DB37-T 3313-2018 肥料中壳聚糖含量测定 分光光度法

ICS71.040.40G20

DB37山 东 省 地 方 标 准DB37/T3313—2018肥料中壳聚糖含量测定分光光度法DeterminationofChitosaninFertilizerbySpectrophotometry20182018061220180712山东省质量技术监督局发布前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由山东省质量技术监督局提出。本标准由山东化工标准化技术委员会归口。有利、张守福、林成彬、王海华。肥料中壳聚糖含量测定分光光度法范围本标准规定了含壳聚糖肥料中壳聚糖含量的测定方法。本标准适用于由虾蟹壳为原料加工处理而成的水溶性壳聚糖的测定。规范性引用文件（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法HG/T2843化肥产品化学分析常用标准滴定溶液、标准溶液、试剂溶液和指示剂溶液方法原理肥料中壳聚糖经水解后生成氨基葡萄糖，与乙酰丙酮和对二甲氨基苯甲醛生成红色化合物，在525nm波长处用分光光度计测定。试剂或材料本标准中所用试剂、水和溶液的配制，在未注明规格和配制方法时，应符合HG/T2843的规定。盐酸：分析纯。无醛乙醇（或四无乙醇）：分析纯。氢氧化钠：分析纯。无水碳酸钠：分析纯。氢氧化钠溶液：400g/L40g100mL。碳酸钠溶液：c（1/2Na2CO3）=1.0mol/L2.65g50mL。3.5mL，加入碳酸钠溶液（4.6）50mL，置冰箱中备用，应于使用前一日配制。0.8g，加无醛乙醇（4.2）15mL（4.1）15mL，摇匀。盐酸氨基葡萄糖标准品：99.9%。盐酸氨基葡萄糖标准储备溶液：ρ（盐酸氨基葡萄糖）=1.000mg/mL1050.1g（0.0002g），100mL盐酸氨基葡萄糖标准溶液：ρ（盐酸氨基葡萄糖）=0.1000mg/mL。准确移取盐酸氨基葡萄糖标准储备溶液（4.7）10.00mL，100mL仪器1cm525nm恒温水浴锅。恒温干燥箱。0.0001g。分析步骤试样的制备1000.50mm（1.00mm试验筛）100mL，置于洁净、干燥容器中。试样溶液的制备称取含壳聚糖约00mg的试样（固体或液体）适量（称准至0.0002g，置于50mL烧杯中加水溶解，定量转移到100mL1.00mL于25mL具塞刻度试管中，加5mL浓盐酸溶液，摇匀，盖上试管塞，于100℃水浴（或能达到同等水解温度的恒温干燥箱）水解2h，冷却，用氢氧化钠溶液中和至7（用pH试纸检测，加水稀释至刻度，摇匀，作为试样溶液。标准曲线的绘制移取盐酸氨基葡萄糖标准溶液（4.11）0.00mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL分别置于25mL具塞刻度试管中，然后再分别加入5.00mL、4.00mL、3.00mL、2.00mL、1.00mL、0.00mL蒸馏水至5.00mL，各加入乙酰丙酮溶液（4.7）2.00mL，摇匀，于100℃水浴中（1min后加盖）静置25min，取出，用冰水迅速冷却后，加入无醛乙醇3.00mL，于60℃水浴中静置10min后，再加入对二甲氨基苯甲醛（4.8）2.00mL，用力振摇后，由60℃水浴中静置1h，取出立即用冷水冷却至室温，加蒸馏水定容至25mL，摇匀，配成一系列含盐酸氨基葡萄糖分别为0mg、0.1mg、0.2mg、0.3mg、0.4mg、0.5mg的标准工作溶液。在波长525nm处，用1cm比色皿，以试剂空白为参比液，测其吸光值，拟定标准曲线方程。比色过程在30min内完成。试样的测定2.00mL（300μg）6.35.00mL”1mL（4.1）代替对二甲氨基苯甲醛溶液作为空白，其他操作同样品。将测得的吸光值带入标准曲线方程，求得氨基葡萄糖的质量。空白试验除不加试样外，其他步骤同试样溶液。分析结果的表达以质量分数表示的壳聚糖（以氨基葡萄糖计）的质量分数：w)10025100m10002

...........................(1)式中：m1——求得的试样盐酸氨基葡萄糖的质量，单位为毫克（mg）；m0——空白盐酸氨基葡萄糖的质量，单位为毫克（mg）；m——试样的质量，单位为克（g）；0.8309——盐酸氨基葡萄糖换算为氨基葡萄糖的系数。允许差平行测定结果和不同实验室测定结果的允许差应符合表1要求。表1平行测定结果和不同实验室测定结果的允许差海藻酸