：按下述公式计算：白细胞／L=A*（100/100+B）A：校正前白细胞／L；B：在血涂片上分类计数100个白细胞时遇到的有核红细胞数。51．简述白细胞计数增减的临床意义。简答：(1)白细胞增加：大部分化脓性细菌尤其是各种球菌所引起的感染，均可使白细胞升高；其次如中毒(尿毒症、糖尿病酮症酸中毒、汞中毒、铅中毒)、急性出血、急性溶血、手术后、恶性肿瘤、粒细胞性白血病等，白细胞亦可增加。(2)白细胞减少：某些传染病包括病毒感染及某些血液病如再生障碍性贫血、少部分急性白血病、粒细胞缺乏症、化学药品及放射损害，以及脾功能亢进等时，白细胞数均减少。简记为：大多数细菌感染，4个中毒，急性岀血、溶血，术后、恶瘤和粒白等增加。病毒感染和再障；化学放射损害及脾亢，白细胞减少。52．有哪些生理变化可影响白细胞计数?简答：(1)年龄：新生儿期白细胞计数较高，可达15*109一30X*109／L，通常在3—4天后降至10*109／L。初生儿外周血以中性粒细胞为主，第6—9天逐渐下降至与淋巴细胞大致相等。整个婴儿期淋巴细胞均较高，可达0.70。(2)日间变化：一般安静松弛时白细胞较低，活动和进食后较高；早晨较低，下午较高，一日之内可相差一倍。(3)运动、疼痛和情绪影响：剧烈运动、剧痛、极度恐惧等均可使白细胞短时增高。(4)妊娠与分娩：妊娠期特别是最后一个月白细胞可增高，分娩时可高达34*109／L，产后2—5日内恢复正常。由于生理因素，同一被检测对象白细胞计数甚至可波动50％。简记为：运动的年龄常常疼痛在日间，恐惧的情绪直到妊娠分娩。53．何谓中性粒细胞核左移、核右移?有什么临床意义?简答：核左移：外周血中中性杆状核粒细胞增多，甚至出现更幼稚细胞(包括原始粒细胞)，称为核左移。核左移的粒细胞常伴有中毒颗粒、空泡变性、核变性等质的改变，常见于各种感染，特别是急性化脓性感染和白血病，也可见于急性中毒和急性溶血。核右移：正常中性粒细胞以三叶核者为主，若五叶核以上者超过3％，则称核右移。核右移为造血功能衰退或缺乏造血物质所致。常见于营养性巨幼红细胞性贫血、恶性贫血、抗代谢药物应用后。在疾病进行期突然出现核右移，为预后不良之兆。但在疾病恢复期亦可出现一过性核右移现象。简记为：白细胞成熟由幼稚的原始粒细胞到中性粒细胞核三五叶，粒细胞增多，偏左核左移，偏右核右移。左移感染中毒溶血，性质都是急性，另外还有白血病。左移常常伴有中毒颗粒，空泡和核变性。右移造血功能衰减，巨幼、恶性贫血最为常见。预后不良的右移，在疾病进行期突然出现。54．什么情况可引起淋巴细胞增减?简答：（1）淋巴细胞增多可见于某些病毒或细菌所致的急性传染病，某些慢性感染，淋巴细胞性白血病，再生障碍性贫血及粒细胞缺乏症(淋巴细胞相对增多)，肾移植术后(排异前期)。（2）淋巴细胞减少主要见于接触放射线及应用肾上腺皮质激素或促肾上腺皮质激素；严重化脓性感染，由于中性粒细胞显著增多，淋巴细胞百分率减低，但绝对值仍在正常范围。简记为：淋巴细胞增多，分为绝对增多和相对增多。绝对急性传染病，某些慢性感染，淋巴白再障，肾移植排异前。粒细胞缺乏症淋巴细胞相对增多。淋巴细胞减少，分为分为绝对减少和相对减少。绝对减少见于1线2激素，接触发射线，应用肾上腺或促肾上腺皮质激素。严重化脓性感染淋巴细胞相对减少。55．异型淋巴细胞是如何产生的？按其形态特征可分为几型？简答：在传染性单核细胞增多症、病毒性肺炎、流行性出血热、湿疹、过敏性疾病等病毒性感染或过敏原刺激下，可使淋巴细胞增生，并出现某些形态变化，称为异型淋巴细胞。近年来免疫学研究认为，异型淋巴细胞即T淋巴细胞。Downey按异型淋巴细胞的形态特征，将其分为三型；I型为空泡型，最多见；Ⅱ型为不规则型；Ⅲ型为幼稚型。简记为：在病毒性感染或过敏原刺激下，淋巴细胞增生并出现某些形态变化，此类细胞即为异型淋巴。异型淋巴按形态特征，分以下三型：I型空泡最多见，不规则幼稚列Ⅱ和Ⅲ。56．血小板计数有些什么方法?简答：血小板计数方法主要分为两类：血细胞分析仪法和目视显微镜法。血细胞分析仪法重复性好，而且可以测得血小板平均体积(MPV)和血小板体积分布宽度(PDW)。一般均以全血标本检测；但由于仪器计数不能完全区分血小板与其他类似大小的物质(如红细胞或白细胞碎片、灰尘等杂物)，因而有时仍需以显微镜计数校正之，因而仍将显微镜(特别是相差显微镜计数)法作为参考方法。显微镜法又可分为普通光镜法和相差显微镜法，后者准确率高，血小板易于识别。