工业微生物学实验试题(附解析)-生物工程-生物技术-制药工程-天津科技大学-03知识讲解

工业微生物学实验试题(附解析)-生物工程-生物技术-制药工程-天津科技大学-03题号一二三四五六七八总成绩得分得分一、名词解释（共20分，每小题4分）1.显微镜分辩力

2.鉴别培养基3.无菌操作4.大肠菌群:5.细菌菌落总数:得分二、填空题（共20分，每空0.5分）1.根据显微镜物镜与标本之间的介质的性质不同,物镜可分为物镜和油浸系物镜.前者是指物镜与标本之间的介质是。后者是指物镜与标本之间的介质是一种和玻璃折光率相近的，实验中使用油浸系物镜最常用的放大倍数是。利用油镜进行细菌的形态观察,实验结束后,要用擦镜纸蘸取擦拭油镜镜头。2.配制好的培养基要立即进行,经灭菌的培养基要放入培养箱中做,以确定培养基是否可用。3.培养基按其来源主要分为培养基,培养基和培养基。4.实验室中常用的干热灭菌方法有两种,如接种工具一般采用灭菌法,玻璃器皿常采用灭菌法,具体做法是将玻璃器皿放入内。5.微生物的接种方法有很多,对于细菌来讲,要在平板上获得单个的菌落,通常使用接种方式为。接种后的平板一般要倒置于培养箱中进行培养,其倒置培养的原因是。6.革兰氏染色的一般过程主要包括,固定,,,,，水洗和镜检等步骤。在操作过程中,最关键的步骤是。经革兰氏染色后,大肠杆菌被染成色,八叠球菌被染成色。7.请写出以下菌种的拉丁学名:大肠杆菌,枯草芽孢杆菌,酿酒酵母。8.显微测微尺主要由测微尺和测微尺组成.在进行细胞大小测定之前,测微尺要先进行标定。9.测定酵母细胞死亡率时,所用的染料是,染色2-3分钟后,于显微镜下观察,其中变蓝的细胞为细胞。10.麦氏计数板的规格为，在麦氏计数板一个滴加稀释10倍的样品,

按对角线方位,左上,右上,左下,右下四个大格的细胞数分别为64个,100个,80个,96个.则每毫升菌液中所含的酵母细胞数为。11.霉菌菌丝观察主要利用作介质。12.在显微镜下易于观察到霉菌的无性孢子,其中毛霉和根霉的无性孢子是,青霉和曲霉的无性孢子是。13.在细菌生理生化实验中,三糖铁高层琼脂中含有的糖主要有葡萄糖,蔗糖,

乳糖三种糖.其中,是另外两种糖含量的1/10倍.其斜面含有指示剂酚红,它在pH小于6.8时为黄色,大于8.4时为红色,伤寒沙门氏菌在该培养基中生长一定时间后,其斜面的颜色为色,大肠杆菌为色。14.在进行酵母菌细胞出芽率测定的时候,芽体数10个,酵母细胞数为40个,则该样品中酵母细胞的出芽率为。得分三、选择题（共8分每题1分）1.配制固体培养基时所用凝固剂含量一般为（），半固体培养基常用凝固剂含量一般为（）。A．1.5%-2%

B.5%-7%

C.0.6%-0.8%

D.15%-20%2.干热灭菌常用的灭菌温度是（），灭菌时间为4-6小时。A.120℃

B.121℃

C.140℃

D.115℃3.下列培养基中，哪种培养基不是培养酵母常用的培养基（）？A.麦芽汁培养基B.马铃薯葡萄糖琼脂培养基C.YEPD培养基D.

