兽医病理生理学实验指导

家畜病理生理学实验指导兽医专业用中国农业大学编PAGEPAGE30/30目 录绪论… 3实验一发热……………………10实验二肺水肿………………12实验三乏氧性缺氧和中毒性缺氧……………13实验四应激对耗氧量的影响…………………15实验五实验性休克……………17实验六急性心机能不全………20实验七弥散性血管内凝血（DIC）……………22绪 论一、概 述验方法。（一）病理生理教学实验目的和任务1）（2）（3）培养学生严谨的科学态度。（二）病理生理学实验课的要求实验前认真预习实验指导，了解实验的目的、方法和操作步骤。复习实验都分有关理论。检查实验器材和药品是否齐全。小组成员应有明确分工，但同时应重视合作，使每人都能得到应有的技能训练。实验时应确立严谨、诚实的科学态度，正规和准确的技术操作，耐心、细致地观得敷衍、马虎和主观臆测。义。要注意尽量减少对实验动物的不必要损伤。使用药品应注意节约。实验后认真整理和分析实验结果。个实验组，应保持自己桌面的清洁，课后打扫、整理好实验室。按时完成实验报告。（三）实验报告内容的书写和项目的要求姓名、班次、组别、日期。实验项目。实验目的。实验动物包括种类、数量、性别、体重。实验方法简要写出主要实验方法。若实验操作改动较大时，应详细叙述。实验结果根据实验目的将原始记录系统化、条理化，表达方式一般有三种。叙述式用文字将观察到的、与实验目的有关的现象客观地加以描述，表格式能够较为清楚地反映观察内容，有利于相互对比。每一图表应原始的描记图，取其明显变化的有关各段连接而成。（1）以实验结果为依据，论证实验目的（2）些新问题，如果出现“异常现象”，应加以分析。二、疾病实验性研究中实验设计的若干问题（（都能在详细讨论。损失或导致实验失败。“原始假说”“始假说”作非正式的验证。同时也是对初步确定采用的实验方法和操作步骤进行演习。根据预备试验结果（包括经验教训，对原始假说、实验方法和技术操作必要的修正，为正式实验设计铺平道路。周密和严谨。现择几个基本问题分述如下。（－）实验对象的选择（1选择经济价值较低的动物2）根据实验要求选择动物品种和纯度，最好用纯系动物（3）动物必须是健康的、营养状况良好的（4最好选用年龄一致或接近的并体重一致或相近的动物，一般选择发育成熟的年轻动物（5）（二）对照和分组（1）同体对照，即同一动物实验前后实验结果及数据的对照；（3）不完全对照，即以文献资料或历史的、他物实验一般不采用。只有这样，才能消除实验误差。两组的例数应相等或相近似（在计数指标，每组305例，10-20例较好，切忌随意减少对照组的例数。分组时为避免主观性因素，可采用随机抽样的方法。（三）观察的指标（反映（如药物的效应特异性指标应特异地反映所观察的事物（现象）客观性最好选择可用具体数值或图形表达的指标（血压和呼吸描记、化验检查等。因为主观指标（如肝脾触诊、目力比色等）易受主观性因素的影响而造成较大的误差。重现性一般来说，客观性指标在相同条件下可以重现。重现高的指标一如受这些因素影响而重现性小者，此指标不宜采用。“假阴性结果”；仪器不精密，指标选定必须有依据现成（定型）指标必须一经过专门的实验鉴定。（四）结果观察和记录观察和记录在科学实验活动中占有十分重要的地位。为了正确地观察和记记录时要严谨、细致，实事求是，力戒主观片面性。、表格、图形、照片、影片和录像带等。可用整理后的记录来代替原始记录。原始记录不管是什么记录方式，都一定要写明：实验题目、实验对象、实验方法、实验条件、实验者、实验日期，记录好观察测量的结果和数据。规定填好的项目一定要及时完整、正确的填写。图形、图片一定要整理保存。（五）实验结果的数据处理、分析和判断法来处理数据和对数据进行分析判断。首先必须把原始数据或资料系统化，计算出各组数据的均值或百分数。如是计数指标，一般用百分数表示，若为测量指标，则计算出均值，最好标明均数和标准差，进而标明均数的标准误。其次进行统计学的显著性测验。如需作显著性测验时，请参看统计学原理。分析和判断实验结果时，不能按照研究者的偏见去抽样比较，或者在计算百分数或均数时任意舍取。