在各种稀释液中，无论血细胞分析仪器法或显微镜法，多以草酸铵溶血法作为参考。国内亦将此稀释液定为首选溶血剂。简记为：血小板计数有俩，血细胞分析仪和目视显微镜法；分析仪优点多，重复性好结果准确，参数多出MPV和PDW它们两个。不足之处为不能区分类血小板大小的物质，需有显微镜校正。稀释液首选草酸铵，对红细胞破坏力大，显微镜下，血小板形态清楚可见。57．用草酸铵溶血剂计数血小板有何优点?简答：对红细胞破坏力强，血小板形态清楚。58．复方尿素法作血小板计数的稀释液中各成分有何作用?简答：稀释液中尿素破坏红细胞，使其溶血；枸橼酸钠起抗凝作用；甲醛既可固定血小板，又可防腐。但尿素易于分解，且有时不能使红细胞完全溶解，反使计数发生困难。59．有些什么生理变化影响血小板数?简答：(1)正常人每天血小板数有6％一10％的波动，一般清晨较低，午后略高；春季较低，冬季略高；静脉血平均值较毛细血管血约高10％。(2)新生儿较婴儿低，出生3个月才达到成人水平。(3)妇女月经前较低，经期后逐渐上升；妊娠中晚期升高，分娩后降低。(4)剧烈活动和饱餐后暂时升高。简记为：像太阳的血小板，低位在晨春新，经前及分娩；升高在午后冬季妊娠晚，剧烈运动和饱餐。60．简述血小板的病理性变化(1)血小板减少：①血小板生成减少，如急性白血病、再生障碍性贫血、某些药物影响等；②血小板破坏过多，如免疫性或继发性血小板减少性紫癜、脾功能亢进等；③血小板消耗过多，如弥散性血管内凝血、血栓性血小板减少性紫癜等。(2)血小板增多：常见于慢性粒细胞性白血病、原发性血小板增多症、真性红细胞增多症、急性化脓性感染、急性出血后及脾切除手术后等。简记为：血小板病理性变化分为减少与增多；减少有生成减少、破坏过多以及消耗过多；生成减少急性白血病再障，及药物影响；破坏过多继发性减少性紫癜和脾亢，MIC及血栓性减少性紫癜。增多常见于原发性血小板增多，真性红细胞增多，急性岀血，急性化脓感染，慢性粒细胞性白血病及脾切除术后。原真2急，1慢粒白血病及脾切除术后增多。5性脾切除血小板增多。61．嗜酸性粒细胞在什么病理情况下增多?嗜酸性粒细胞计数可动态观察哪些疾病?简答：嗜酸性粒细胞在变态反应、某些皮肤病、寄生虫病及血液病等时增多，其他如猩红热、X线照射、脾切除及传染病恢复期等因素均可使之增多。计算嗜酸性粒细胞还可用于观察急性传染病和估计手术及烧伤病人的预后，以及测定肾上腺皮质功能。简记为：嗜酸增多是因为变态反应皮肤病在血液中的寄生虫增多。另传染病恢复期的猩红热在X线照射下脾切。嗜酸性粒细胞计数可动态观察1急性传染病2测定肾上腺皮质功能3估计手术及4烧伤病人的预后。62．为什么注射促肾上腺皮质激素(ACTH)后，嗜酸性粒细胞反而下降?简答：ACTH可促使肾上腺皮质分泌肾上腺皮质激素，而该激素有阻止骨髓释放嗜酸性粒细胞，并有促进血液中嗜酸性粒细胞进入组织的作用，故当肾上腺皮质功能正常时，注射ACTH后，在一定时间内，血中嗜酸性粒细胞降低。简记为：促肾上腺皮质激素(ACTH)有促使肾上腺皮质分泌肾上腺皮质激素，肾上腺皮质激素有两个主要作用1是阻止骨髓释放嗜酸性粒细胞；2是促进血液中嗜酸性粒细胞进入组织，因而注射ACTH后，在一定时间内，血中嗜酸性粒细胞降低。63．瑞特(Wright)染色法的原理是什么?简答：美蓝和伊红水溶液混合后，产生一种憎液性胶体伊红化美蓝中性沉淀，即瑞特染料。瑞特染料溶于甲醇后，又重新解离为带正电的美蓝(M+)离子和带负电的伊红(E—)离子。各种细胞和细胞的各种成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样，因而细胞或组织用瑞特染料进行染色后，可呈现不同的色彩。例如血红蛋白和嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合染成粉红色；细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合染成蓝色或紫色；中性颗粒成等电状态，与伊红和美蓝均可结合，染成紫红色。简记为：美蓝和伊红水溶液混合后产生伊红化美蓝中性沉淀，该沉淀即瑞特染料。瑞特染料溶于甲醇后，又重新解离为带正电的美蓝(M+)离子和带负电的伊红(E-)离子。各种细胞和细胞的各种成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样，因而染色后呈现不同的色彩。