牛肉膏蛋白胨培养基4.下列最适于霉菌生长的培养温度为（）A．28℃

B.35℃C.25℃

D.37℃5.实验过程中，霉菌的接种工具一般为（），接种方式为（）。A.接种针

B.接种钩

C.划直线

D.点接6.明胶液化实验，明胶的水解是由于细菌所产生的（）的作用。A.脂肪酶

B.纤维素酶

C.蛋白酶

D.淀粉酶7.斜面试管的标签应贴在斜面的正上方，距管口（）处。A.1cm-1.5cm

B.1.5cm-2cm

C.2cm-2.5cm

D.2.5cm-3cm8.下列霉菌中有足细胞的霉菌为（）。A.毛霉

B.青霉

C.根霉

D.曲霉得分三、问答题（共52分）1.简要说明湿热灭菌为什么比干热灭菌更加有效?(6分)2.以大肠杆菌和产气肠杆菌为例，说明其在VP实验与MR实验中的结果为什么刚好相反（7分）3.在啤酒生产过程中,常需要检测发酵液中的酵母细胞浓度,简述不同的计数方法并说明其优缺点（10分）.4.简述目镜测微尺的标定过程。（10分）5.以假丝酵母为例,说明小室培养的操作过程.(7分)6.现有绿茶一瓶,简要说明该产品中的细菌菌落总数的检验程序及测定过程.(12)试题解析一、名词解释（共20分，每小题4分）1.显微镜分辨力指显微镜分辨被检物体细微结构的能力,也就是判断两个物体点之间最短距离的本领,以R表示.计算公式为:R=λ/(2N.A)=λ/[2n·sin(α/2)]2.鉴别培养基一类含有某种代谢产物指示剂的培养基,微生物在这类培养基上生长后,分泌的代谢产物与指示剂起反应产生某种明显的特征性变化,根据这种变化将该种微生物与其它微生物区分开来.3.无菌操作指用灭过菌的接种工具,在无菌条件下,接种含菌材料于灭过菌的培养基上,这一过程叫无菌操作.4.大肠菌群大肠菌群系指一群在37℃,24小时能发酵乳糖,产酸,产气,需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌5.细菌菌落总数被检样品经过处理后,在一定条件下培养后,所得1克或1mL检样中所含细菌的菌落总数.得分二、填空题（共20分，每空0.5分）1.根据显微镜物镜与标本之间的介质的性质不同,物镜可分为干燥系物镜和油浸系物镜.前者是指物镜与标本之间的介质是空气。后者是指物镜与标本之间的介质是一种和玻璃折光率相近的香柏油，实验中使用油浸系物镜最常用的放大倍数是100倍。利用油镜进行细菌的形态观察,实验结束后,要用擦镜纸蘸取二甲苯擦拭油镜镜头。2.配制好的培养基要立即进行湿热灭菌,经灭菌的培养基要放入培养箱中做无菌检查，以确定培养基是否可用。3.培养基按其来源主要分为天然培养基,合成培养基和半合成培养基。4.实验室中常用的干热灭菌方法有两种,如接种工具一般采用灼烧灭菌法,玻璃器皿常采用干热灭菌法,具体做法是将玻璃器皿放入干热灭菌箱内。5.微生物的接种方法有很多,对于细菌来讲,要在平板上获得单个的菌落,通常使用接种方式为三区划线。接种后的平板一般要倒置于培养箱中进行培养,其倒置培养的原因是防止冷凝水冲走菌落。6.革兰氏染色的一般过程主要包括制片,固定,结晶紫初染,碘液媒染,乙醇脱色,番红复染，水洗和镜检等步骤。在操作过程中,最关键的步骤是脱色。经革兰氏染色后,大肠杆菌被染成红色,八叠球菌被染成紫色。7.请写出以下菌种的拉丁学名:大肠杆菌E.coli,枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis,酿酒酵母Saccharomycescerevisiae。8.显微测微尺主要由目镜测微尺和镜台测微尺组成.在进行细胞大小测定之前,目镜测微尺要先进行标定。9.测定酵母细胞死亡率时,所用的染料是美蓝染液,染色2-3分钟,于显微镜下观察,其中变蓝的细胞为死细胞。10.麦氏计数板的规格为16×25

，在麦氏计数板一个滴加稀释10倍的样品,

按对角线方位,左上,右上,左下,右下四个大格的细胞数分别为64个,100个,80个,96个.则本次检测的酵母细胞浓度为

1.4×107个/mL

。11.霉菌菌丝观察主要利用乳酸苯酚油作介质。12.在显微镜下易于观察到霉菌的无性孢子,其中毛霉和根霉的无性孢子是孢子囊孢子,青霉和曲霉的无性孢子是分生孢子。13.在细菌生理生化实验中,三糖铁高层琼脂中含有的糖主要有葡萄糖,蔗糖,

乳糖三种糖.其中,葡萄糖是另外两种糖含量的1/10倍.其斜面含有指示剂酚红,它在pH小于6.8时为黄色,大于8.4时为红色,伤寒沙门氏菌在该培养基中生长一定时间后,其斜面的颜色为红色,大肠杆菌为黄色。14.在进行酵母菌细胞出芽率测定的时候,芽体数10个,酵母细胞数为40个,则该样品中酵母细胞的出芽率为

25%

。得分三、选择题（共8分每题1分）1.配制固体培养基时所用凝固剂含量一般为（A），半固体培养基常用凝固剂含量一般为（C）。A．1.5%-2%

B.5%-7%

C.0.6%-0.8%

D.15%-20%2.干热灭菌常用的灭菌温度是（C），灭菌时间为4-6小时。A.120℃

B.121℃

C.140℃

D.115℃3.下列培养基中，哪种培养基不是培养酵母常用的培养基（D

）？A.麦芽汁培养基

B.马铃薯葡萄糖琼脂培养基C.YEPD培养基

D.

