2023届宁夏银川市金凤区六盘山高级中学高考仿真模拟生物试卷（含答案解析）

2023学年高考生物模拟试卷注意事项：1．答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其它答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上，写在本试卷上无效。3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．已知果蝇的灰体与黑檀体为一对相对性状，直毛与分叉毛为另一对相对性状，两对相对性状各由一对等位基因控制。一只灰体分叉毛雄蝇与一只黑檀体直毛雌蝇杂交，F1为灰体直毛，F1果蝇相互交配得到的F2中，灰体直毛：黑檀体直毛：灰体分叉毛：黑檀体分叉毛=9：3：3：1。下列分析错误的是（）A．灰体对黑檀体为显性、直毛对分叉毛为显性B．控制上述两对相对性状的等位基因独立遗传C．控制直毛和分叉毛的基因可能位于常染色体上D．控制灰体和黑檀体的基因可能仅位于X染色体上2．如图是质膜的流动镶嵌模型，①~④表示构成质膜的物质，下列叙述正确的是（）A．这是电镜下面观察到的质膜流动镶嵌的结构B．②的尾部和③一起存在于脂双层的内部C．质膜中都存在③，③的存在使得质膜比较“坚实”D．质膜具有选择透性是由④体现出来的3．用光学显微镜观察洋葱根尖分生组织，下列叙述错误的是（）A．能观察到部分细胞的染色体出现联会现象 B．能观察到部分细胞的染色体形态比较清晰C．能观察到部分细胞的两极各有一套染色体 D．能观察到部分细胞中有两个成形的细胞核4．绿脓杆菌利用一种独特的分泌系统——6型分泌系统，将有毒的蛋白传递给竞争细菌；随后，有毒蛋白开始分解对手中名为肽聚糖的结构蛋白；最终，竞争细菌的防御性细胞壁出现崩溃，从而被绿脓杆菌所击败。下列叙述正确的是（）A．通常情况下，T2噬菌体不会寄生在绿脓杆菌体内B．绿脓杆菌的DNA分子中碱基对的增添、缺失或替换一定引发基因突变C．有毒蛋白基因在转录时，RNA聚合酶的结合位点在RNA上D．有毒蛋白属于分泌蛋白，是由附着于内质网上的核糖体合成5．下列有关细胞结构的叙述，错误的是（）A．溶酶体的存在，可避免水解酶破坏整个细胞B．将离体的溶酶体和液泡放于蒸馏水中均会发生破裂C．高尔基体是真核细胞中的物质转运系统，承担着物质运输的任务D．将叶绿体中所有磷脂分子铺展成单分子层，其面积约是叶绿体表面积的4倍6．下列能说明细胞已发生分化的依据是（）A．RNA聚合酶结合到DNA上 B．缺氧条件下进行无氧呼吸C．细胞中有胰岛素的DNA D．细胞中有胰岛素的mRNA二、综合题：本大题共4小题7．（9分）2018年7月，某生物公司的百白破疫苗检验不符合规定。为生产高效价疫苗和简化计划免疫程序，科学家研制出基因工程乙肝-百白破(rHB-DTP)四联疫苗，经各项检测均通过rHB-DTP四联疫苗制检规程的要求。其有效成分是乙肝病毒表面抗原、百日咳杆菌、白喉杆菌和破伤风杆菌的四种类毒素。请分析回答下列问题：(1)为获取百日咳杆菌类毒素的基因，可从百日咳杆菌的细胞中提取对应____________，在逆转录酶的作用下合成双链cDNA片段，获得的cDNA片段与百日咳杆菌中该基因碱基序列__________________(填“相同”或“不同”)。(2)由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比较小，且序列已知，获得目的基因可采用__________，然后通过____________大量扩增，此技术的前提是已知一段目的基因的核苷酸序列以便合成引物。(3)把目的基因导受体细胞时，科学家采用了改造后的腺病毒作为载体，写出你认为科学家选它的理由________________________________________________。(写出2点)(4)研究发现，如果将白喉杆菌类毒素20位和24位的氨基酸改变为半胱氨酸，免疫效果更好，请写出此种技术的基本流程____________________________________。(5)实验证明，一定时间内间隔注射该疫苗3次效果更好，其主要原因是体内产生的_________数量增多，当同种抗原再次侵入人体时二次免疫的特点是____________，免疫预防作用更强。8．（10分）生物技术就像把双刃剑，它既可以造福人类，也可能在使用不当时给人类带来灾难。回答下列问题。（1）试管婴儿技术是体外受精、胚胎移植技术的俗称。