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文档简介

名词解释汇总分子杂交不同的DNA片段之间,DNA片段与RNA片段之间,如果彼此间的核苷酸排列顺序互补也可以复性,形成新的双螺旋结构。这种按照互补碱基配对而使不完全互补的两条多核苷酸相互结合的过程称为分子杂交。cDNA文库以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与适当的载体(常用噬菌体或质粒载体)连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。cDNA文库特异地反映某种组织或细胞中,在特定发育阶段表达的蛋白质的编码基因,因此cDNA文库具有组织或细胞特异性。选择标记基因选择基因(又称选择标记基因),主要是一类编码可使抗生素或除草剂失活的蛋白酶基因,这种基因在执行其选择功能时,通常存在检测慢(蛋白酶作用需要时间)、依赖外界筛选压力(如抗生素、除草剂)等缺陷。ORF开放阅读框(OpenReadingFrame,ORF)从起始密码子开始,是DNA序列中具有编码蛋白质潜能,一段无终止密码子打断的碱基序列。转化转化(transformation)是某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型的细胞的DNA而使它的基因型和表现型发生相应变化的现象。该现象首先发现于细菌。转染专指感受态的大肠杆菌细胞捕获和表达噬菌体DNA分子的过程转导转导(transduction)由噬菌体将一个细胞的基因传递给另一细胞的过程。它是细菌之间传递遗传物质的方式之一。其具体含义是指一个细胞的DNA或RNA通过病毒载体的感染转移到另一个细胞中。质粒不亲和性在没有选择压力下,两种不一样的质粒不能在同一宿主细胞系中稳定共存的现象RACERACE是基于PCR技术基础上由已知的一段cDNA片段,利用锚式PCR,快速扩增cDNA末端从而获得已知mRNA内一段小序列与3‘或5’的cDNA序列技术。基因工程在分子水平上进行遗传操作,指将一种或多种微生物的基因或基因组提取出来,或人工合成基因,按人们的愿望,进行严密的设计,经过体外加工重组,转移到另一种生物体的细胞中,使之能在受体细胞遗传并获得新的遗传性状的技术RT-PCRmRNA在逆转录酶的作用下得到cDNA第一链,让后直接以其为模板,用特定引物进行PCR的技术插入失活载体的标记基因常常含有一个或多个限制酶酶切位点,若用限制酶去处理这些位点并插入一段外源基因,该位点处基因出现无法正常表达的现象成为插入失活SD序列mRNA中用于结合原核生物核糖体的序列。SD序列在细菌mRNA起始密码子AUG上游7-12个核苷酸处,有一段富含嘌呤的碱基序列,能与细菌16SrRNA的3’端识别,帮助从起始AUG处开始翻译。穿梭质粒载体穿梭质粒是指一类具有两种不同复制起点和选择标记,因而可以在两种不同类群宿主中存活和复制的质粒载体。多克隆位点(MCS)载体上人工合成的含有多个限制酶酶切位点的DNA片段Southern印迹Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。其基本原理是:具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下,可按碱基互补的原则特异性地杂交形成双链。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结构的标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色,从而检测特定DNA分子的含量Western印迹western印迹是指将蛋白质样品经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,然后转移至到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,然后用抗体通过免疫学反应检测目的蛋白,分析基因的表达程度。Northern印迹Northern印迹杂交(Northernblot)。这是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。DNA印迹技术由Southern于1975年创建,称为Southern印迹技术,RNA印迹技术正好与DNA相对应,故被称为Northern印迹杂交,与此原理相似的蛋白质印迹技术则被称为Westernblot。Cosmid载体/黏粒指带有黏端位点(cos)的质粒。黏粒是由人工构建的含有λ噬菌体DNA的cos序列和质粒复制子的载体。探针(probe)探针是一小段单链DNA或者RNA片段(大约是20到500bp),用于检测与其互补的核酸序列。TmDAN变性温度,加热DNA溶液,使其对260nm紫外线吸光度突然增加,达到最大值一半时的温度DNA变性DNA变性是指核酸双螺旋碱基对的氢键断裂,双链变成单链,从而使核酸的天然构象和性质发生改变。变性时维持双螺旋稳定性的氢键断裂,碱基间的堆积力遭到破坏,但不涉及到其一级结构的改变。DNA复性DNA的复性指变性DNA在适当条件下,二条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象,它是变性的一种逆转过程。