微生物检验质量控制课件

微生物检验的质量控制

温州医学院检验医学院

温州医学院附属第一医院周铁丽​微生物检验的质量控制

温州医学院检验医学院

温州医学院附属第1微生物检验的质量控制质量控制（Qualitycontrol）

是临床微生物学实验室为了保证检验结果实事求是地反映客观存在而建立的操作程序体系。室内质量控制

室内质量控制是由实验室内部制定并实施的，是质量保证的核心和基础。室间质量控制评价

室间质量控制评价是由实验室外部的组织或机构对实验室进行的质量评价。

​微生物检验的质量控制质量控制（Qualitycontrol2检验前的质量保证

检验前程序：又叫分析前期。

指从临床医生开医嘱开始，到分析检验程序启动时终止的步骤。包括

检验申请标本的采集、运送与接收​检验前的质量保证​3微生物检验中的质量保证人员的组织与管理规范的操作规程试剂培养基设备检验过程​微生物检验中的质量保证人员的组织与管理​4试剂、培养基的质量控制

有效期外观性能测试保存​试剂、培养基的质量控制

有效期​5各种试剂的监控菌种试剂“x+v”因子试剂条流感嗜血杆菌副流感嗜血杆菌嗜沫嗜血杆菌

硝酸盐还原试剂大肠埃希菌醋酸钙不动杆菌每批，以后每次靛基质试剂大肠埃希菌产气肠杆菌每批，以后每天甲基红试剂大肠埃希菌产气肠杆菌每批，以后每周V-P试剂产气肠杆菌大肠埃希菌每批，以后每周​各种试剂的监控菌种试剂“x+v”因子试剂条流感嗜血杆菌

6常用试验、染液的推荐菌株

试验名称阳性对照菌阴性对照菌血浆凝固酶试验金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌触酶试验金黄色葡萄球菌肺炎链球菌氧化酶试验铜绿假单胞菌大肠埃希菌杆菌肽试验A群链球菌B群链球菌奥普托欣试验肺炎链球菌草绿色链球菌革兰染液金黄色葡萄球菌大肠埃希菌抗酸染液结核分枝杆菌混合非抗酸菌​常用试验、染液的推荐菌株试验名称阳性对照菌阴性对照菌血浆凝7测定各种培养基性能的菌种

培养基质控菌株判定标准羊血琼脂平板

金黄色葡萄球菌ATCC25923生长

生长试验

大肠埃希菌ATCC25922生长溶血反应

肺炎链球菌ATCC19615生长，α溶血化脓性链球菌ATCC6305生长，β溶血

杆菌肽敏感（纸片法）化脓性链球菌ATCC6305>10mm，敏感B群链球菌<10mm，耐药Optochin敏感（纸片法）

肺炎链球菌15∽18mm，敏感涎链球菌<15mm，耐药​测定各种培养基性能的菌种培养基8测定各种培养基性能的菌种巧克平板生长试验淋病奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌流感嗜血杆菌肺炎链球菌生长SS平板鼠伤寒沙门菌伤寒沙门菌福志贺菌大肠埃希菌

肠球菌生长，黑色菌落中心生长，无色透明菌落生长，无色透明菌落部分抑制生长，红色混浊菌落部分抑制生长​测定各种培养基性能的菌种巧克平板淋病奈瑟菌生长S9测定各种培养基性能的菌种麦康凯平板大肠埃希菌生长，红色混浊菌落伤寒沙门菌生长，无色透明菌落中国蓝琼脂大肠埃希菌生长，蓝色菌落伤寒沙门菌生长，无色菌落营养琼脂金黄色葡萄球菌大量生长福志贺菌大量生长厌氧血平板脆弱拟杆菌生长产气荚膜梭菌生长，β溶血碱性蛋白胨水霍乱弧菌大量生长大肠埃希菌抑制生长​测定各种培养基性能的菌种麦康凯平板大肠埃希菌生长，红10测定各种培养基性能的菌种弯曲菌琼脂空肠弯曲菌生长大肠埃希菌