精子和卵子在体外受精后，应将受精卵移入__________________中继续培养，以检查_________。（2）“试管婴儿”技术诞生后，继而出现了“设计试管婴儿技术”，二者在技术手段上的区别是_________人认为用设计试管婴儿的办法救治自己的孩子不合乎伦理道德，其主要理由是____。（3）2016年，“三亲试管婴儿”在英国出生，下图表示“三亲试管婴儿”的培育过程。图示过程中代表婴儿母亲卵母细胞的是_____，“三亲试管婴儿"技术能避免母亲的_____遗传病基因传递给后代。该婴儿的孕育过程中依次使用了____、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等技术（4）“基因编辑婴儿”指通过基因编辑技术修改人体胚胎精子或卵细胞细胞核中的DNA后生下的婴儿。基因编辑是应对遗传性疾病的一个潜在办法，但它极具争议性，因为这些修改将遗传给后代，最终有可能影响整个人类的_________。9．（10分）含有限制酶的细胞中通常还具有相应的甲基化酶，这两种酶对DNA分子有相同的作用序列，但具有不同的催化功能。甲基化酶可以对DNA序列进行修饰，使限制酶不能对这一序列进行识别和切割。回答下列问题：（1）目前，基因工程中使用的限制酶主要是从_____________生物中分离纯化获得的。构建“基因组文库”和“cDNA文库”的过程中需要使用DNA连接酶的是_____________（填“基因组文库”、“cDNA文库”或“基因组文库和cDNA文库”）。（2）为在短时间内大量获得目的基因，可用的技术是_____________。目的基因获取之后，需要进行_____________，此步骤是基因工程的核心。（3）用酵母菌合成的人胰岛素和利用细菌合成的人胰岛素在空间结构上存在一定差异，其原因是_____________。（4）含有某种限制酶的细胞，可以利用限制酶切割外源DNA，但不破坏细胞自身的DNA，其原因可能有①_____________；②_____________。10．（10分）前不久，某生物公司的百白破疫苗检验不符合规定。为生产高效价疫苗和简化计划免疫程序，科学家研制出基因工程乙肝－百白破（rHB－DTP）四联疫苗，经各项检测均通过rHB－DTP四联疫苗制检规程的要求。其有效成分是乙肝病毒表面抗原、百日咳杆菌、白喉杆菌和破伤风杆菌的四种类毒素。请分析回答：（1）为获取百日咳杆菌类毒素的基因，可从百日咳杆菌的细胞中提取对应mRNA，在______的作用下合成双链cDNA片段，获得的cDNA片段与百日咳杆菌中该基因碱基序列_____（填“相同”或“不同”）。（2）由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比较小，且序列已知，获得目的基因可采用________，然后通过PCR技术大量扩增，此技术的前提是已知________________________________。（3）把目的基因导入受体细胞时，科学家采用了改造后的腺病毒作为载体，写出你认为科学家选它的理由_________________________________________________。（写出2点）（4）研究发现，如果将白喉杆菌类毒素20位和24位的氨基酸改变为半胱氨酸，免疫效果更好，请写出此种技术的基本流程_____________________________________。（5）实验证明，一定时间内间隔注射该疫苗3次效果更好，其主要原因是体内产生的_____细胞数量增多，当同种抗原再次侵入人体时二次免疫的特点是_____。11．（15分）我国南方部分地区是β—地中海贫血症（多在婴儿期发病）高发区。研究发现，该病患者的β—珠蛋白（血红蛋白的组成部分）合成受阻，原因是血红蛋白β链第39位氨基酸的编码序列发生了改变，由正常基因A突变成致病基因a（如下图所示。AUG、UAG分别为起始密码子和终止密码子）。回答下列问题：（1）过程①所需要的酶是______。过程①与过程②在时间上具有不连续性，其主要原因是______。（2）若异常mRNA翻译产生了异常β—珠蛋白，则该异常β—珠蛋白由______个氨基酸组成。（3）为监测和预防β—地中海贫血症，可通过了解家庭病史，分析该遗传病的______，估算出后代的患病风险，并进一步通过______等手段，有效降低患儿的出生率。（4）基因治疗是治疗该病最有效的手段，但存在技术、伦理、安全性等诸多问题。请你为患者提供两条目前可行的治疗建议：______。