研究者必须实事求是，不能强求实验结果服从自己的假说，而应根据实验结果去修正假说，使假说上升为结论或理论。三、常用实验动物的正常生理生化数值和常用非挥发性麻醉剂的用法及剂量12。动物兔大鼠小鼠动物兔大鼠小鼠狗山羊寿命（年）4-92-32-310-2017性成熟期（日）120-24060-7535-60180-300180-300成年体重15kg以上 雌150雄20g以上8-20kg30-50kg250g以上体温（直肠℃）心率（次/分）呼吸（次/分）血压（mmHg*）血色素（g％）（百万38.5-40120-15037.5-39200-36036.5-39520-78037-3980-13038．5-39.770-8038-8066-15084-23020-3010-2090-13070-18493-138108-18950-1307.1-15.512.0-17.810-1910.5-207-144.0-6.47.2-9.67.7-12.55.5-8.515.0-19.0白细胞（千/mm3） 5.2-12 5.0-25.0 4.0-12.0 6-17 9.612-2510-13815.7-1522.0-303.4-6.07.21-7.577.26-7.447.31-7.427.25-7.355.465.76-6.9412-2510-13815.7-1522.0-303.4-6.07.21-7.577.26-7.447.31-7.427.25-7.355.465.76-6.947.788-96-728-5120-4436-11720-4430-44总血量（占体重％）血非蛋白氮（mg％）2.7-5.13.8-5.43.7-5.02.45-4.11155-165126-155129-149141-1575.6-8.03.1-5.32.7-5.13.8-5.43.7-5.02.45-4.11155-165126-155129-149141-1575.6-8.03.1-5.33.8-6.44.5-692-11294-110104-117100-125血清胆红素（mg％）

＜0.1 0.1-0.3 0.1-0.3 ＜0.101.010-1.0501.020-1.0501.010-1.0501.020-1.0501.025-1.0700.401.220.590.260.350.760.500.850.4-0.55脑︵ 重脑占 要体 脏重 器％ 重 心︶ 量0.700.320.880.303.191.655.182.941.8-20.940.150.380.0220.0160.020.080.020.050.010.08肺0.53肺0.531.340.940.91肾肝脾甲状腺肾上腺表2常用非挥发性麻醉剂的用法及用量药名药名动物注入途径剂量（g/kg）安密妥钠狗、兔、猫腹腔内注射0.08-0.10.08-0.1肌肉内注射0.1（10%溶液）直肠内灌注静脉内注射0.04-0.05（10%溶液)鼠腹腔内注射0.1（10%溶液）巴比妥钠狗静脉内注射0.225猫、兔腹腔内注射猫、兔腹腔内注射鸽腹部肌肉注射鼠皮下注射水合氯醛狗、猫静脉内注射腹腔内注射兔直肠内灌注静脉内注射戊基巴比妥钠狗、猫、皮下注射兔、鼠腹腔内注射狗静脉注射鸟类肌肉内注射硫苯妥钠狗、猫、兔静脉内注射0.1820.20.1-0.150.25-0.31.0（5%溶液）0.05-0.0750.040-0.050.040-0.050.030.05-0.10.025-0.05（2.5-5%溶液）苯巴比妥钠 狗、猫 静脉内注腹腔内注

0.08-0.10.08-0.1兔兔腹腔内注射0.15-0.2鸽肌肉内注射0.03氨基甲酸乙酯兔、猫静脉内注射0.75-1.00.75-1.0腹腔内注射鸽肌肉内注射1.25蛙皮下（淋巴囊）注2.0（25%溶液）射（一）实验目的