部分抑制TCBS平板霍乱弧菌生长，黄色菌落副溶血性弧菌

生长，蓝绿色菌落沙保弱琼脂白色念珠菌生长大肠埃希菌

部分或完全抑制需氧血液增菌液肺炎链球菌生长化脓性链球菌铜绿假单胞菌白色念珠菌厌氧血液增菌液脆弱拟杆菌

生长​测定各种培养基性能的菌种弯曲菌琼脂空肠弯曲菌11各种鉴别培养基的测试菌种培养基阳性对照菌阴性对照菌赖氨酸脱羧酶迟缓爱德华菌

费枸橼酸杆菌鸟氨酸脱羧酶产气肠杆菌

费枸橼酸杆菌精氨酸双水解酶阴沟肠杆菌

普通变形杆菌蛋白胨水（靛基质）大肠埃希菌

阴沟肠杆菌​各种鉴别培养基的测试菌种培养基阳性对照菌12各种鉴别培养基的测试菌种

培养基阳性对照菌阴性对照菌

MR

大肠埃希菌

阴沟肠杆菌

V-P

阴沟肠杆菌

大肠埃希菌枸橼酸盐（西蒙氏）产气肠杆菌

迟缓爱德华菌苯丙氨酸脱氨酶

雷极变形杆菌

费枸橼酸杆菌O-F试验管

铜绿假单胞菌（氧化型）洛菲不动杆菌（不利用）

大肠埃希菌（发酵型）硝酸盐还原

大肠埃希菌

洛菲不动杆菌​各种鉴别培养基的测试菌种培养基阳性对13各种鉴别培养基的测试菌种培养基阳性对照菌阴性对照菌胆汁-七叶苷粪肠球菌

化脓性链球菌脱氧核糖核酸琼脂粘质沙雷菌

表皮葡萄球菌氰化钾肉汤产气肠杆菌

迟缓爱德华菌丙二酸盐产气肠杆菌

迟缓爱德华菌尿素琼脂雷极变形杆菌（快）大肠埃希菌

肺炎克雷白菌（慢）半固体琼脂动力试验大肠埃希菌

肺炎克雷白菌​各种鉴别培养基的测试菌种培养基阳性对照菌14仪器设备的质量控制设备控制范围备注高压灭菌器121℃

定期用嗜热芽胞杆菌测试（每月）孵育箱35±1℃

定期加水水浴箱37±0.5℃

定期加水、清洁内壁冰箱4±2℃

定期清洁内部CO2箱5-10%

淋病奈瑟氏菌检测效果厌氧箱美兰或铜绿假单胞菌测试厌氧条件生物安全柜更换滤网，紫外线消毒性能检测（每三个月）血液培养仪培养瓶进行少量生长试验；瓶位定期校正微生物鉴定仪探测部位定期清洁；鉴定卡、条、板测试

​仪器设备的质量控制设备控制范围15标本检验过程的质量控制选择合理的检验项目选择适当的标本正确书写检验申清单​标本检验过程的质量控制选择合理的检验项目​16直接诊断

直接发现病原体

---脓、脑脊液、胸腹水等无菌部位标本确定标本是否合格，并推测病原体

---痰液标本发现病原体并进行初步计数

---尿液标本为培养基和培养方法的选择提供信息​直接诊断直接发现病原体​17病原菌的分离培养

呼吸道标本

接种血琼脂平板、巧克力平板、麦康复凯平板和沙保弱琼脂，并将巧克力血平板置5%-10%CO235℃环境中培养。粪便标本

接种SS平板、麦康凯平板或中国蓝平板血液培养

在血液增菌培养期间，应至少在24h∽48h盲目翻种一次，以后有可疑细菌生长即刻翻种，尽早发现病原菌。​病原菌的分离培养​18病原菌的鉴定

菌落形态观察--涂片染色镜检--生化鉴定--血清学试验

---氧化酶试验不应在糖类发酵选择性平板上进行，以免假阴性结果出现。---在肠道选择性平板上应挑取菌落进行生化反应，生化反应符合，血清学凝集阳性者可确认报告。

不能从选择性平板上挑取菌落进行血清学凝集，会因为交叉抗原的存在或抗原的丢失而导致假阳性或假阴性。每次血清凝集试验时，应用生理盐水作对照。防止粗糙型菌落造成的假凝集​病原菌的鉴定菌落形态观察--涂片染色镜检--生化鉴定-19药敏试验的质量控制要点培养基纸片菌量操作孵育：时间、温度、平板放置结果判断质控菌株​药敏试验的质量控制要点培养基​20纸片扩散法的质控菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923大肠埃希菌ATCC25922大肠埃希菌ATCC35218（用于β内酰胺酶抑制剂复合制剂）铜绿假单胞菌ATCC27853粪肠球菌ATCC29212流感嗜血杆菌（用于HTM培养基）ATCC49247、49766淋病奈瑟菌（用于GC琼脂）ATCC49226肺炎链球菌（用于5%羊血MH琼脂）ATCC49619​纸片扩散法的质控菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923​21失控的常见的原因---质控结果记录错误---量取抑菌环直径时读数错误---标准菌株被污染或其它改变---接种的菌悬液太浓或过淡---0.5管麦氏浊度标准管未摇匀或已过期失效---孵育温度或气体环境不正确---MH培养基质量有无问题---含药纸片失效​失控的常见的原因---质控结果记录错误​22检验后的质量保证检验后程序：也称分析后期。