2023学年模拟测试卷参考答案（含详细解析）一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、D【答案解析】

相对性状的亲本杂交，子代只有一种表现型，则可判断子代出现的性状即为显性性状。XY型性别决定的生物，隐性性状的雌性和显性性状的雄性杂交，若子代雌性均为显性性状，雄性均为隐性性状，则可判断基因位于X染色体上。【题目详解】A、因为灰体分叉毛雄蝇与黑檀体直毛雌蝇杂交，F1表现为灰体直毛，因此灰体对黑檀体为显性、直毛对分叉毛为显性，A正确；B、F1果蝇相互交配得到的F2中，灰体直毛：黑檀体直毛：灰体分叉毛：黑檀体分叉毛=9：3：3：1，符合基因自由组合定律，B正确；C、单独分析毛型这对表现型，分叉毛雄蝇×直毛雌蝇，F1全为直毛，F2中直毛与分叉毛的比例为3：1，仅根据以上数据我们不能准确判断出控制果蝇毛型的基因是位于常染色体上还是仅位于X染色体上，需要补充数据，如统计分叉毛个体的性别比例，C正确；D、单独分析体色这对表现型，若控制果蝇体色的基因仅位于X染色体上，灰体雄蝇×黑檀体雌蝇，后代雌蝇应全为灰体，雄蝇应全为黑檀体，这与实验结果不符，因此控制果蝇体色的基因不可能仅位于X染色体上，D错误。故选D。【答案点睛】本题旨在考查学生对于伴性遗传规律、基因的自由组合定律的实质和应用的理解，根据子代表现型在雌雄个体间的比例判断性状遗传是常染色体遗传还是性染色体的遗传的方法的掌握程度，并应用相关知识对某些遗传问题进行解释、推理、判断的能力。2、B【答案解析】

细胞膜主要由脂质和蛋白质组成，还有少量的糖类。

细胞膜的功能：1.将细胞与外界环境分开；2.控制物质进出细胞；3.进行细胞间的物质交流。

细胞膜的结构特点是流动性，功能特性是选择透过性。

据图分析，①为糖蛋白，②为磷脂分子，③为胆固醇，④为蛋白质。【题目详解】A、这是质膜的流动镶嵌模型，不是电镜下看到的结构，A错误；B、③胆固醇的作用是与②磷脂的非极性尾部一起存在于脂双层内部，使质膜具有一定的流动性，又比较坚实，B正确；C、并不是所有质膜都有胆固醇，胆固醇是动物细胞膜的重要成分，C错误；D、细胞膜的选择透性与构成膜的磷脂分子和④蛋白质分子都有关，D错误。故选B。【答案点睛】易错点：胆固醇存在于动物细胞和少数植物细胞质膜上，在调节膜的流动性，增加膜的稳定性以及降低水溶性物质的通透性等方面都起着重要作用。3、A【答案解析】

采用洋葱根尖分生区细胞为实验材料，目的是观察植物细胞的有丝分裂过程，实验需要制作临时装片，步骤为：解离（盐酸和酒精混合液）→漂洗→染色（碱性染料，如龙胆紫或醋酸洋红）→制片，其中经过解离步骤后，细胞已经死亡，因此该实验中不会观察到细胞有丝分裂的动态变化过程。【题目详解】A、用洋葱根尖制成装片不能观察到同源染色体联会现象，因为洋葱根尖分生区细胞进行有丝分裂，而同源染色体联会现象发生在减数分裂，A错误；B、有丝分裂中期的细胞，染色体形态比较稳定，数目比较清晰，可以选择分裂中期的细胞观察染色体的形态和数目，B正确；C、处于有丝分裂后期的细胞，由于着丝粒分裂，姐妹染色单体分开成为染色体，在纺锤丝的牵引下两条子染色体移向两极，可以选择有丝分裂后期的细胞观察到两极各有一套染色体，C正确；D、真核细胞有丝分裂末期，核膜、核仁重建，一个细胞中存在两个细胞核，可以选择有丝分裂末期的细胞，能观察到细胞中有两个成形的细胞核，D正确。故选A。【答案点睛】本题考查观察有丝分裂实验，对于此类试题，需要考生掌握的细节较多，如实验的原理、实验步骤、实验选取的材料、采用的试剂及试剂的作用、实验现象及实验结果等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。4、A【答案解析】

基因突变：DNA分子中发生碱基对的替换、增添和缺失，而引起的基因结构改变。转录是以DNA一条链为模板，以游离的核糖核苷酸为原料，在RNA聚合酶的催化作用下合成RNA的过程。【题目详解】A、T2噬菌体是一种专门寄生在大肠杆菌体内的病毒，A正确；B、基因是有遗传效应的DNA片段，绿脓杆菌的DNA分子中碱基对的增添、缺失或替换如发生在非遗传效应的DNA片段中，就不会引发基因突变，B错误；C、有毒蛋白基因在转录时，RNA聚合酶的结合位点在DNA上，C错误；D、绿脓杆菌没有复杂的细胞器，只有分散的核糖体，D错误。故选A。5、D【答案解析】

