虎杖中蒽醌类成分及白课件

虎杖中蒽醌类成分及白藜芦醇苷的提取分离和鉴定学习定性鉴别的方法（理化鉴别和色谱鉴别）学习氧化铝色谱去杂质方法学习活性炭驼色的方法学习水溶性成分的（苷）的分离方法了解蒽醌类成分的一般性质和鉴别反应学习用PH梯度萃取法分离酸性不同的蒽醌类成分学习脂溶性成分（苷元）和水溶性成分（苷元）的分离方法学习中药的提取方法实验目的实验原理本实验是根据大黄中的羟基蒽醌苷经酸水解成游离羟基蒽醌，而游离羟基蒽醌不溶于水，可溶于氯仿、乙醚等亲脂性有机溶剂的性质，用氯仿从水解液中将游离羟基蒽醌提取出来，再利用各游离羟基蒽醌的酸性不同，采用PH梯度萃取法将其分离，其中大黄素和大黄素甲醚的酸性十分相近，用PH梯度萃取法难以分离，可利用两者的极性不同，采用硅胶柱色谱法进行分离。实验药材虎杖Huzhang

【药材学名】RhizomaPolygoniCuspidati。

【别名】花斑竹、酸筒杆、酸桶笋、酸汤梗、川筋龙、斑庄、斑杖根、大叶蛇总管、黄地榆

【基原】本品为蓼科Polygonaceae植物虎杖PolygonumcuspidatumSieb.etZucc.，的干燥根茎和根。

【采制贮藏】春、秋二季采挖，除去须根，洗净，趁鲜切短段或厚片，晒干。置干燥处，防霉，防蛀。

【性状】本品多为圆柱形短段或不规则厚片，长1～7cm，直径0。5～2。5cm。外皮棕褐色，有纵皱纹及须根痕，切面皮部较薄，木部宽广，棕黄色，射线放射状，皮部与木部较易分离。根茎髓中有隔或呈空洞状。质坚硬。气微，味微苦、涩。

【性味与归经】微苦，微寒。归肝、胆、肺经。

【功能与主治】清热解毒，利胆退黄，祛风利湿，散瘀定痛，止咳化痰。用于关节痹痛，湿热黄疸，经闭，癓瘕，咳嗽痰多，水火烫伤，跌扑损伤，痈肿疮毒。［用法用量］煎服，9~15g。外用适量，制成煎液或油膏涂敷。

【使用注意】孕妇慎用。药理作用对心血管系统的作用保肝作用

抗菌、抗病毒作用镇咳平喘作用对前列环素影响抗肿瘤作用

降血糖作用

降血脂作用止血作用其它作用

第一次实验仪器水浴锅、胶头管、冷凝管、圆底烧瓶，铁架台、双顶丝，万能夹，大接小，具塞三角瓶、布氏漏斗、量筒、牛角管、铜冲、三角瓶、真空泵、抽滤瓶、ph试纸、分液漏斗、剪刀、烧杯、抽滤垫、胶头滴管、铁圈、ph标准版、电子秤。药材：虎杖50g实验试剂：乙醇、乙醚、水、碳酸氢钠溶液、碳酸钠溶液、氢氧化钠溶液、6mol浓盐酸第二次试验仪器水浴锅、胶头管、冷凝管、圆底烧瓶，铁架台、双顶丝，万能夹，大接小，具塞三角瓶、布氏漏斗、量筒、牛角管、铜冲、三角瓶、真空泵、抽滤瓶、分液漏斗、剪刀、烧杯、抽滤垫、胶头滴管、铁圈、电子秤、层析柱、玻璃板、小乳钵，玻璃皿、电炉、干燥箱实验试剂：无水硫酸钠、活性炭（2g），AI2O3硅胶2%NAOH液实验方法乙醇总体液制备