指检验后全部过程。包括检验结果的评审与报告

---报告时间、分级报告、危急值报告及记录

标本的处置

---感染性废弃物

​检验后的质量保证检验后程序：也称分析后期。​23菌种保存方法培养基保存法快速冷冻法冷冻干燥法

​菌种保存方法培养基保存法​24菌种保管定期转种制备记录卡专人负责​菌种保管定期转种​25室内全面质量控制全面实施各项质量控制内容对人员要及时进行培训和考核严格审核标本和结果报告在日常标本中掺入模拟标本，进行盲点试验发现误差，应及时找出原因，进行改进

​室内全面质量控制全面实施各项质量控制内容​26室间质量控制的实施组织单位：各级临床检验中心和参考实验室工作任务：定期或不定期地进行熟练程度考核和盲点试验检查。定期或不定期地举办各种学习班，提高各级技术人员的技术水平，学习新的知识。提供或督促有关部门提供合格的标准化的试剂、抗血清、培养基等实验必需品。

​室间质量控制的实施组织单位：各级临床检验中心和参考实验室​27盲点质量控制

---qualitycontrolblindunknown方法

质控管理机构将模拟标本混入临床普通标本，送入实验室进行常规测定。

评价

质控管理机构负责收回和评价实验结果，根据参加的规模和鉴定的正确数，计算鉴定正确率及所有参加实验室的平均分，以及每个实验室的得分。

​盲点质量控制方法​28谢谢​谢谢​29安全生产日日好，员工生活步步高。11月-2211月-22Thursday,November3,2022文明施工，安全生产。20:55:4720:55:4720:5511/3/20228:55:47PM质量不光由生产者决定，更应由顾客决定。11月-2220:55:4720:55Nov-2203-Nov-22抓好安全生产促进经济发展。20:55:4720:55:4720:55Thursday,November3,2022善待别人就是善待自已。11月-2211月-2220:55:4720:55:47November3,2022疏忽一时，痛苦一世。2022年11月3日8:55下午11月-2211月-22安全生产你管我管，大家管才平安，事故隐患你查我查，人人查方安全。03十一月20228:55:47下午20:55:4711月-22持续的质量改进是企业永恒的目标。十一月228:55下午11月-2220:55November3,2022精打细算降成本,千方百计提效益。2022/11/320:55:4720:55:4703November2022全力生产，注意安全。8:55:47下午8:55下午20:55:4711月-22树立安全观念，坚持安全生产。11月-2211月-2220:5520:55:4720:55:47Nov-22制造精良产品，培育优秀人才。2022/11/320:55:47Thursday,November3,2022强化服务意识，倡导奉献精神。11月-222022/11/320:55:4711月-22谢谢大家！安全生产日日好，员工生活步步高。11月-2211月-22We30微生物检验的质量控制

温州医学院检验医学院

温州医学院附属第一医院周铁丽​微生物检验的质量控制

温州医学院检验医学院

温州医学院附属第31微生物检验的质量控制质量控制（Qualitycontrol）

是临床微生物学实验室为了保证检验结果实事求是地反映客观存在而建立的操作程序体系。室内质量控制

室内质量控制是由实验室内部制定并实施的，是质量保证的核心和基础。室间质量控制评价

室间质量控制评价是由实验室外部的组织或机构对实验室进行的质量评价。

​微生物检验的质量控制质量控制（Qualitycontrol32检验前的质量保证

检验前程序：又叫分析前期。

指从临床医生开医嘱开始，到分析检验程序启动时终止的步骤。包括

检验申请标本的采集、运送与接收​检验前的质量保证​33微生物检验中的质量保证人员的组织与管理规范的操作规程试剂培养基设备检验过程​微生物检验中的质量保证人员的组织与管理​34试剂、培养基的质量控制

