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文档简介

(3)培养首先在B瓶中进行,瓶中的培养基成分有

________________等。在此瓶中培养一段时间后,有许多细胞衰老死亡,这是培养到第

代。(4)为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中,用

处理,然后配置成

,再分装。动物血清10胰蛋白酶细胞悬浮液

动物细胞培养过程:动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液胰蛋白酶原代培养传代培养单个细胞加培养液胰蛋白酶动物体细胞核移植技术和克隆动物多莉的诞生.swf克隆动物:用核移植的方法得到的动物。(一)、动物细胞核移植的概念:

动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体.(二)理论基础:动物的细胞核具有全能性(三)、分类:胚胎细胞核移植:体细胞核移植:细胞分化程度低,恢复全能性容易

细胞分化程度高,恢复全能性困难去核卵母细胞供体细胞

电刺激使两细胞融合重组细胞重组胚胎新个体代孕母牛C胚胎移植卵母细胞培养无性生殖(四)、体细胞的核移植过程高产奶牛A供体细胞培养供卵奶牛B1、重组细胞的构建2、早期胚胎的培养3、胚胎移植MⅡ期胚胎移植技术试管动物(婴儿)培养过程卵细胞精子体外受精受精卵胚胎新个体母体子宫内孕育、产出【讨论2】1.在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前,为什么必须先去掉受体卵母细胞的核?提示:为使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞,在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前,必须将受体细胞的遗传物质去掉或将其破坏。2.用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞,想一想,这是为什么?提示:培养的动物细胞一般当传代至10~50代左右时,部分细胞核型可能会发生变化,其细胞遗传物质可能会发生突变,而10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。因此,在体细胞核移植中,为了保证供体细胞正常的遗传基础,通常采用传代10代以内的细胞。3.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物,是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?为什么?

提示:克隆动物绝大部分DNA来自于供体细胞核,但其核外还有少量的DNA,即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。所以,用教材中所述的方法克隆的动物不是供核动物完全相同的复制。此外,即便动物的遗传基础完全相同,但动物的一些行为、习性的形成与所处环境有很大关系,核供体动物生活的环境与克隆动物所生活的环境不会完全相同,其形成的行为、习性也不可能和核供体动物完全相同,从这一角度看,克隆动物不会是核供体动物100%的复制。(四)、体细胞核移植技术的应用前景

1、在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的进程2、保护濒危物种3、生产医用蛋白质及组织器官的移植的供体(五)、体细胞核移植技术存在的问题

3.1997年,美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢辛达(Lucinda)的奶牛,年产奶量为30.8t,创造了世界奶牛产奶量最高新纪录。目前世界各国高产奶牛场奶牛,年平均产奶量一般为十几吨,而我国奶牛产奶量年平均水平仅为3~4t。

(1)能利用体细胞核移植技术克隆高产奶牛卢辛达吗?请说明理由。

提示:可以用体细胞核移植技术克隆高产奶牛卢辛达。卢辛达的产奶量很高,说明它有高产奶的遗传基础,利用卢辛达的体细胞克隆的奶牛其遗传物质基本上全部来自该奶牛,其克隆牛具有高产的遗传基础,如果精心培育和饲养,有可能在世界范围内推广,克隆牛再与高产的公牛自然繁殖,可得到很多高产的后代,从而加快奶牛改良进程。但同时需注意,该克隆牛不能无限制地推广,其数量不宜过多,尤其是在小范围内不能无限的繁殖,以避免奶牛群出现近亲繁殖而引起种质衰退。P50思考与探究

2)如果将克隆高产奶牛卢辛达的任务交给你,你将如何对它进行克隆?提示:首先从卢辛达耳朵(也可用别的组织、器官,耳朵在活体上容易取)上剪取一小块组织,在体外培养获得该组织(如软骨组织)的细胞。从屠宰场取废弃的牛卵巢,抽取卵母细胞体外培养成熟。用显微针去除卵母细胞的核,再将耳细胞注入卵母细胞,用电刺激方法使卵母细胞与体细胞融合,这时供体核就进入了受体卵母细胞,再用电刺激或化学物质激活注入了体细胞核的卵母细胞,使其完成减数分裂和发育过程。核移植胚胎在体外短时间培养后,挑选正常卵裂的胚胎植入经同期发情处理的受体母牛体内。4.体细胞核移植技术在研究和应用上还存在什么问题?请你查阅资料,了解这方面的前沿动态。提示:在研究方面,克隆动物基因组重新编程的机制尚不清楚,克隆技术效率低,克隆动物畸形率高、死亡率高、易出现早衰等问题。这些问题尚在研究中。在应用上,生产克隆动物费用昂贵,距大规模应用还有一定距离。2.2动物细胞工程教学目标重点难点问题探讨教学过程知识结构教学反馈课后习题教学参考2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体问题探讨

“番茄—马铃薯”(理想图)

通过长期的实验,科学家们采用体细胞杂交技术获得了“番茄—马铃薯”植株。如果将奶牛的细胞与植物细胞杂交,得到绿色的小奶牛,那岂不是只要晒晒太阳就可以挤出牛奶吗?动物细胞也能融合吗?一、动物细胞融合

细胞融合是正常的生命活动两个细胞正在融合

受精作用

动物细胞融合过程示意图不同DNA的两个细胞

灭活的病毒有丝分裂两个完整的杂交细胞1.动物细胞融合的概念

动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程,融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞。

动物细胞融合(细胞杂交)-2个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程细胞A细胞B杂交细胞灭活的病毒物理法化学法仙台病毒疱疹病毒新城鸡瘟病毒离心振动电激聚乙二醇用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程细胞核病毒颗粒细胞核一、动物细胞融合1.动物细胞融合的概念2、诱导融合的方法3、结束标志:4、结果:5、意义:细胞核融合形成杂交细胞(单核)灭活病毒诱导细胞融合的原理:病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞互相凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但并不破坏这些病原体的抗原结构。练习:在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是()A.结果是相同的

B.杂种细胞的形成过程基本相同C.操作过程中酶的作用相同D.诱导融合的手段相同B主要用于制备单克隆抗体获得杂种植株主要用途物理、化学方法(同左)灭活的病毒物理(离心

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