取虎杖50g，用95%乙醇回流提议两次（150,1h：100ml，30min），过滤合并乙醇液，如有沉淀，抽滤，滤液回收乙醇至无醇味。总游离蒽醌的分离将提取物加入15ml水稀释至分液漏斗中，用乙醚萃取（25ml×2.20ml×4）合并乙醚为总游离蒽醌，取25ml乙醚至分液漏斗中，来回摇晃，分层，下层为水液，从下口放至小三角瓶中，从上口到出乙醚至大三角瓶中；将水液再倒入分液漏斗中，再加入新的乙醚25ml来回摇晃分层，同法操作6次。得到两个三角瓶，小三角瓶贴上标签，写上名字，放冰箱中，大三角瓶里为乙醚液。大黄素的分离将乙醚液移至分液漏斗中，用5%NaHCO₃水溶液取4次（20ml×2,15ml×2）弃去NaHCO₃液。乙醚液移至分液漏斗中，取20ml5%NaHCO₃水溶液至分液漏斗中，同法操作。小烧瓶中溶液弃去。乙醚液再用5%Na2CO3水层液萃取9次（25ml×3,20ml×3，15ml×4）。下层为水层，从下口放出至500ml烧瓶中，上层为乙醚液，不动：合并碱液，水浴锅上挥去烧瓶碱液中的乙醚，边搅拌边加热，挥至无乙醚味，放凉，滴加6NHCL调PH=2（溶液颜色变黄）稍放置，抽滤（抽滤纸加布氏漏斗），要沉淀，沉淀水洗至中性，干燥，称重，用8～12倍量95%乙醇中结晶，得大黄素结晶。大黄素-6-甲醚的分离用Na2CO3萃取过的乙醚液用2%NaOH萃取5次，每次10ml，下层为水层，下口放出至250ml烧杯中，上层为乙醚液，不动；横并NaOH液，同大黄素的分离方法处理，水浴锅上调PH=2，（溶液颜色变黄）稍放置，抽滤（滤纸加布氏漏斗），要沉淀，沉淀水性至中性，干燥，称重，得打黄色-6-甲醚粗品中性脂溶性成分的分离2%NaOH萃取过的乙醚液，用水洗至中性，取20ml蒸馏水，萃取乙醚，3次以上，至乙醚为中性，合并乙醚液，以无水Na2SO4脱水，回收乙醚得残留物，即得中性脂溶性成分。白藜芦醇苷的分离将总游离蒽醌中的乙醚萃取后的水层，置250ml烧杯中，用水润洗至150ml，放水浴锅中加热至无乙醚味，搅拌混合后，电炉上加热10min，放冷过滤。滤液放冷后置分液漏斗中，家活性炭2g电炉煮沸20min趁热过滤。滤液放冷后移至分液漏斗中，用乙酸乙酯萃取7次（40×3,30×4），合并乙酸乙酯萃取液，安装回收装置，回收溶剂至干，残留物用适量10ml，80%乙醇溶解，经柱层析，（中性AL2O3100～200目，装柱15cm，柱径2cm，干法装柱，10gAL2O3，AL2O3柱层析；检查活塞-塞棉花-装柱-上样，用胶头滴管转圈加入残留物的乙醇脱洗）净化，80%乙醇洗脱（约50ml），洗脱液回收至干，加1min水及5ml乙醇，加热溶解（需要过滤时须趁热过滤）。滤液放置，析晶，检识。制版3g硅胶G＋8mlCMC-Na乳体用力快速研磨，电板使其均匀平整铺布在玻璃板上晾干（1-2小时），烘干（15分钟）大黄素大黄素甲醚检识碱液试剂醋酸镁实验碱液试剂：分别取蒽醌化合物结晶少许，置试管中，加入1ml乙醇溶解，再加3~3滴10%氢氧化钠试剂振摇，观察颜色变化，羟基蒽醌应显红色，（如图）醋酸镁实验：分别取各蒽醌化合物结晶少许，置试管中，加ml乙醇溶解