有效期外观性能测试保存​试剂、培养基的质量控制

有效期​35各种试剂的监控菌种试剂“x+v”因子试剂条流感嗜血杆菌副流感嗜血杆菌嗜沫嗜血杆菌

硝酸盐还原试剂大肠埃希菌醋酸钙不动杆菌每批，以后每次靛基质试剂大肠埃希菌产气肠杆菌每批，以后每天甲基红试剂大肠埃希菌产气肠杆菌每批，以后每周V-P试剂产气肠杆菌大肠埃希菌每批，以后每周​各种试剂的监控菌种试剂“x+v”因子试剂条流感嗜血杆菌

36常用试验、染液的推荐菌株

试验名称阳性对照菌阴性对照菌血浆凝固酶试验金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌触酶试验金黄色葡萄球菌肺炎链球菌氧化酶试验铜绿假单胞菌大肠埃希菌杆菌肽试验A群链球菌B群链球菌奥普托欣试验肺炎链球菌草绿色链球菌革兰染液金黄色葡萄球菌大肠埃希菌抗酸染液结核分枝杆菌混合非抗酸菌​常用试验、染液的推荐菌株试验名称阳性对照菌阴性对照菌血浆凝37测定各种培养基性能的菌种

培养基质控菌株判定标准羊血琼脂平板

金黄色葡萄球菌ATCC25923生长

生长试验

大肠埃希菌ATCC25922生长溶血反应

肺炎链球菌ATCC19615生长，α溶血化脓性链球菌ATCC6305生长，β溶血

杆菌肽敏感（纸片法）化脓性链球菌ATCC6305>10mm，敏感B群链球菌<10mm，耐药Optochin敏感（纸片法）

肺炎链球菌15∽18mm，敏感涎链球菌<15mm，耐药​测定各种培养基性能的菌种培养基38测定各种培养基性能的菌种巧克平板生长试验淋病奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌流感嗜血杆菌肺炎链球菌生长SS平板鼠伤寒沙门菌伤寒沙门菌福志贺菌大肠埃希菌

肠球菌生长，黑色菌落中心生长，无色透明菌落生长，无色透明菌落部分抑制生长，红色混浊菌落部分抑制生长​测定各种培养基性能的菌种巧克平板淋病奈瑟菌生长S39测定各种培养基性能的菌种麦康凯平板大肠埃希菌生长，红色混浊菌落伤寒沙门菌生长，无色透明菌落中国蓝琼脂大肠埃希菌生长，蓝色菌落伤寒沙门菌生长，无色菌落营养琼脂金黄色葡萄球菌大量生长福志贺菌大量生长厌氧血平板脆弱拟杆菌生长产气荚膜梭菌生长，β溶血碱性蛋白胨水霍乱弧菌大量生长大肠埃希菌抑制生长​测定各种培养基性能的菌种麦康凯平板大肠埃希菌生长，红40测定各种培养基性能的菌种弯曲菌琼脂空肠弯曲菌生长大肠埃希菌

