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第五章细胞融合与杂交脾细胞(B淋巴细胞)骨髓瘤细胞杂交瘤细胞长命不分泌抗体分泌抗体短命分泌抗体长命Köhler和Milstein,19751984年Nobel医学奖一、细胞融合的概念和目的细胞融合:自然或人为条件下,两个或两个以上细胞相互接触,发生膜融合、胞质融合和核融合形成融合细胞的现象。目的:获得杂种优势细胞膜的结构模式图膜脂的主要运动方式侧向扩散的频率:106/s
侧向扩散伸缩震荡摆动运动旋转运动翻转运动旋转异构化运动
细胞融合关键是膜的融合,而膜融合的关键是相邻的膜脂不稳定。
中文名称:聚乙二醇用于细胞融合的分子量:1000-6000使用浓度:30-60%。PEG的处理时间:时间较短PEG分子量和浓度越大,其融合率越高,但它的细胞毒性和粘度也随之增大。
三、PEG的性质四、PEG促融合作用机理1、PEG含有大量醚键,可吸附溶液中大量的自由水,使细胞凝集。
2、PEG可使细胞膜的脂类分子发生重排,排开膜蛋白,并作用于膜磷脂极性基团和细胞膜表面蛋白,使膜磷脂的表面电位下降,同时使膜糖蛋白的排阻体积减少,最终使膜出现缺口。PEG诱导细胞融合的特点:1、价格低廉,操作方便,融合能力强。2、有毒,易损伤细胞。4.PEG诱导细胞融合常用分子量为
。
A.100-400B.1000-4000C.10000-40000D.以上均不对5.PEG诱导细胞融合的常用浓度为
。
A.5%B.10%C.50%D.100%6.PEG诱导细胞融合的时间一般为
。
A.1minB.2.5minC.10minD.25min7.PEG诱导细胞融合一般与
搭配使用。
A.Na
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