分析高效液相色谱法测定中药中甘草酸的含量

分析高效液相色谱法测定中药中甘草酸的含量〔〕:

摘要：通过高效液相色谱法对重要中甘草酸含量进展检测。甘草酸提取于0.3%的氨水超声中，将其置于SyncronisC18色谱柱上，流动相及流速分别设置为55%乙腈和1.0mL/min，柱温及检测波长分别设置为30℃和256nm。1.5-50g/mL范围内，甘草酸具备良好的线性关系〔r=0.9991〕，检测限及方法精细度RSD分别是0.19g/mL和0.88%〔n=5〕。高效液相色谱法具有操作简单、灵敏度高、分析速度快等特点。

关键词：甘草酸；中药；高效液相色谱法

本文引用格式：高晓宁,刘沙,张立娟,等.分析高效液相色谱法测定中药中甘草酸的含量[J].世界最新医学信息文摘,2022,19(69):121.

0引言

我国诸多中药材中较为常见的一种是甘草，甘草中，甘草酸是相对重要的活性成分【1】。高效液相色谱法是检测甘草酸含量的主要方法。

1实验

1.1检测仪器与试剂。电子精细天平、色谱柱、高效液相色谱仪；甘草酸标准品，甘草，复方甘草片，乙腈；其它试剂均是分析纯；蒸馏水为实验用水。

1.2配置标准溶液。利用电子精细天平称取50mg甘草酸标准品，通过流动相溶解，将其定容到25mL，获取储藏液0.2mg/mL，由流动相稀释标准并保存获取的液体即为低浓度标准溶液。

1.3处理样品。本次实验样品为复方甘草片与甘草，随机挑选购置。利用粉碎机粉碎甘草，将粗粉过筛。复方甘草片通过研钵将其研细。在两个离心管中分别置入5mg样品粉末，添加5mL0.3%氨水，超声提出，时间为5min，完成提取后制冷并过滤，通过流动相定容滤液至10mL，最终获取试品溶液。

1.4色谱条件。流动相与流速分别是55%乙腈和1.0mL/min；进样体积、检测波长及柱温分别是20L、256nm和30℃；色谱柱为SyncronisC18色谱柱。

2结果与讨论

2.1确定研究方法

2.1.1确定色谱条件：甘草酸是属于酸性化合物，羧基作为分子中的一局部，处于流动相中的羧基具有较高的解离发生率，进而诱发色谱峰脱位，产生甘草酸色谱峰对称性减弱。实验期间，需要合理选择流动相，并对相的挑选进展固定，保证甘草酸检测含量的准确性与高效性。防止解离羧基，实验过程中，可通过不同比例的磷酸添加对流动相进展调节，使其呈酸性【2】。其次，甘草样品中具有诸多杂质，使得色谱别离难度增加，所以，实验时，需要对色谱柱合理选择，探究并研究流速，以便更好地设置别离度，保证性能、分析方法等与分析要求相符。实验针对不同浓度流动相进展了研究，结果提示，55%的乙腈浓度可以有效别离样品中的甘草酸，而且不会长时间保存。

2.1.2创立合理的分析方法：对于浓度狭窄范围及单一目的浓度的样品或者简单样品制备期间，可采取外标法。含量检测期间，内标法具有杂峰重叠或者供试杂质与内标物杂质风险，该阶段，内标定量准确性低于外表。外标法应用期间，技能需要对灰质校正曲线时的条件进展控制，利用对照品峰面积、浓度及待检测无的峰面积便可对样品含量进展计算。

2.1.3制备并处理样品：甘草酸属于白色粉末，在乙醇溶液中很容易溶解，同时也可以溶解于热水中。所以可采用溶剂提取法提取甘草，分析影响提取效率的因素，包括提取溶剂的比例、物料比、提取方法、溶剂种类等，经实验可知，在甘草酸溶解度方面，70%的乙醇溶液效果一般，而且具有较高本钱，在提取效果方面低于氨水，所以提取剂为0.3%氨水，样品进入前，通过针式过滤器将微粒杂质去除【3】。介入声场有助于甘草酸提取过程增加，而相比于其他方法，其比照效率更高。提取时间越长，提取液中甘草酸含量越来越多，在提取时间在50分钟以上，那么提取液中甘草酸含量越来越平稳。

2.2线性关系试验。采用电子精细仪器称取400L标准溶液，根据流动相定量稀释的系列标准溶液，浓度分别是0.001563，0.003125，0.00625，0.0125，0.025和0.05，基于上述色谱条件，进样20，将甘草酸峰面积记录下来，横坐标为甘草酸浓度，纵坐标为峰面积，标准曲线方程如下：Y=247.17X+0.25，r=0.9991，1.5-50g/mL范围内，甘草酸线性关系良好。

2.3精细度实验。将甘草酸标准溶液视为样本，根据以上色谱条件进展连续6次重复进样，对甘草酸峰面积RSD值进展计算，回归方程为Y=247.17X+0.25，精细度为0.08%，r=0.9991；仪器具有良好的精细度。

2.4检测样品含量。采用电子精细天平称取复方甘草片与甘草粉末，基于上述条件对样品溶液进展支配，检测进样20L，定量方法为外标法，甘草与复方甘草片中甘草酸平均含量分别是22.42mg/g和89.63mg/g。

3结论

总之，高效液相色谱法检测甘草酸含量具有操作简单、方便、灵敏度高等特点，通过测量复方甘草片与甘草中的甘草酸含量，可有效控制甘草药材质量。

参考文献

【1】闫涛,姜维,王琴会,等.苦参碱和甘草酸的小肠吸收特性分析[J].中国药师,2022,20(11):1906-1910

【2】裴勇.中药制剂有效成分含量测定中高效液相色谱法的应用分析[J].中国卫消费业,202