例如血红蛋白和嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合染成粉红色；细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合染成蓝色或紫色；中性颗粒成等电状态，与伊红和美蓝均可结合，染成紫红色。64．血片用瑞特染色法时，pH对其有何影响？简答：细胞主要成分均为蛋白质构成，由于蛋白质系两性电解质，所带电荷随溶液pH而定，在偏酸性环境中正电荷增多，易与伊红结合；染色偏红；在偏碱性环境中负电荷增多，易与美蓝或天青结合，染色偏蓝。简记为：血细胞主要由蛋白质构成，因为蛋白质属于两性电解质，所带电荷随溶液pH而定；酸正爱伊红，碱负爱美蓝或天青。65．如何检查瑞特染液质量?简答：采用吸光度比值(rA)，且用15—25μl染液加甲醇10mL稀释，在650nm和525nm比色(美蓝、伊红吸收峰波长分别为650和525，天青也是650)。rA=A650／A525。如rA下降到1．3土0．1时，即可使用。瑞特染液在储存过程中必须塞严，以防甲醇挥发和被氧化成甲酸。66．何谓红细胞沉降率(ESR)?其机制是什么?简答：ESR是红细胞在一定条件下沉降的速度。其机制尚未完全阐明，但ESR是多种因素互相作用的结果。这些因素包括：(1)血浆因素(如血浆中纤维蛋白原或球蛋白增多可使血沉增快)；(2)红细胞因素(如红细胞总面积减少或其直径增大、厚度薄，血沉增快)；(3)血沉管的位置(如血沉管倾斜可使血沉增快)。简记为：ESR是红细胞在一定条件下沉降的速度。其机制尚未完全阐明，但ESR是多种因素互相作用的结果。受多种因素影响，管红细胞和血浆。倾斜红细胞直径变大，纤维蛋白球蛋白增多均可使血沉增快。67．测定血沉的推荐方法是什么?对抗凝剂有什么要求?简答：国际血液学标准化委员会推荐魏氏法为测定血沉的标准法。要求用109mmol／L枸橼酸钠溶液，通过最大孔径为0．22μm的无菌膜过滤，在无菌容器中保存，不加防腐剂。如混浊则弃去不用。我国在1983年全国临床检验方法学学术会上亦推荐魏氏法作为血沉的参考方法。简记为：测定血沉推荐魏氏法，血液抗凝109mmol／L枸橼酸钠，比例为4：1啦。通过无菌膜0．22μm最大孔，保存在无菌容器中，不用防腐，混浊即弃去不要用。68．血沉测定有何临床意义?妇女月经期和妊娠3个月以上，此为生理性的。以及60岁以上老人血沉增高，病理性增高可见于①各种炎症；②恶性肿瘤；⑧高胆固醇血症；④组织损伤及坏死，如较大手术创伤和心肌梗死；⑤各种原因导致的高球蛋白血症，如亚急性感染性心内膜炎、系统性红斑狼疮等；⑥贫血，贫血系因红细胞数减少，下沉时受到摩擦阻力减少等原因所致。血沉减慢意义较小，可因红细胞数明显增多或纤维蛋白原严重减低，见于各种原因所致的脱水血浓缩、真性红细胞增多症和弥散性血管内凝血等。简记为：血沉测定，分为生理和病理性。生理性：老年女性经期中妊娠三个月以上可以使血沉加快。病理性分为增高和降低。增高见于贫血恶性肿瘤和各种炎症，各种原因引起的高球蛋白原血症，组织损伤坏死及高纤维蛋白原血症等等。减低见于红细胞数明显增多，纤维蛋白原严重减低。脱水红细胞增多症及弥散性血管内凝血均减低。69．简述红细胞比积测定方法及临床意义。红细胞比积(HCT)是将EDTAK2抗凝血在一定条件下离心沉淀后测出其红细胞在全血中所占体积的百分比。HCT测定方法很多，有折射计法、粘度法、比重测定法、离心法、电阻抗法和放射核素法等。放射核素法为参考方法，但非一般实验室所能开展。离心法测定HCT不够精确，因无法完全排除红细胞之间的残留血浆，故温氏离心法已属淘汰之列，渐为微量高速离心法替代。微量高速离心法用血量少、测定时间短、精度(CV)为1％--2％，但对某些血液病样品则血浆残留量仍较多。仪器法必须经参考方法校正后才能得出准确结果。目前多用微量高速离心法。参考值：微量法男0.467土0.039，女0.421土0.054；温氏法男0.40—0.54，女0.37—0.47。HCT增高可见于各种脱水和大面积烧伤病人；测定HCT可了解血液浓缩情况，作为补液计算的依据；HCT常用作计算平均红细胞容积(MCV)和平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)，有助于贫血的鉴别诊断；各种贫血时，红细胞减少，HCT常随之减低，但因不同性质贫血时红细胞大小不同，如此情况下，两者并不平行。