实验一 发热呼吸频率等的变化，搞清发热和体温升高的概念及其区别。（二）实验原理动物体在多种因素的作用下（如细菌、病毒的感染，肿瘤等，能产生并释比较它们的异同。（三）实验动物 成年家兔（四）实验器材与药品 内生性致热源生理盐水溶液凡士林半导体温度计体温表，婴儿称，小棉垫，20ml注射器，坐标纸等。（五）实验方法1、取体重相似的家兔2只，分别称重。2、分别用体温表测直肠温度，用半导体温度计测两耳皮温，每15分钟测一次，共3次。3、将一只家兔从耳缘静脉注入内生性致热原生理盐水溶液，剂量为10ml/kg。注射后，每隔152小时。440℃的恒温兔台上，盖上棉垫（将头露出152小时。5、揭去棉垫，停止加热，并将兔放开，再每隔15分钟测直肠及耳皮温一次，观察耳血管、呼吸等变化，持续3分钟。（六）实验注意事项15cm为宜。2、测耳、皮温的位置应固定。3、注射内生性致热原的兔切忌捆绑。（七）讨论以时间为横坐标，温度为纵坐标，画出两兔耳皮温和直肠温度的变化曲线，比较两者有何区别？为什么？附录：内生性致热源生理盐水溶液的制备方法1、取体重2kg以上的家兔1只，仰卧固定于兔台上，于下腹部剃毛消毒。在下腹正中避开膀胱处。向腹腔滴注（每分钟约2ml）无污染生理盐水，每公斤体重100ml。为了防止感染，每毫升生理盐水中加入青霉素60单位，链霉素0.8mg.2、滴注完毕，兔继续固定2小时，然后将腹腔液吸入经热原处理的瓶内，储存于冰箱中（4℃）备用。（一）实验目的

实验二 肺水肿通过实验了解水肿的发生机理以及组织内压与水肿之间的关系。（二）试验原理正常的组织内压是负的（约-6.5mmHg左右，这种负压是不致有过多的液（三）实验动物体重相仿的家兔3只。（四）实验器材与药品肾上腺素、油酸、生理盐水、天平、5ml注射器、剪刀、镊子、细丝线、滤纸等。（五）实验方法3只兔子称重，并观察其呼吸、心率等状态。将其中的一只兔子，耳缘静脉注射肾上腺素。另一只按0.5ml/kg脉注射油酸，注射后立即注意观察呼吸、心率等状态。兔子死后，打开胸腔，用线在气管分叉处结扎，在结扎处上方切断气管，小心的把心脏及其血管除去，将肺完整的取出，用滤纸吸取肺表面的水分后，称取肺重，计算肺系数（＝（k）/体重量（kg）100％然后肉眼观察肺的大体变化。切开肺脏，观察切面的变化，注意有无泡沫状液体的流出。时后处死动物。然后按上法取出肺，并称重和计算肺系数。（六）实验注意事项取出肺时，注意勿损伤肺表面和挤压肺组织，以防治水肿液流出，影响肺系数值。（七）讨论实验组和对照组家兔的肺有何不同？为什么？肾上腺素和油酸所导致的肺水肿的机制有何不同？实验三 乏氧性缺氧和中毒性缺氧（一）实验目的发展过程。观察不同类型缺氧时，动物呼吸、皮肤及血液色泽等变化特点。（二）实验原理表现出的缺氧症状也不一致。（三）实验动物小鼠。（四）实验器材与药品m1带塞的锥NaOH，带塞500ml烧杯，CO发生装置（1，5ml吸管，1ml剪刀，镊子。（五）实验方法乏氧性缺氧取少许碱石灰及小鼠一只，放入缺氧瓶内，观察小鼠的一般情况，呼吸频化，直至死亡，如有其他变化，亦随时记录。小鼠尸体待实验做完后，剪开腹腔。比较血液、肝脏或肌肉的色泽。一氧化碳中毒性缺氧1CO发生装置。1CO发生装置连接。CO后，注意观察上述指标，直至小鼠死亡。小鼠死后，进行剖检。亚硝酸钠中毒性缺氧2只小鼠（20g以上500m130.2ml10.3ml0.3ml。水的小鼠最后剖检。（六）实验注意事项1．缺氧瓶要严密不漏气，如室温过低，最好将缺氧瓶置于22℃水浴内，因为漏气或温度瓶置于22℃水浴内，因为漏气或温度过低都会使小鼠死亡时间延长，影响实验时间。3．小鼠腹腔注射时，应稍靠左下腹，勿损伤肝脏，但也要避免将药液注入肠腔或膀胱。11CO发生装置不同类型缺氧致死动物所观察各项指标变化有何不同？为什么？实验四 应激对耗氧量的影响（－）实验目的生物学意义。（二）实验原理作为应激原，观察小鼠应激前后耗氧量的变化，说明应激时机体的代谢状态。（三）实验动物小鼠。（四）实验器材与药品10cm花若干，碱石灰，凡士林等。（五）实验方法取一只小鼠，放入耗氧量测定装置中，测其耗氧时间（10cm间3次，并记录。将小鼠称重后放入冷水中（最好是冰水5-10分钟。取出小鼠，擦干被毛上的水，用同样的方法测其耗氧时间，连续3录。