细胞培养是动物细胞工程的基础课件-高二下学期生物浙科版选择性必修3

第一节

细胞培养是动物细胞工程的基础在治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤移植到伤处，使皮肤愈合。但大面积烧伤患者缺乏足够的自体皮肤，使用他人皮肤来源又不足，而且会产生免疫排斥反应。那么，怎样才能获得大量的自体健康皮肤？通过细胞培养构建人造皮肤从动物体中获得相关组织，分散成单个细胞，在适宜的培养基下让细胞生长和增殖的技术。动物细胞培养原理：细胞增殖培育的终点：细胞通过植物细胞培养技术，我们可以直接克隆植物，那我们能通过动物细胞培养克隆出动物吗？动物细胞培养需要哪些条件？动物细胞培养的条件营养物质其他条件<<糖类氨基酸无机盐维生素无菌、无毒的环境适宜的温度、湿度、pH适宜的气体环境水生长因子体外培养动物细胞需要提供哪些营养物质？水、无机盐、糖类、氨基酸、无机盐、维生素、生长因子等合成培养基根据细胞生存所需的物质种类和含量严格配置而成的培养基液体培养基动物血清：含有多种未知的促细胞生长因子及其他活性物质，可以补充合成培养基中缺乏的物质天然培养基主要来自动物体液或动物组织分离提取液，成分复杂，来源受限实际培养时，在合成培养基中添加一定比例的动物血清动物细胞培养最好选择固体培养基还是液体培养基？动物细胞培养的条件无菌、无毒的环境无菌①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理②在无菌环境下进行操作定期更换培养液，以便清除代谢物无毒超净工作台在培养基中添加抗生素动物细胞培养的条件适宜的温度、pH多以37℃，温差一般不超过±0.5℃温度：pH：多数细胞生存的适宜pH在7.2-7.4气体环境O2:细胞代谢所必需的CO2：维持培养液的pH（95%空气和5%CO2）CO2培养箱动物细胞培养的过程选择什么样的细胞进行细胞培养？幼龄动物的细胞和分化程度低的细胞更容易培养，原因是这些细胞分裂能力强。用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理组织块，使组织块分散成单个细胞的目的是什么？①使细胞与培养液充分接触，一方面保证细胞所需的O2和营养物质的供应，另一方面保证细胞内代谢废物的及时排出；②使得在细胞水平操作的其它技术得以实现。动物细胞以组织的形式存在，取材后对其进行怎样的处理？机械法、胰蛋白酶处理胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？那将动物组织分散成单个细胞时要注意什么问题呢？能，应注意时间的控制。因为胰蛋白酶不仅能分解细胞间的蛋白质，长时间还会分解膜蛋白，对细胞造成损伤。能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？不能，因为动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。动物细胞培养的过程动物组织块用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理分散成单个细胞制成细胞悬液原代培养原代培养：细胞或组织离开机体后的首次培养体外培养的细胞表现为哪些特点？细胞贴壁：在培养瓶

悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上。培养瓶或培养皿壁要求：表面光滑、无毒、易于贴附。培养皿培养瓶所有的动物细胞都会贴壁生长吗？瓶壁上的细胞层数是：一层（或单层）贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖。接触抑制分瓶培养解除方法癌变细胞没有接触抑制现象，可以在培养瓶中形成多层细胞将原培养瓶内的细胞分离并稀释后转移到多个培养瓶中，在的培养基中进行传代培养。传代培养:在进行传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集；贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集。之后，将收集的细胞制成细胞悬液，分瓶培养。用胰蛋白酶两次处理：第一次处理的目的是使组织细胞分散开；第二次处理的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来，便于分瓶后继续培养。动物细胞培养的过程动物组织块用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理分散成单个细胞制成细胞悬液原代培养问题细胞分裂受阻悬浮生长贴壁生长密度过大、有害代谢物积累和营养物质缺乏等接触抑制解决传代培养分瓶原代培养：细胞或组织离开机体后的首次培养原代培养视频演示传代培养视频演示动物细胞培养与植物组织培养有什么相同和不同之处？培养结果动物血清植物激素常用液体培养基常用固体培养基培养基性质细胞的全能性原理动物细胞培养植物组织培养比较项目新的细胞群，不形成个体完整植株培养基特有成分细胞增殖动物细胞培养时，培养细胞能否无限制存活下去？原代培养物经首次传代成功后即成细胞系。能连续培养下去的称连续细胞系或无限细胞系。不能连续培养下去的细胞称有限细胞系。如何获得纯的细胞系？将单个细胞从群体中分离出来单独培养，使之成为一个新的细胞群体的技术称细胞克隆。通过一定选择或纯化的方法，从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质的细胞，称细胞株。（2021·1月浙江选考）下图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是