简记为：红细胞比积(HCT)是将EDTAK2抗凝血在一定条件下离心沉淀后测出其红细胞在全血中所占体积的百分比。HCT测定方法很多，折射计离心来比重粘度，放射核素测电阻抗法等；测定方法温氏离心已淘汰，放射核素来参考，微量高速优点多，目前多用；血细胞分析也带有此参数，为电阻抗法。70．机体正常止血决定于哪些因素?简答：机体正常止血主要依赖于完整的血管壁结构和功能，有效的血小板质量和数量以及正常的血浆凝血因子活性。其中血小板和凝血因子的作用是主要的。简记为：有效的血小板质量和数量及正常活性的所有凝血因子在结构和功能血管壁内游动才能正常把血止住。71．写出凝血因子及其名称。简答：因子I(纤维蛋白原)、Ⅱ(凝血酶原)、Ⅲ(组织因子TF)，Ⅳ(钙离子)、V(易变因子)、Ⅶ(稳定因子)、Ⅷ(抗血友病球蛋白)、Ⅸ(血浆凝血活酶成分)、X(Stuart—Prower因子)、Ⅺ(血浆凝血活酶前质)、Ⅻ(接触因子)、Ⅷ（纤维蛋白稳定因子)、PK（又称激肽释放酶原)、HMWK(又称高分子量激肽原)。72.简述凝血过程。简答：在生理条件下，凝血因子处于无激活状态；当这些因子被激活后，即发生一系列酶促反应。传统的“瀑布学说”将凝血过程，分为下面几步反应。(1)内源性凝血途径：指从因子Ⅻ激活，到Ⅸa—PF3—Ca2+--Ⅷa复合物形成，后激活因子X的过程。(2)外源性凝血途径：指从因子Ⅶ被激活到形成Ⅶa或Ⅶa--TF复合物，后激活因子X的过程。所谓内源性或外源性凝血并非绝对独立而是互相联系的，说明凝血机制的复杂性。(3)凝血共同途径：指从因子X的激活到纤维蛋白形成的过程，简记为：大内高手，由高到低，12段起，形成9a-PF3-Ca2+--Ⅷa复合物，再激活10的过程。海外高手，有低到高，（无6）从7段激活，形成Ⅶa或Ⅶ所谓内源性或外源性凝血并非绝对独立而是互相联系的，说明凝血机制的复杂性。共同对敌，十分迅速的战胜敌人，让敌人交出纤维蛋白的过程。它是内、外凝血系统的共同凝血阶段。73．现代“组织因子途径学说”与传统“瀑布学说”有哪些不同之处?主要有以下几个不同之处：(1)体内凝血由组织因子(TF)启动。(2)活化的因子X(xa)和因子V(va)，使凝血酶原变为凝血酶。(3)TF被激活并与Ⅶa形成复合物后，会被组织因子途径抑制物抑制。(4)组织因子不仅存在于血管内皮及血管下纤维母细胞等组织细胞中，而且存在于单核细胞及肿瘤细胞中，当受到内毒素、抗原等刺激后，会被活化并启动凝血。74．机体抗凝系统分哪两类，各指什么?抗凝系统分为细胞抗凝和体液抗凝。细胞抗凝主要指正常血管内皮细胞的抗血栓功能和网状内皮系统细胞通过清除血循环中的抗凝物质而完成的抗凝作用。体液抗凝包括抗凝血酶Ⅲ(AT—Ⅲ)，蛋白C系统(PC—S)和组织因子途径抑制物(TFPI)。75．常规血栓止血筛选试验有哪些要求，包括哪些试验?筛选试验要求快速、准确、实用，能够覆盖大部分出血原因。常规筛选试验一般有：血小板计数、出血时间、血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白降解产物(FDP)测定等。76．什么是出血时间?简述出血时间的方法及临床意义。将皮肤毛细血管刺破后，血液自然流出到自然停止所需的时间称为出血时间(BT)。BT（bleetting）的长短主要受血小板数量和功能以及血管壁的通透性和脆性的影响，而血浆凝血因子影响较小。BT测定，以前用Duke法已停止使用，因其虽操作简单，但穿刺深度、宽度难以标准化，且受穿刺部位毛细血管分布及血管收缩程度的影响，致使实验的敏感性很差；Ivy法虽较Duke法敏感；但操作繁琐，皮肤切口大，不仅难以标准化，且创伤性大，影响因素也较多，因而难以推广。若临床怀疑血管异常所致出血性疾病(如血管性血友病、单纯性紫癜、过敏性紫癜等)，应使用测定器法(TBT)测定出血时间。测定器法参考值为6.9土2.1min。BT延长见于：①血小板明显减少，如原发性或继发性血小板减少性紫癜；②血小板功能异常，如血小板无力症和巨大血小板综合征；③严重缺乏血浆某些凝血因子所致疾病，如vWD、DIC；④血管异常，如遗传性出血性毛细血管扩张症；⑤药物干扰，如服用乙酰水杨酸、双嘧达莫等。简记为：BT测定方法有三；Duke法、Ivy法、测定器法。Duke法，操作简单，难以标准化，试验敏感性差。Ivy法，操作复杂、创伤性大，难以标准化，影响因素多，难以临床推广。