热变性DNA一般经缓慢冷却后即可复性,此过程称之为"退火"(annealing)。分子杂交不同的DNA片段之间,DNA片段与RNA片段之间,如果彼此间的核苷酸排列顺序互补也可以复性,形成新的双螺旋结构。这种按照互补碱基配对而使不完全互补的两条多核苷酸相互结合的过程称为分子杂交。操纵子操纵子(operon):指启动基因、操纵基因和一系列紧密连锁的结构基因的总称。启动子启动子是位于结构基因5'端上游的DNA序列,能活化RNA聚合酶,使之与模板DNA准确的结合并具有转录起始的特异性。增强子增强子(enhancer)指增加同它连锁的基因转录频率的DNA序列。ρ因子ρ因子ρfactor为存在于大肠杆菌中的,在遗传信息转录的终止阶段起作用的蛋白性因子。粘性末端被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,它们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。平末端当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,切开的DNA两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平末端DNA连杆DNA接头一段短的含酶切位点并能与钝性末端或粘性末端匹配的人工合成DNA片段。cDNA为具有与某mRNA(信使RNA)链呈互补的碱基序列的单链DNA即complementaryDNA之缩写,或此DNA链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链。感受态细胞能够从周围环境中摄取DNA分子,并且不易被细胞内的限制性核酸内切酶分解时所处的一种特殊生理状态称感受态转换子蓝白斑筛选蓝白斑筛选是一种基因工程常用的细菌重组子的筛选方法。野生型大肠杆菌(E.Coli)产生的β-半乳糖苷酶可以将无色化合物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)切割成半乳糖和深蓝色的物质5-溴-4-靛蓝。5-溴-4-靛蓝可使整个菌落产生蓝色变化。突变型大肠杆菌缺少完整的β-半乳糖苷酶,在含有互补片段质粒作用下,可形成完整的β-半乳糖苷酶,插入外源基因的质粒则破坏了半乳糖苷酶的编码,从而通过颜色变化筛选重组子。星活性星活性又称Star活性。是指由于反应条件不同而产生的切断与原来认识序列不同的位点的现象,也就是说产生Star活性后,不但可以切断特异性的识别位点,还可以切断非特异性的位点。产生Star活性的结果是酶切条带增多。同裂酶同裂酶的切割位点可能不同,识别序列和切同尾酶同尾酶,切割不同的DNA片段但产生相同的粘性末端的一类限制性内切酶。YACYAC载体主要是用来构建大片段DNA文库,特别是用来构建高等真核生物的基因组文库,并不用作常规的基因克隆。YAC带有天然染色体所有的功能元件,包括一个着丝粒,一个DNA复制起点,两个端粒。YAC能够容纳长达几百kb的外源DNA,这是质粒和黏粒办不到的。大片段的插入更有可能包含完整的基因,在染色体步移中每次允许更大的步移距离,同时能够减少完整基因组文库所需的克隆数目。受体细胞受体细胞是指在转化和转导(感染)中接受外源基因的宿主细胞。噬菌体表面显示技术噬菌体展示技术(phagedisplaytechnology)是将外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,使外源基因随外壳蛋白的表达而表达,同时,外源蛋白随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术。包涵体在某些生长条件下,大肠杆菌能积累某种特殊的生物大分子,它们致密地集聚在细胞内,或被膜包裹或形成无膜裸露结构,这种水不溶性的结构称为包涵体mRNA差别显示技术mRNA差别显示技术也称为差示反转录PCR(DifferentialDisplayofreverseTranscriptionalPCR)简称为ddRT-PCR。它是将mRNA反转录技术与PCR技术二者相互结合发展起来的一种RNA指纹图谱技术。目前已广泛应用于分离鉴定组织特异性表达的基因。差别基因表达(differentialgeneexpress)是细胞分化的基础。mRNA差别显示技术正是对组织特异性表达的基因进行分离的一种快速而行之有效的方法。该方法的基本原理是首先选取不同的组织样品或不同发育阶段的同一组织样品或同一组织样品经不同药物处理诱导的样品,经总RNA提取后,进行mRNA反转录合成cDNA。此cDNA的合成是采用Oligo(dT)12MN为引物,其中M为A,C,G中的任意一种,N为A,C,G或T中的任意一种,所以共有12种oligo(dT)12MN引物,其中M称为锚定碱基,起增大引物Tm值的作用,N称为分类碱基,对反转录进行分类。用这12种引物分别对同一总RNA样品进行cDNA合成,即进行12次不同的反转录反应,从而使反转录的cDNA具有12种类型,也就是对cDNA进行12种归类(目前较为流行的方法是进行4种归类,即M为简并碱基的形式存在),在此基础上对每一类cDNA进行随机引物和反转录引物PCR扩增,通过对组织样品的同一类cDNA的PCR选择性扩增产物凝胶电泳分析,从而反映出不同样品间基因的时间和空间上组织特异性的表达。