将应激后的小鼠和另一只未进行应激的小鼠一起放入盛有少量碱石灰的广口33小鼠耗氧置测定装置结果记录项目项目10cm水柱的时间备注123平均值应激前应激后（六）实验注意事项测定耗氧时间，先要用凡士林封住瓶口，防止漏气。实验中，捉拿小鼠要轻拿轻放，切忌粗暴。（七）讨论试比较小鼠应激前后的耗氧时间，分析其原因？试比较两只小鼠的死亡时间，解释其机理？ 、实验五 实验性休克（－）实验目的学习休克的动物模型复制，并根据休克时动脉压、中心静脉压、心率、呼吸、尿量、皮温等变化来了解休克的发生机理和防治原则。（二）实验原理（三）实验动物2kg以上家兔。（四）实验器材与药品肝素，生理盐水，20％乌拉坦，去甲肾上腺素，右旋糖酐，3.8％构橼酸钠等。（五）实验方法失血性休克家兔称重后仰卧固定于兔手术台上，由耳静脉缓漫注射 20％鸟拉坦（ml/k，待麻醉后，于颈部、腹股沟和下腹部剪毛，消毒。1％肝素（1ml/k。切开颈部分离出颈总动脉和气管，并接通描记血压和呼吸装置。分离右颈外静脉一段（5cm（充满生理盐水，插入切口至右心房入口处，用线结扎固定好。温等。4cm，分离腹部肌肉至腹膜，小心剪开腹插管，连到记滴装置，记录尿滴（10分钟尿量。“1000mlkg体重6％”来估计家兔的总血量，然后切开腹股沟部暴露小口，将充有3.8％构橡酸钠液的细塑料管向心插入并固定。打开股动脉夹，按总量的10％快速将血放到注射器内，放血毕，观察动脉血压、呼吸、中心静脉压、尿量以及心率、皮温等变化。间隔10分钟重复观察一次。如动脉血压仍高30mmHg1030mmHg水平。1030ml。观察并记录输液过程中，血压、呼吸、尿量、心率和皮温等变化。（8）结果记录观察指 心率 呼吸 血观察指 心率 呼吸 血压 中心静 尿量 皮温 其他标（次/ （次/ （mmHg） 脉压 （滴/ （℃）时间分）分）（cm 分）水柱）放血前第一次放血后第二次放血后注射肾上腺素后输血后肠系膜上动脉闭塞性休克家兔称重后固定于兔手术台上，在颈部和腹部剪毛。用1％普鲁卡因作局部麻醉，切开颈部皮肤，分离一侧颈总动脉，穿线备用。1.5cm5cm1％肝素（lml/kg置相连，记录正常血压曲线。脉，同时观察血压变化。1小时后，松开止血钳，观察血压变化，待休克出现后再观察1血压等变化。然后检查腹腔有无渗出液，并观察肠襻的形态学变化。（六）实验注意事项手术过程中应尽量避免出血。盛血的注射器，应预先放一些抗凝剂。（七）讨论放血后观察的各种指标变化有何不同？为什么？根据实验结果你认为应该怎样判断和处理休克病畜。试讨论肠系膜上动脉闭塞性休克的发病机理。实验六急性心机能不全（一）实验目的复制急性心机能不全动物模型。了解心机能不全的发病机理，观察心机能不全时血液动力学的主要变化。（二）实验原理右心室的前负荷或后负荷过度增加，都会发生右心衰竭。本实验用注射过机能不全的发生及发展。（三）实验动物健康家兔。（四）实验器材与药品兔台，小动物手术器械，二道生理记录仪，血气酸碱分析仪，中心静脉压盐水，液体石蜡。（五）实验方法将家兔称重后，仰卧固定于兔台上。1％普鲁卡因作浸润麻醉后2-3颈静脉插管分离一侧颈外静脉，其下穿入丝线两根，结扎近头端，在其稍5-6生理盐水冲洗或将导管稍加旋转，进退，直至液面出现波动为止。分离另一侧颈外静脉，同样作静脉插管并连以输液装置。气管插管分离气管，其下穿一根线，用眼科剪在气管上作T形切口，插1m1，作血气和酸碱指标测定。38℃0.5ml的量，从耳缘静脉缓慢升或／和血压开始下降时，即停止注射。观察5-10分钟，如仍恢复正常水平可0.5ml／k。5分钟，再测各项指标一次。10ml的速度，输入生理盐水。输液量每增加50ml标一次。直至动物死亡。动物死亡后，挤压胸壁，观察气管内有无分泌物溢出。剖开胸、腹腔（注意勿损伤血管和脏器最后剪开心腔，观察心脏各腔体积，测量左右心室壁厚度。切开肺脏并挤压，观察有无水分挤出。结果记录观观察 血压 呼 吸 中心静压血气分析指标（mmHg） （次/ （mmHg）实验分）Po2(KPa)pHPco2(kPa)［HCO3mmol/l阶段正常注蜡后输液后剖检所见（六）实验注意事项用液体石蜡作栓塞剂时，注射速度一定要慢，控制在0.