测定器法(TBT)优点多，可以标准化；可以测定血管异常所致出血性疾病如血管性血友病、单纯性紫癜、过敏性紫癜等)。临床意义：BT延长见于：1血小板数量减少、功能异常2凝血因子缺乏3血管异常4、药物干扰。77．什么是凝血时间？简述凝血时间的测定方法及临床意义。凝血时间(clottingtime，CT)测定是将静脉血放入玻璃试管中，观察自采血开始至血液凝固所需的时间。本试验是反映内源凝血系统各凝血因子总的凝血状况的筛选试验。以前曾使用的玻片法和毛细血管法的敏感性和特异性均差，故已停止使用，用活化部分凝血活酶时间(APTT)或全血凝固时间(CT，试管法)替代。CT试管法参考值为4—12分钟。前法较后法敏感。CT延长可见于较显著的凝血因子Ⅷ、Ⅸ减少的血友病甲、乙，血因子Ⅺ缺乏症；血管性血友病；严重的凝血因子Ⅴ、Ⅹ、纤维蛋白原及凝血酶原缺乏；原发性或继发性纤溶活力增强；循环血液抗凝物质增加；等等。CT缩短可见于血栓前状态，DIC高凝期等；血栓性疾病如心肌死、不稳定心绞痛、肾病综合征及高血糖、高血脂等。78．什么是活化部分凝血活酶时间(APTT)?在受检血浆中加入APTT试剂(接触因子激活剂和部分磷脂)Ca2+后，观察其凝固时间。参考值：男31．5—43．5秒，女32一43秒。待测者的测定值较正常对照延长超过10秒以上才有病理意义。APTT为检查内源凝血系统是否正常的筛选试验；其长短可反血浆中内源凝血系统凝血因子(Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、Ⅷ)、共同途径中凝酶原、纤维蛋白原和凝血因子Ⅴ、Ⅹ的水平。简记为：在抗凝血浆中加入APTT试剂(接触因子激活剂和部分磷脂)和Ca2+后，观察其凝固时间。APTT大于正常对照10秒以上才有病理意义，是检查内源凝血系统是否正常的筛选试验。79．什么是血浆凝血酶原时间(PT)？简答：在抗凝血浆中，加入足够量的组织凝血活酶(组织因子，TF)和适量的Ca2+，即可满足外源凝血的全部条件。从加入Ca2+到血浆凝所需的时间，即血浆凝血酶原时间。PT是反映外源性凝血系统各血因子总的凝血状况的筛选试验。简记为：在抗凝血浆中，加入足够量的组织凝血活酶(组织因子，TF)和适量的Ca2+，从加入Ca2+到血浆凝所需的时间，即血浆凝血酶原时间PT。PT超过正常对照值3秒以上为异常，是外源性凝血系统各血因子总的凝血状况的筛选试验。P外A内，大于3、10秒，才有病理意义。80．血浆凝血酶原时间参考值如何确定?有何临床意义?参考值(1)凝血酶原时间11—13秒。应测正常对照值。病人测定值超过正常对照值3秒以上为异常。(2)凝血酶原比值(PTR)即被检血浆的：凝血酶原时间(s)／正常血浆的凝血酶原时间(s)，参考值为1.0土0．05。(3)国际标准化比值(INR)PTRISI，参考值为1．0土0．1。ISI为国际敏感度指数，ISI越小(小于2．0)，组织凝血活酶的敏感性越高。临床意义；(1)PT延长见于①先天性凝血因子I、Ⅱ、V、Ⅶ、X缺乏；②后天性凝血因子缺乏，如严重肝病、维生素K缺乏、纤溶亢进、DIC、口服抗凝剂、异常凝血酶原增加等。(2)PT缩短见于血液高凝状态如DIC早期、心肌梗死、脑血栓形成、深静脉血栓形成(DVT)、多发性骨髓瘤等。(3)INR是监测口服抗凝剂的首选指标，国人以INR为2．0—3．0为宜。81．骨髓检查的适应证及禁忌证。(1)适应证：①诊断造血系统疾病及疗效观察，如白血病诊断及化疗后的观察；②协助诊断某些疾病，如缺铁性贫血、溶血性贫血、高雪氏病等；③诊断原发性或转移性癌肿，如多发性骨髓瘤、肺癌、骨癌的骨体转移；④诊断某些原虫病，如黑热病、疟疾等；⑤提高某些疾病的诊断率，如用骨髓进行细菌培养、干细胞培养及染色体培养等。(2)禁忌证：对血友病患者禁止作骨髓穿刺。有明显出血倾向的病人及晚期孕妇应慎重。简记为：诊断诊断造血系统疾病及疗效观察、诊断原发性或转移性癌肿、诊断某些原虫病、协助诊断某些疾病、提高某些疾病的诊断率。3个诊断、1个协助诊断、1个提高诊断率。82．略述血细胞从幼稚到成熟过程中的形态变化规律。一般而言：(1)胞体：由大—>小(但巨核细胞由小—>大，粒系早幼比原粒大)。(2)胞核：①大小，由大—>小(巨核细胞胞核由小—>)大；成熟红细胞无核)；②形状，圆形—>(粒细胞)分叶；③染色质，细致、疏松—>粗糙、紧密；④核膜，不显著—>显著；⑤核仁，有—>无。