各种细胞器的结构、功能细胞器分布形态结构功能线粒体动植物细胞双层膜结构有氧呼吸的主要场所，细胞的“动力车间”叶绿体植物叶肉细胞双层膜结构植物细胞进行光合作用的场所；植物细胞的“养料制造车间”和“能量转换站”。内质网动植物细胞单层膜形成的网状结构细胞内蛋白质的合成和加工，以及脂质合成的“车间”高尔基体动植物细胞单层膜构成的囊状结构对来自内质网的蛋白质进行加工、分类和包装的“车间”及“发送站”（动物细胞高尔基体与分泌有关；植物则参与细胞壁形成）核糖体动植物细胞无膜结构，有的附着在内质网上，有的游离在细胞质中合成蛋白质的场所“生产蛋白质的机器”溶酶体动植物细胞单层膜形成的泡状结构“消化车间”，内含多种水解酶，能分解衰老、损伤的细胞器，吞噬并且杀死侵入细胞的病毒和细菌液泡成熟植物细胞单层膜形成的泡状结构；内含细胞液（有机酸、糖类、无机盐、色素和蛋白质等）调节植物细胞内的环境，充盈的液泡使植物细胞保持坚挺中心体动物或某些低等植物细胞无膜结构；由两个互相垂直的中心粒及其周围物质组成与细胞的有丝分裂有关【题目详解】A、溶酶体有“消化车间”之称，内含多种水解酶，能分解衰老、损伤的细胞器，所以溶酶体的存在使水解反应局限在一定部位，不会破坏整个细胞，A正确；B、将离体的溶酶体和液泡放于蒸馏水中，由于溶酶体内浓度和细胞液浓度大于外界溶液，均会吸水涨破，B正确；C、高尔基体是真核细胞中的物质转运系统，承担着细胞内物质运输的任务，C正确；D、叶绿体具有双层膜结构，除此之外，类囊体薄膜也属于生物膜，因此将叶绿体中所有磷脂分子铺展成单分子层，其面积约大于叶绿体表面积的4倍，D错误。故选D。6、D【答案解析】

1、细胞分化指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态，结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。2、细胞分化的根本原因：基因选择性表达的结果。3、同一生物体内不同部位的细胞DNA、基因、转运RNA相同，但RNA和蛋白质不完全相同；呼吸酶基因和ATP合成酶具有在所有细胞中都表达，与细胞分化无关。【题目详解】A、RNA聚合酶结合到DNA上说明该DNA即将转录，不能说明细胞是否分化，A错误；B、绝大多数细胞在缺氧条件下都能进行无氧呼吸，与细胞分化无关，B错误；C、同一生物体所有具核体细胞都含有相同的遗传物质，且都含有该个体的全部DNA，因此具有胰岛素DNA，不能说明细胞已经分化，C错误；D、只有胰岛B细胞能合成胰岛素，其他细胞不合成胰岛素，细胞中有胰岛素的mRNA，说明该细胞中的胰岛素基因选择性表达，该细胞发生了分化，D正确。故选D。【答案点睛】本题考查了细胞分化的相关知识，首先要求考生掌握细胞分化的概念，明确同一生物体所有细胞都含有相同的遗传物质，且都含有该个体的全部基因；其次要求考生掌握细胞分化的实质，再选出正确的选项。二、综合题：本大题共4小题7、mRNA不同化学方法人工合成（人工化学合成）PCR技术能自主复制有多个限制酶切位点、有标记基因从预期蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列记忆细胞短时间内迅速产生大量的抗体和记忆细胞【答案解析】