牛肉膏蛋白胨培养基4.下列最适于霉菌生长的培养温度为（A

）。A．28℃

B.35℃C.25℃

D.37℃5.实验过程中，霉菌的接种工具一般为（B

），接种方式为（D）。A.接种针

B.接种钩

C.划直线

D.点接6.明胶液化实验，明胶的水解是由于细菌所产生的（C

）的作用。A.脂肪酶

B.纤维素酶

C.蛋白酶

D.淀粉酶7.斜面试管的标签应贴在斜面的正上方，距管口（D

）处。A.1cm-1.5cm

B.1.5cm-2cm

C.2cm-2.5cm

D.2.5cm-3cm8.下列霉菌中有足细胞的霉菌为（D）。A.毛霉

B.青霉

C.根霉

D.曲霉得分四、问答题（共52分）1.简要说明湿热灭菌为什么比干热灭菌更加有效?(6分)在同一温度下，湿热的杀菌效力比干热大，其原因有三：一是湿热中细菌菌体吸收水分，蛋白质较易凝固，因蛋白质含水量增加，所需凝固温度降低（2分），二是湿热的穿透力比干热大（2分）；三是湿热的蒸汽有潜热存在，每1克水在100℃时，由气态变为液态时可放出2．26kJ（千焦）的热量。这种潜热，能迅速提高被灭菌物体的温度，从而增加灭菌效力（2分）。3.以大肠杆菌和产气肠杆菌为例，说明其在VP实验与MR实验中的结果为什么刚好相反（7分）多数细菌能够分解葡萄糖,但分解葡萄糖的途径和产物却不完全相同。（2分）例如大肠杆菌能够利用分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸继续代谢可进一步生成其它的有机酸,大肠杆菌所产生的酸能使培养基的pH降到4.2或更低,从而使甲基红指示剂变成红色,显示MR试验阳性（2分）.而产气肠杆菌在在利用葡萄糖生成丙酮酸后,一部分丙酮酸脱羧生成中性的乙酰甲基甲醇,在强碱性环境中,被空气中氧气氧化,生成双乙酰,双乙酰与蛋白胨中的精氨酸胍基作用生成红色化合物,V-P试验结果为阳性（2分）.而大肠杆菌不能生成中性化合物,因此V-P试验阴性（1分）,而产气肠杆菌中的丙酮酸不能进一步分解生成大量的有机酸,因此MR试验阴性（1分）.4.在啤酒生产过程中,常需要检测发酵液中的酵母细胞浓度,简述不同的计数方法,过程,并说明其优缺点（10分）①直接计数法（1分）,主要利用血球计数板进行计数,计数结果即包括活细胞数,也包括死细胞数（2分）.优点:快速,简便;缺点:难以确切知道活细胞数（2分）.②间接计数法（1分）,也称活细胞计数法,主要是将样品稀释,利用倾注法倒平板,先将稀释过的样品倒在平皿内,然后将冷却至45℃的培养基注入平皿,轻轻摇匀,使之混和（2分）.优点是反映真实,缺点是耗时太长,且易有人为误差（2分）.5.简述目镜测微尺的标定过程（10分）(1)把接目镜的上透镜旋开，将目镜测微尺轻轻放入接目镜中隔板上，使有刻度的一面朝下。(2)将镜台测微尺放在显微镜的载物台上，使有刻度的一面朝上。(3)先用低倍镜观察，对准焦距，待看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度相平行，并使二尺左边的一条线重合，向右寻找另外二尺相重合的直线。(4)记录两条重合刻度间的目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。(5)目镜测微尺每格长度的计算：按下面的公式计算。（每步2分）6.以假丝酵母为例,说明小室培养的操作过程.(7分)①取一培养皿,内放一层吸20%的甘油或水的滤纸,其上放一玻璃U形管;（1分）②从酒精浸泡的干净载玻片中有镊子夹取一块,燃烧灭菌,放在U形管上;（1分）③首先将PDA半固体培养基溶化,冷却至45℃并保温,取假丝酵母一环按液体接种方式接种于其内,用酒精消毒的玻璃棒蘸取一滴已接种假丝酵母的PDA,迅速滴到已灭过菌的载玻片上,侍凝固后,用火焰烧过的盖玻片轻盖于其上,轻压,要求中央培养基直径不大于0.5cm,盖玻片和载玻片之间的距离不超过0.5mm.制好片后,盖好皿盖.（4分）④于28℃培养,培养过