部分抑制TCBS平板霍乱弧菌生长，黄色菌落副溶血性弧菌

生长，蓝绿色菌落沙保弱琼脂白色念珠菌生长大肠埃希菌

部分或完全抑制需氧血液增菌液肺炎链球菌生长化脓性链球菌铜绿假单胞菌白色念珠菌厌氧血液增菌液脆弱拟杆菌

生长​测定各种培养基性能的菌种弯曲菌琼脂空肠弯曲菌41各种鉴别培养基的测试菌种培养基阳性对照菌阴性对照菌赖氨酸脱羧酶迟缓爱德华菌

费枸橼酸杆菌鸟氨酸脱羧酶产气肠杆菌

费枸橼酸杆菌精氨酸双水解酶阴沟肠杆菌

普通变形杆菌蛋白胨水（靛基质）大肠埃希菌

阴沟肠杆菌​各种鉴别培养基的测试菌种培养基阳性对照菌42各种鉴别培养基的测试菌种

培养基阳性对照菌阴性对照菌

MR

大肠埃希菌

阴沟肠杆菌

V-P

阴沟肠杆菌

大肠埃希菌枸橼酸盐（西蒙氏）产气肠杆菌

迟缓爱德华菌苯丙氨酸脱氨酶

雷极变形杆菌

费枸橼酸杆菌O-F试验管

铜绿假单胞菌（氧化型）洛菲不动杆菌（不利用）

大肠埃希菌（发酵型）硝酸盐还原

大肠埃希菌

洛菲不动杆菌​各种鉴别培养基的测试菌种培养基阳性对43各种鉴别培养基的测试菌种培养基阳性对照菌阴性对照菌胆汁-七叶苷粪肠球菌

化脓性链球菌脱氧核糖核酸琼脂粘质沙雷菌

表皮葡萄球菌氰化钾肉汤产气肠杆菌

迟缓爱德华菌丙二酸盐产气肠杆菌

迟缓爱德华菌尿素琼脂雷极变形杆菌（快）大肠埃希菌

肺炎克雷白菌（慢）半固体琼脂动力试验大肠埃希菌

肺炎克雷白菌​各种鉴别培养基的测试菌种培养基阳性对照菌44仪器设备的质量控制设备控制范围备注高压灭菌器121℃

定期用嗜热芽胞杆菌测试（每月）孵育箱35±1℃

定期加水水浴箱37±0.5℃

定期加水、清洁内壁冰箱4±2℃

定期清洁内部CO2箱5-10%

淋病奈瑟氏菌检测效果厌氧箱美兰或铜绿假单胞菌测试厌氧条件生物安全柜更换滤网，紫外线消毒性能检测（每三个月）血液培养仪培养瓶进行少量生长试验；瓶位定期校正微生物鉴定仪探测部位定期清洁；鉴定卡、条、板测试

​仪器设备的质量控制设备控制范围45标本检验过程的质量控制选择合理的检验项目选择适当的标本正确书写检验申清单​标本检验过程的质量控制选择合理的检验项目​46直接诊断

直接发现病原体

---脓、脑脊液、胸腹水等无菌部位标本确定标本是否合格，并推测病原体

---痰液标本发现病原体并进行初步计数

---尿液标本为培养基和培养方法的选择提供信息​直接诊断直接发现病原体​47病原菌的分离培养

呼吸道标本

接种血琼脂平板、巧克力平板、麦康复凯平板和沙保弱琼脂，并将巧克力血平板置5%-10%CO235℃环境中培养。粪便标本

接种SS平板、麦康凯平板或中国蓝平板血液培养

在血液增菌培养期间，应至少在24h∽48h盲目翻种一次，以后有可疑细菌生长即刻翻种，尽早发现病原菌。​病原菌的分离培养​48病原菌的鉴定

菌落形态观察--涂片染色镜检--生化鉴定--血清学试验

---氧化酶试验不应在糖类发酵选择性平板上进行，以免假阴性结果出现。---在肠道选择性平板上应挑取菌落进行生化反应，生化反应符合，血清学凝集阳性者可确认报告。

不能从选择性平板上挑取菌落进行血清学凝集，会因为交叉抗原的存在或抗原的丢失而导致假阳性或假阴性。每次血清凝集试验时，应用生理盐水作对照。防止粗糙型菌落造成的假凝集​病原菌的鉴定菌落形态观察--涂片染色镜检--生化鉴定-49药敏试验的质量控制要点培养基纸片菌量操作孵育：时间、温度、平板放置结果判断质控菌株​药敏试验的质量控制要点培养基​50纸片扩散法的质控菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923大肠埃希菌ATCC25922大肠埃希菌ATCC35218（用于β内酰胺酶抑制剂复合制剂）铜绿假单胞菌ATCC27853粪肠球菌ATCC29212流感嗜血杆菌（用于HTM培养基）ATCC49247、49766淋病奈瑟菌（用于GC琼脂）ATCC49226肺炎链球菌（用于5%羊血MH琼脂）ATCC49619​纸片扩散法的质控菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923​51失控的常见的原因---质控结果记录错误---量取抑菌环直径时读数错误---标准菌株被污染或其它改变---接种的菌悬液太浓或过淡---0.5管麦氏浊度标准管未摇匀或已过期失效---孵育温度或气体环境不正确---MH培养基质量有无问题---含药纸片失效​失控的常见的原因---质控结果记录错误​52检验后的质量保证检验后程序：也称分析后期。

指检验后全部过程。包括检验结果的评审与报告

---报告时间、分级报告、危急值报告及记录

标本的处置

---感染性废弃物

​检验后的质量保证检验后程序：也称分析后期。​53菌种保存方法培养基保存法快速冷冻法冷冻干燥法

​菌种保存方法培养基保存法​54菌种保管定期转种制备记录卡专人负责​菌种保管定期转种​55室内全面质量控制全面实施各项质量控制内容对人员要及时进行培训和考核严格审核标本和结果报告在日常标本中掺入模拟标本，进