(3)细胞质：①量，少—>多(淋巴细胞例外)；②颜色，深蓝—>浅蓝或淡红(淋巴细胞，单核细胞颜色不变)；③颗粒，无—>少—>多(红细胞系无颗粒)。83．骨髓检查报告一般应包括哪些内容?(1)取材、涂片和染色情况。(2)骨体象所见：包括有核细胞增生情况，粒／红比例，粒系统、红系统、淋巴系统、单核系统、巨核系统细胞等量和质的变化及其他异常细胞的情况，巨核细胞总数及血小板情况，有无寄生虫。并应注意血涂片情况。(3)提出诊断意见：根据骨髓象、血片所见并结合临床资料，可①作出肯定诊断；②支持临床诊断；③排除某些疾病；④不能支持临床诊断时可简述骨髓象的特点，提出复查或作其他检查的建议。84、列举几种常用的细胞化学染色。常用的细胞化学染色有：过氧化物酶染色、苏丹黑B染色、中性粒胞碱性磷酸酶染色、酸性磷酸酶染色、抗酒石酸酸性磷酸酶染、糖原染色、酯酶染色、铁染色、脱氧核糖核酸(DNA)染色、核糖核酸(RNA)染色等。简记为：过氧化物酶、苏丹黑、铁；糖原、酯酶、DNA、RNA；中性粒胞碱性磷酸酶、酸性磷酸酶等等。或简记为：铁、糖原，苏丹黑B；4个酶，还有2个A：DNA、RNA。85、简述尿液检验中常用的几种防腐剂的用途和用量。(1)甲苯或二甲苯，可用作化学检查如尿糖、尿蛋白定量等，每100ml尿中加入甲苯1—2ml。(2)麝香草酚：用于尿浓缩检查结核杆菌，每100mL尿中加入0.1g。(3)福尔马林：用于检查尿中有形成分，每100mL尿中加臣0.5ml。(4)浓盐酸：用于检测尿17—酮类固醇、17—羟皮质类固醇胺、尿素、钙及磷酸盐等，每100mL尿中加1mL。简记为：化学检查二甲苯，有形成分福尔马林。激素、尿素、钙及磷酸盐用浓盐酸，还可用于儿茶酚胺。结核杆菌麝香草酚。或者简记为：花甲的老人真有福，用麝香检查有无结核，结果用浓盐酸查出尿中有尿素钙及磷酸盐。86．尿量多少主要取决于什么?何谓多尿、少尿和无尿?尿量主要取决于肾小球滤过率和肾小管重吸收以及浓缩与稀释功能。24小时内尿量超过2．5L为多尿，少于0．4L或每小时尿量持续17mL(儿童<0．8mL／kg)为少尿，少于0．1L或12小时内完尿称为无尿；排简记为：尿量取决于，（肾小）球滤过，管重吸收与浓缩；2.5为多，缺一（0.1）少食（0.4）。87．正常尿液的pH值范围是多少?正常尿液为弱酸性，pH约6．0-pH变动范围在4．6—8．0之间，与人的摄食和活动有关。简记为：正常尿液弱酸6点零。变动范围4点6到8点零。主要有饮食活动来决定。88．正常尿液呈什么颜色?异常情况可出现什么颜色?正常尿液呈淡黄到橘黄色。如服用带黄色药物可呈黄色甚至黄；血尿可呈红色混浊；血红蛋白尿症或溶血性输血反应可出现色的血红蛋白尿；丝虫病或尿中磷酸盐增多可出现乳白色；恶性黑色素瘤或尿黑酸尿症时尿呈黑色。简记为：正常尿液淡黄至橘黄，异常红色血尿，黄色黄药物，细菌丝虫磷酸盐多为乳白色，黑色素瘤是黑色。89．什么是尿比密?尿比密(SG)是指在4℃因尿中含有3％一5％的固体物质，故尿比密大于纯水。90．测定尿比密有些什么方法?有称量法、浮标法、液体落滴下法、超声波法、折射仪法和试带法等。其中称量法最准确，常作为参考方法。浮标法(即尿比密计法)最普及，但标本用量多，实验影响因素多，准确性差。试带法简便，近年来已用于尿液分析仪测定比密，但测定范围较窄，实验影响因素亦多，精度差。总之尿比密测定可靠性不如尿渗量测定，易受非离子成分如糖、蛋白、造影剂等干扰。近年来尿比密测定有被尿渗量测定取代的趋势。91．何谓尿渗透量?有何特点?尿渗透量(osm)简称尿渗量，是指经肾脏排泄到尿液内全部溶质微粒的总数量。它反映溶质和水的相对排泄速度。电解质和尿素是起决定作用的溶质。测定尿渗量比测定尿比密更能确切地反映肾脏浓缩能力，是反映肾脏髓质功能的重要指标。92，尿比密测定有何临床意义?比密增高：见于脱水、蛋白尿、糖尿、惊厥、肾脂肪变性、急性肾小球肾炎、心力衰竭、高热、周围循环衰竭、使用造影剂等。比密减低：见于慢性肾炎、急性肾炎多尿期、尿毒症多尿期、胶原疾患、使用利尿剂等。测定比密还对鉴别糖尿病与尿崩症有意义。93．如何检查新购尿比密计的准确性?尿比密计是一种液体比密计，可观察规定温度下尿液的比密(比重)。简便的办法是：新购尿比密计可用在规定温度下，进行纯水和氯化钠溶液的比密检查：15．5℃蒸馏水应为1．000；145．4mm01／L(8.5g／L)氯化钠溶液为1.006；855．4mmol／L(50g94、尿中哪些因素可影响用尿比密计测定尿比密?