现代生物科技专题复习课件

现代生物科技专题复习工具基因工程操作程序应用限制酶：来源、特点、作用DNA连接酶：种类、作用载体：作用、必需具备的条件、种类获取目的基因:3种方法；PCR原理、前提、条件、过程，结果构建基因表达载体：作用；组成及各组分的作用；导入受体细胞：植物、动物、微生物目的基因的检测和鉴定：分子水平（存在；转录；翻译）；个体水平动物植物医疗卫生：乳腺生物反应器、基因治疗植物细胞工程动物细胞工程细胞工程动物细胞培养体细胞核移植技术与克隆动物动物细胞融合单克隆抗体过程条件应用概念过程应用前景概念过程应用植物组织培养植物体细胞杂交技术原理、过程、条件过程、概念优势1、原理：细胞的全能性2、过程：离体的植物器官组织或细胞愈伤组织胚状体试管苗脱分化再分化植株无菌条件植物组织培养条件：

离体、营养物质、植物激素、一定的温度、适合的PH、适时光照、无菌环境。植物组织培养杂种植株融合的原生质体AB再生出细胞壁脱分化愈伤组织再分化1、过程植物细胞的融合植物组织培养植物细胞A原生质体B原生质体A杂种细胞AB去壁去壁人工诱导植物细胞B植物体细胞杂交技术2、概念

将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。3、优势和未解决的问题优势（与有性杂交方法比较）

：打破了不同种生物间的生殖隔离限制，大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围。未解决的问题：未能让杂种植物按照人们的需要表现出亲代的优良。植物体细胞杂交技术（一）动物细胞的培养

幼龄动物取动物器官和组织剪碎组织胰蛋白酶处理细胞培养单个细胞动物细胞培养技术：是其他动物细胞工程技术的基础

原理：细胞增殖（有丝分裂）2、培养条件：无菌无毒环境、充足营养、适宜温度、PH气体环境；3、应用（1）生产有价值的蛋白质制品，（如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体、动物激素）（2）检测有毒物质（3）用于生理、病理、药理等方面的研究（一）动物细胞培养（三）动物细胞融合1、概念：指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。2、过程：动物细胞A动物细胞B诱导，融合杂交细胞有丝分裂（膜融合、质融合）（核融合）注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞3、应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体1、原理：杂交瘤细胞双亲的遗传特性，即能迅速大量繁殖，又能分泌专一抗体。2、过程B淋巴细胞骨髓瘤细胞诱导融合B-B细胞B-瘤细胞瘤-瘤细胞选择培养杂交瘤细胞（B-瘤细胞）克隆化培养专一抗体检测杂交瘤细胞体外培养小鼠腹腔内增殖单克隆抗体（四）单克隆抗体单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高、可大量制备3.应用：

①作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与特异性结合优点：准确、高效、简易、快速②用于运载药物：制成“生物导弹”治疗疾病：主要用于癌症治疗（四）单克隆抗体1．下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。(1)

技术是单克隆抗体技术的基础。(2)根据培养基的用途分类，图中HAT培养基属于

培养基。(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是

。(4)动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用诱导剂外，还可以采用

。(5)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的

特点，又具备淋巴细胞的

特点。(6)淋巴细胞是由动物体

中的

细胞分化、发育而来。(7)杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是

。动物细胞培养选择特异性强，灵敏度高灭活的病毒

在体外大量增殖

分泌特异性抗体骨髓造血干细胞主动运输2.回答下列有关植物组织培养的问题。（1）用于植物组织培养的植物材料称为________。（2）组织培养中的细胞，从分化状态转变为未分化状态的过程称为________。（3）生产上用试管苗保留植物的优良性状，其原因是_______________________________。（4）培养过程中必需的营养条件是______________

_，另外还需要________________等调节类物质。（5）此种方法获得的胡萝卜的突出优点是________________，更有利于人体的健康外植体脱分化组织培养形成试管苗的过程属于无性生殖，后代不发生性状分离。水、无机盐和小分子的有机物生长素和细胞分裂素植株无病毒3、上图是制备分泌抗原X抗体的过程，根据图解回答问题：⑴制备单克隆抗体的步骤：①将