目的基因可以直接分离，也可以用人工的方法合成，目前常用方法有：①从基因文库中获取；②人工合成（反转录法和化学合成法）；③PCR技术扩增目的基因。人工合成法只能合成已知序列片段，而且片段越长，合成难度越大；基因组文库中获取的目的基因是这种生物的所有基因，包含启动子，终止子以及内含子等；cDNA文库获取的目的基因是mRNA反转录来的，是这种生物的部分基因，不含启动子，终止子以及内含子，因此对真核细胞来说，从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同。蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求，蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成DNA→表达出蛋白质。注射疫苗目的是促使机体发生免疫反应，产生抗体和记忆细胞，多次注射的目的是增多机体内的记忆细胞的数量，导致应答效果显著增强。【题目详解】(1)为获取百日咳杆菌类毒素的基因，可从百日咳杆菌的细胞中提取对应mRNA，在逆转录酶的作用下合成双链cDNA片段，获得的cDNA片段与百日咳杆菌中该基因碱基序列不同。(2)由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比较小，且序列已知，获得目的基因可采用化学方法人工合成（人工化学合成），然后通过PCR技术大量扩增。(3)改造后的腺病毒有多个限制酶切位点、有标记基因，且能自主复制，因此可作为载体将目的基因导受体细胞。(4)将白喉杆菌类毒素20位和24位的氨基酸改变为半胱氨酸利用的是蛋白质工程原理，基本流程是：从预期蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。(5)实验证明，一定时间内间隔注射该疫苗3次效果更好，其主要原因是体内产生的记忆细胞数量增多，当同种抗原再次侵入人体时会引发二次免疫，二次免疫的特点是短时间内迅速产生大量的抗体和记忆细胞，免疫预防作用更强。【答案点睛】本题结合免疫，以基因工程乙肝-百白破四联疫苗的产生为背景，考查基因工程中目的基因获取的方法、基因表达载体构建和蛋白质工程等内容，难度不大。8、发育培养液受精状况和受精卵的发育能力后者胚胎在移植前需进行遗传学诊断把试管婴儿当人体零配件工厂，对生命不尊重，抛弃或杀死多余胚胎，无异于“谋杀”等等卵母细胞B线粒体核移植基因库【答案解析】

1、胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。2、胚胎移植的生理学基础：①动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的。这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。②早期胚胎在一定时间内处于游离状态。这就为胚胎的收集提供了可能。③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应。这为胚胎在受体的存活提供了可能。④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。【题目详解】（1）试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。精子和卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。（2）设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎，然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术，设计试管婴儿技术的胚胎在移植前需进行遗传学诊断。用设计试管婴儿的办法救治自己的孩子是否合乎伦理道德，对此人们持有不同的意见，反对的理由主要是有人认为这是把试管嬰几当人体零配件工厂，对生命不尊重，他们认为早期的生命也有活下去的权利，拋弃或杀死多余胚胎，无异于“谋杀”等等。（3）该母亲提供卵母细胞的细胞核，捐赠者提供去核卵母细胞，所以该男婴母亲的卵母细胞是B；由图可知，三亲试管婴儿的培育技术能避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代，三亲婴儿的培育过程依次使用了核移植、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等技术。（4）基因编辑技术修改了人体胚胎、精子或卵细胞细胞核中的DNA，修改后的基因将遗传给后代，并最终有可能影响整个人类的基因库。【答案点睛】本题考查细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记核移植技术的概念及过程；识记体外受精技术的步骤及应用，能对克隆动物和试管动物进行比较，再作出准确的判断。9、原核基因组文库和cDNA文库PCR构建基因表达载体酵母菌是真核生物，其细胞中的内质网和高尔基体能对人胰岛素进行加工，而细菌则不能细胞自身的DNA分子没有该限制酶的识别序列甲基化酶对细胞自身的DNA分子进行修饰【答案解析】

1、关于限制酶，考生可以从以下几方面把握：（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（3）结果：形成黏性末端或平末端。2、PCR技术：（1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。（2）原理：DNA复制。（3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。（4）条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）（5）过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。【题目详解】（1）目前，基因工程中使用的限制酶主要是从原核生物中分离纯化获得的。构建基因组文库和cDNA文库的过程中都需要使用DNA连接酶。（2）PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，利用该技术可以在短时间内大量获得目的基因。基因工程的核心构建基因表达载体。（3）由于酵母菌是真核生物，其细胞中的内质网和高尔基体能对核糖体上合成的人胰岛素进行加工，而细菌属于原核生物，没有内质网和高尔基体，因此不能对人胰岛素进行修饰和加工。（4）含有某种限制酶的细胞，可以利用限制酶切割外源DNA，但不破坏细胞自身的DNA，其原因可能有：①细胞自身的DNA分子没有该限制酶的识别序列；②甲基化酶对细胞自身的DNA分子进行了修饰。【答案点睛】本题考查基因工程的知识点，要求学生掌握基因工程的操作步骤，特别是掌握PCR扩增技术的过程，理解限制酶的来源和功能，这是该题考查的重点。另外理解原核生物与真核生物结构的区别，这是解决第（3）问的关键。10、逆转录酶不同化学方法人工合成（人工化学合成）一段目的基因的核苷酸序列以便合成引物能自主复制、有多个限制酶切位点、有标记基因、对宿主细胞无害从预期蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列记忆短时间内迅速产生大量的抗体和记忆细胞，免疫预防作用更强【答案解析】

1、基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。