尿中含蛋白质或糖可使尿比密增高，如尿中含蛋白质10g／L或葡萄糖55．5mmol／L(10g／1)，分别应从比密值中减去0．003或0．004；如尿中含造影剂，可使比密值大于1．050；如尿中盐类析出，尿素被分解，可使尿比密下降，故尿中有盐类析出，应待盐类溶解后再重测比密；如容器不洁，含未洗净的合成洗涤剂，可使水表面张力降低，比密值亦减低。最好用一次性容器。简记为：尿中含有糖、蛋白、造影剂可使比密增高，盐类结晶析出及含有合成洗涤剂可使比密降低，95．试带法测定尿比密的原理是什么?用试带测定尿比密要注意些什么事项?试带膜块中主要含有多聚电解质、酸碱指示剂和缓冲物。多聚电解质含有随尿液中离子浓度而离解的酸性基团，离子浓度越高，酸性基团(氢离子浓度)离解越多，从而使膜块中pH发生改变，这种改变可从膜块中的酸碱指示剂的颜色变化显示出来。试带法不受非离子化合物如葡萄糖影响；但易受pH影响，当尿液>pH7时应在测定结果基础上增加0．005；尿液中蛋白质增多时，亦可影响试带法测定比密。试带法不能用于尿液稀释试验，对过高过低的尿比密均不敏感，亦不宜用于新生儿尿检测。96．检测尿液pH可用哪些方法?尿液pH值即尿液酸度，可反映肾脏调节体液酸碱平衡的能力。测定尿pH有多种方法：指示剂法易受黄疸尿、血尿影响；pH精密试纸法目测不易准确，且试纸易吸潮变质；目前多采用pH试纸垫，以仪器自动化检测，能反映尿液pH5—9的变化范围，基本上能满足临床要求；对肾小管酸中毒的定位诊断、分型、鉴别诊断时，对酸碱负荷后的尿液则应用pH计进行精确的pH测定。简记为：尿液pH值即尿液酸度，可反映肾脏调节体液酸碱平衡的能力。检测方法有酸碱指示剂、PH计及PH试纸。97．有哪些常见因素影响尿液pH?进食蛋白质较多，饥饿，服用氯化钙、氯化钾、氯化铵、稀盐酸及尿中含酸性磷酸盐等，可呈酸性尿；食用蔬菜，含钾、钠较多的水果，服用碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸镁、枸橼酸钠及尿内混人多量脓、血或细菌污染等可呈碱性尿。98．尿液pH升高或降低有何临床意义?尿液pH升高可见于频繁呕吐、尿路感染、换气过度及丢失CO2过多的呼吸性碱中毒，服用重碳酸盐等。尿液pH降低可见于慢性肾小球肾炎、酸中毒、痛风、糖尿病等排酸增加、呼吸性酸中毒、CO2潴留等。99．对混浊尿如何鉴别?对混浊尿可按下列程序进行粗略鉴别：浑浊尿：第一步先试管内加热，如果浑浊消失，可判定尿酸盐增多。如果浑浊增加，在进行第二步；第二步向加热后混浊增加的试管加入稀乙酸，变清、无气泡磷酸盐变清、有气泡碳酸盐无变化脓尿、菌尿100．简述常见的各种蛋白尿的形成原因。(1)生理性蛋白尿或无症状性蛋白尿：指由于各种体内外环境因素对机体影响而导致的尿蛋白增多，可分为功能性蛋白尿(多见于青少年期，尿定量<0．5g／24h)和体位性蛋白尿(尿蛋白定性可达2+一3+)，卧床时则为阴性。(2)肾小球性蛋白尿：因肾小球受到炎症、毒素等损害引起的。尿蛋白常>2g／24h。(3)肾小管性蛋白尿：因炎症或中毒引起近曲小管对相对低分子质量蛋白质的重吸收能力减退而出现以相对低分子质量蛋白质为主的蛋白尿。单纯性肾小管性蛋白尿，尿蛋白含量较低，一般<lg／24h。(4)混合性蛋白尿：肾脏病变同时累及肾小球及肾小管。相对低分子质量的β2M及相对中分子质量清蛋白同时增多，相对大分子质量的蛋白质较少。(5)溢出性蛋白尿：主要指血循环中出现大量相对低分子质量蛋白质如本—简记为：（生理：）功能体位性蛋白尿，（病理：）球管混合后偶然溢出。101．何谓本--周蛋白?本--周(Bence—Jones)蛋白是一种免疫球蛋白的轻链单体或二聚体，属于不完全抗体球蛋白，分为κ型和λ型。尿中本--周蛋白在pH4.5—5.5加热至56℃时发生沉淀，煮沸至100℃失，再冷却时又重现沉淀，故本--周蛋白又称为凝溶蛋白。过筛检测可用热沉淀反应法。用电泳免疫分析，本--周蛋白大多位于γ区带及β—γ球蛋白间出现一条浓集的区带。为进一步分型，可用抗κ轻链及抗λ轻链进行免疫学测定，以区分轻链类型。简记为：本--周蛋白是一种免疫球蛋白的轻链单体或二聚体，属于不完全抗体球蛋白，分为κ型和λ型。山本五十六沉淀，百分之百的复溶，热沉淀反应来过筛，电泳在β—γ间，免疫学测定κ型和λ型。102．测定尿蛋白可用些什么方法?尿蛋白定性为过筛性试验，目前常用加热乙酸法、磺基水杨酸法和干化学试带法。