注入小鼠体内，从小鼠脾脏中获得淋巴细胞，其中至少1个淋巴细胞带有抗该抗原的抗体。②将步骤①获得的B淋巴细胞与步骤②培养的骨髓瘤细胞诱导融合。③将诱导后产生的多种细胞，放在＿培养基的多孔培养板上培养，筛选。④这样获得的杂交瘤细胞具有B淋巴细胞

的能力。⑤检测和分离带有抗X抗体的阳性细胞，培养板中每孔放一个细胞进行培养。⑥将阳性细胞进行增殖，从而制备出大量抗该抗原的单克隆抗体。抗原X选择性产生专一抗体又能迅速大量繁殖⑵单克隆抗体是由同样的抗体分子组成，与一般的血清抗体相比，单克隆抗体的优点是

。⑶用本法制备出的单克隆抗体仍具有局限性，因为它是用小鼠的

细胞制备的，其化学本质是

，对人类有异物性和免疫原性。灵敏度高、特异性强B淋巴蛋白质植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理细胞膜的流动性、细胞膜的流动性细胞融合的方法去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合诱导方法物理（离心、振荡、电刺激）化学（聚乙二醇）物理、化学方法（同左）灭活的病毒用途获得杂种植株制备单克隆抗体精原细胞有丝分裂初级精母细胞次级精母细胞精子细胞精子MⅠ第一阶段第二阶段第三阶段MⅡ精子发生的过程多个精原细胞染色体复制变形1)精子获能:精子必须在雌性动物的生殖道发生相应的生理变化后,才获得受精能力的生理现象.2)卵子的准备:在输卵管中发育到减数第二次分裂的中期,才具有与精子受精的能力受精前的准备阶段1)顶体反应

顶体内的酶释放出来并溶解放射冠内的卵丘细胞。2)透明带反应透明带反应是防止多精入卵受精的第一道屏障2)卵黄膜封闭作用

卵黄膜封闭作用是防止多精入卵受精的第二道屏障3)雌、雄原核形成

雄原核形成和雌原核形成4)原核融合形成合子

雌雄原核融合形成合子(受精卵)受精过程试管动物供体公牛精子供体母牛的卵子精子体外获能卵子的体外培养体外受精体外胚胎培养胚胎移植受体母牛子宫产仔2.精子的收集和获能

1)收集的方法:假阴道法,手握法,电刺激

2)获能处理:培养法：啮齿动物、家兔和猪化学诱导法：牛、羊体外受精3.受精

体外受精获能的精子和成熟的卵子在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程受精卵卵裂期桑椹胚囊胚原肠胚组织器官形成：在透明带内进行有丝分裂，细胞数量不断增加，但胚胎总体积并不增加，或略有减少。：由具有全能性细胞构成，细胞数在32个左右，排列紧密，形似桑椹内细胞团：发育成胎儿各组织滋养层细胞：发育成胎膜和胎盘最初发育在输卵管进行有丝分裂外胚层中胚层内胚层原肠腔胚胎的早期培养胚胎移植的概念1.概念:将雌性动物的早期胚胎,或者通过其他方式得到的胚胎,移植到同种的.生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之发育为新个体的技术.供体：提供胚胎的个体。受体：接受胚胎的个体。选择供体母牛受体母牛……同期发情处理……超数排卵供体公牛配种冲卵质量检查、培养胚胎移植妊娠检查分娩（胚胎移植的犊牛）胚胎移植的基本程序胚胎分割1.概念:采用机械方法将早期胚胎切割成2等份,4等份或8等份等,经移植获得同卵双胎或多胎的技术.2.特点:后代具有相同的遗传物质.克隆.3.选择的胚胎:发育良好的,形态正常的桑椹胚或囊胚.4.使用的主要仪器：实体显微镜和显微操作仪胚胎干细胞1.概念:简称ES或EK细胞,是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞.2.特点:1)形态:体积小.细胞核大,核仁明显.2)功能:具有发育的全能性.可分化为成年动物体内任何一种组织细胞.体外培养可增殖不分化.3）在体外培养的条件下，ES细胞可以增殖而不发生分化。对它可以进行冷冻保存，也可以进行遗传改造。例1、下图为牛胚胎移植的基本程序，请据图回答：（1）图中a、b、c过程分别是指____________、________________、__________。（2）在胚胎移植过程中，供、受体母牛选择好后，要用________激素进行同期发情处理,这样处理的原因是供体和受体生殖器官的生理变化相同，为胚