如此众多种类的mRNA反转录产物经PCR选择扩增后其类型依然为数众多,很难用电泳系统加以快速准确地分离。因而需要对反转录产物cDNA进行归类处理,减轻不同PCR产物电泳分离的难度,提高分离的准确率。教学目标:了解声音的产生,声源,声音的传播,声速掌握声音特性:响度、振幅、音调、频率、音色知识梳理声音是由于物体的振动产生的;正在发声的物体叫声源;声音的传播需要介质,声音可以在液体、固体、气体中传播,但是不能在真空中传播,声音是一种波,它具有搭载信息和传递能量的作用。声音的强弱成为响度,振动的幅度称为振幅。声音的振幅越大,响度越大;声音的高低叫做音调;振动的快慢常用每秒振动的次数频率,频率的单位是Hz(赫兹);声音的高低决定于声音的振动频率,声音的振动频率越高,音调越高,频率越低,音调越低;音色取决于发生器的材料和结构;声音的三要素:响度、音调、音色。噪声:难听的、令人厌烦的声音、噪声的波形是杂乱无章的;从环境保护的角度考虑,凡是影响人们正常学习、工作和休息的声音都属于噪声;减少噪声的主要途径:控制噪声的声源(改变、减少或停止声源的振动),阻断噪声传播(主要方法是歌声、吸声和消音),在人耳处减弱噪声(戴护耳器,如耳塞、耳罩或头盔等)。人耳能听到的声波的频率的范围通常在20Hz到20000Hz,高于20000Hz的声波叫做超声波,低于20Hz的声波叫做次声波;与可听声相比,超声波具有方向性好(声呐)、穿透力强、易于获取比较集中的声能等特点,应用:声呐、B超成像、超声波速度测定器、超声波焊接器(塑料袋封口);检测和控制次声波有助于减少它的危害,并可用来预报地震、台风和检测核爆炸。附录资料:不需要的可以自行删除记叙文基础知识(一)记叙文的特点1、概念:以记叙、描写为主要表达方式,以写人记事,写景状物为主要内容的文章。2、分类:A、按样式分:通讯、回忆录、游记、新闻、参观访问记、民间故事。B、记叙内容分:写人、叙事、写景、状物。(二)记叙的要素和人称记叙的要素:时间、地点、人物、事件的起因、经过和结果。A、时间:一般用时间词表示;也有的间接表示事件的发生时间。B、地点:单一地点,事件在一处发生;还有的事件随情节发展而转换。C、人物:有主要人物和次要人物之分。主要人物往往体现文章的中心思想,次要人物帮助形成完整的情节,并对主要人物起衬托作用。D、起因:指引发事件的原因,一般在开头,也有在后头(倒叙)E、经过:指事件发展的过程,复杂事件的经过往往包含若干阶段,可先概括再综合。F、结果:指事件的结尾,一般也用记叙描写的表达方式,它是事件的一部分。如以抒情议论结尾的不能当作结果。记叙的人称:A、第一人称:以“我”、“我们”的身份叙述。“我”是其中的一个人物,文章记叙的人和事都是“我”的所见、所闻、所想,容易使读者产生真实而亲切的感觉。文中如有心理活动描写必定是“我”的,其他人物的心理活动只能是“我”猜测的,不可直接描写他人的心理活动。B、第二人称:出现在用第一人称或第三人称的叙述中,出于直接抒情的需要。但记叙文通篇一般不采用第二人称。C、第三人称:指作者站在“第三者”的立场上把人物的经历和事件的经过告诉读者。文中每人物都有自己的名字或称谓,没有“我”这个代词。其好处在于人物事件的展开不受时间和空间的限制,有比较广阔的活动范围,便于塑造人物形象和表现文章主题,文中每个人物的心理活动都可描写。(三)记叙的顺序记叙的顺序指记叙文材料安排方式,一般可分为顺叙、倒叙、插叙。1、顺叙:记叙的材料按时间推移、地点转移和事件发展的先后顺序来叙述的方法。用顺叙写的文章、层次、段落和事件发展的过程基本一致,可从时间推移、程序推进、空间转换等标志着手,理清思路。2、倒叙:先把事件的结果写出,或先把后发生的事(或是某个突出的片断或结局)叙述,然后再按事情的发生发展记叙,最后落到结果,使首尾呼应。其注意点:①开头一般先写结果,或是由眼前的事物引起回忆;②开始追述时,文章一般要用一两句话表明以下要追述以往的事;③追述部分仍按时间顺序写。3、插叙:在顺叙过程中插入与中心思想有关的事件。分析插叙要把握两点:一是转入插叙的过渡句。二是由插叙转到顺叙的过渡句,它们衔接要自然、完美。阅读时要注意插叙前后的过渡性文字。插叙的作用是对主要情节或人物描写起补充、衬托的作用。(四)记叙的中心与材料1、记叙的中心:就是作者凭借记人写景,给景状物告诉读者,自己对生活的看法。2、中心的把握:(1)、内容:一是文章所表现的主要内容,二是作者的感受、文章的意义。(2)、方法:抓具体材料:写人为主的,通过人物的语言、行动,从把握人物的性格特征和思想意义入手;叙事为主的,通过事件的起因、经过与结果进行归纳,从把握文章通过叙写的事件所要说明的道理入手;写景状物为主的,要根据所描写景物的特征,把握文章通过写景状物抒发的感情进行分析归纳。抓文章题目抓开头结尾抓议论抒情语句记叙的材料(内容):就是根据需要围绕中心在写人记事写景状物所叙述的生活内容。材料必须为中心服务。抓记叙的要素:如:写人为主的材料主要有:①人物的外貌、语言行动、心理描写②人物在社会生活中的具体表现③人物间的相互关系④作者对人物的态度\感情.记事为主的材料主要有:事件的发生、发展

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