干化学法是利用指示剂的蛋白质误差原理，即指示剂离子因与清蛋白携带电荷相反而结合，故使其所应显示的pH颜色变为较高的pH颜色变化，这种pH颜色改变的幅度与清蛋白含量成正比。一些药物如磺胺嘧啶、奎宁引起尿液呈强碱性，可使本法出现假阳性，而磺基水杨酸法呈阴性；使用大剂量青霉素后作尿蛋白检测，可使本法出现假阴性；而磺基水杨酸法则为假阳性。本法对球蛋白敏感性较差，因此必要时应用磺基水杨酸法或加热乙酸法复检或用双缩脲法进行定量试验；标本中含其他分泌物或细胞成分较多，可出现假阳性。加热乙酸法干扰因素较少，但应注意加酸不宜过多或过少，否则可远离蛋白质等电点，使阳性程度减弱；尿中盐浓度过低，可致假阴性。磺基水杨酸法操作简便敏感，但青霉素钾盐，高浓度尿酸、草酸盐及粘蛋白等均可出现假阳性。简记为：尿蛋白检测分为定性和定量测定。定性为过筛性试验，目前常用加热乙酸法、磺基水杨酸法和干化学试带法。定量为双缩脲比色法、丽春红—S法和考马斯亮蓝法及免疫测定法。**定性蛋白测定2酸（加热乙酸和磺基水杨酸）1（干化学试带）试带；定量蛋白双缩脲比色、1红（丽春红）和1蓝（考马斯亮蓝）及1灵敏特异的免疫测定。103．简述磺基水杨酸法测定尿蛋白质的原理。在略低于蛋白质等电点的pH条件下，蛋白质带有正电荷的氨基与带负电荷的磺基水杨酸根结合，形成不溶性蛋白质盐而沉淀。简记为：在略低于蛋白质等电点的pH条件下，蛋白质正氨基与负的磺基水杨酸根结合蛋白质盐沉淀。104．简述加热乙酸法测定尿中蛋白质的原理。加热煮沸使蛋白质变性凝固，加酸使尿pH接近蛋白质等电点(pH5左右)时，有利于变性蛋白质的沉淀。105．尿蛋白质定量可用什么方法？传统的艾氏试管法很不准确，已被淘汰。现在多用双缩脲比色法(参考范围0—120mg／24h)以及丽春红—S法[(46．5土18．1)mg／L]和考马斯亮蓝法E(96．6土38．0)mg／24h]等。更为灵敏和特异的方法是免疫测定法。以上方法各有其特点，由于尿蛋白质成分复杂，变化大，选用方法时要注意所用试验与各种蛋白，尤其是对清蛋白、球蛋白反应的灵敏度及线性范围，以保证质量。106．血红蛋白尿与肌红蛋白尿来源有何区别?如何检测?血红蛋白尿是因为血管内溶血等情况，血中游离血红蛋白急剧上升，超过肝珠蛋白的结合能力而从尿中排出，可用隐血试验方法检测；肌红蛋白(Mb)是当肌损伤时，肌红蛋白释放进入血循环，因其相对分子质量较小，易通过肾小球滤过，而排入尿中，用隐血试验不能与血红蛋白尿区别，可用正铁Hb与正铁Mb的氧化物在580—600nm处吸收光谱完全不同的特点加以区别，但灵敏度不够好，目前多用Mb的单克隆抗体进行酶联免疫吸附试验或放射免疫法，灵敏性和特异性均较好。107．尿中是否出现葡萄糖取决于什么因素?简答：取决于三个因素：①动脉血中葡萄糖浓度；②每分钟流经肾小球中的血浆量；③近端肾小管上皮细胞重吸收葡萄糖的能力即肾糖阈。108．目前尿糖定性过筛试验采用什么方法?以前采用的班迪试验由于其特异性差，现多已不用，现采用葡萄糖氧化酶试带法，可应用于尿化学分析仪。但尿中如含维生素C或服用大量左旋多巴，可抑制试带反应。简记为：葡萄糖氧化酶试带法，假阴性有维生素C或大量服用左旋多巴。班迪试验特异性差，已淘汰。109．班迪试验作尿葡萄糖定性试验是根据什么原理?尿中存在哪些物质或药物可干扰本试验？具有还原剂性质的糖类和其他一些物质，在热碱性溶液中能将Cu2+还原为Cu+，形成黄色的CuOH沉淀和红色的Cu20沉淀。尿液中含有大量铵盐时，可与试剂形成铜氨络离子而妨碍Cu2O的沉淀，尿中蛋白质如>0．5g／L，亦可干扰本反应。此外，如尿中合氯醛、葡萄糖醛酸化合物、异烟肼、链霉素、青霉素、大氨基水杨酸、水杨酸、阿司匹林、萘啶酸等或其他还原物质（如维生素C、肌酐、尿酸)，或其他糖(如果糖、乳糖、戊糖)时，现假阳性反应。因此本法不宜用于尿中葡萄糖检测。简记为：班迪试验原理是根据具有还原剂性质的糖类，在热碱性溶液中能将Cu2+还原为Cu+，形成黄色的CuOH沉淀和红色的Cu20沉淀。尿液中的铵盐及蛋白质如>0．5g／L可以干扰本反应，药物等或其他具有还原性物质及其他糖类可以造成假阳性。110．有些什么情况尿中出现葡萄糖?一类是血糖增高性糖尿，包括饮食性糖尿、一过性糖尿(应激)、持续性糖尿以及其他血糖增高性糖尿(如甲状腺功能亢进、大症、嗜铬细胞瘤和库欣综合征)。一类是血糖正常性糖尿，如肾性糖尿，因近曲小管对葡萄糖收功能低下所致。111.酮体包括哪些物质?哪些