药物安全性评价和GLP实验室

第17章药品安全性评价和GLP试验室广州中医药大学药学院药理学教研室zhangxj@张晓君药物安全性评价和GLP实验室第1页年份药品（用途）毒性反应受害地域受害人数1889~1950甘汞（驱虫、牙粉、通便）汞中毒欧、美、亚死亡儿童>585人1900~1949蛋白银（抗炎、消毒）银质从容症欧、美>100人1930~1960醋酸铊（头癣）铊中毒各国死亡>10000人1922~1970氨基比林（解热镇痛）粒细胞缺乏各国死亡>2082人1940硫代硫酸钠金（风湿、哮喘）肝、肾、骨髓损害各国约1/3用药者1935~1937二硝基酚（减肥）白内障欧、美万人失明，1人死亡1937磺胺酏，二甘醇作溶剂（抗菌消炎）肝肾损害美国358人中毒，107人死亡1953非那西丁（解热镇痛）肾损害、溶血欧、美、加死亡500人，肾病人以上1954二磺二乙基锡（治疥疮、粉刺耳）神经毒性、脑炎、失明法国死亡110人，中毒270人1956三苯乙醇（治高脂血症）白内障、阳痿、脱发美国>1000人1959~1961反应停（治妊娠反应）海豹样畸形儿欧、美、日>10000人，死亡5000人1960异丙肾上腺素气雾剂（平喘）严重心律失常、心衰英、美、澳死亡3500人1963~1972氯碘喹啉（治肠炎）骨髓病变、失明日本中毒>7856人，死亡率5%1933~1972已烯雌酚（治先兆流产）阴道腺癌（女）美国>300人1968~1979普拉洛尔（抗心律失常）角膜、心包、腹膜损害美国>2257万人70年代至世纪末四咪唑(TMS)驱虫药迟发性脑病各国60年代到世纪末氨基糖苷类抗生素（抗感染）耳聋各国我国>100万人耳聋关节炎镇痛药“万络”心肌梗塞和心脏猝死各国>6万人20-二十一世纪重大药害事件简表药物安全性评价和GLP实验室第2页药品非临床安全性评价产生背景国际经济合作与发展组织（OECD）提出了新化学物上市前最低程度安全性评价项目制订了一系列毒性试验准则凡按此试验准则进行毒理学试验，组员国间相互认可和接收3药物安全性评价和GLP实验室第3页第1节药品非临床安全性评价药品非临床安全性评价指在人临床试验之前毒理学试验研究，即按照要求毒理学程序和方法评价药品对机体产生有害反应，并外推到通常条件下应用药品对人体和人群健康是否安全。研究内容：评价药品毒性反应判断剂量和时间与毒性关系：最小中毒量、最小致死量、毒性反应起始和连续时间确定药品毒性靶器官、中毒机制、毒性反应性质与可逆性、毒性剂量与安全范围4药物安全性评价和GLP实验室第4页药品非临床安全性评价目标1.提供药品安全性试验数据，支持I期临床研究。2.确定临床试验安全性起始剂量，以及可接收安全剂量范围。3.经过广泛检测，发觉任何潜在和未知毒性。4.在药品开发中取得最大利益/风险性比率。5药物安全性评价和GLP实验室第5页药品非临床安全性评价不足1.人与动物种属差异，反应敏感性不一样，甚至有质差异→假阳性、假阴性；如，沙利度胺。2.毒理学试验给药剂量较大，存在高浓度向低浓度外推不确定性。3.试验动物数量有限，对发生率较低毒性难于发觉→小数量动物向大规模人群外推不确定性。4.试验动物遗传背景、身体情况一致，而临床用药人群个体差异较大。6药物安全性评价和GLP实验室第6页

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致癌性遗传毒性

生殖毒性

局部耐受性、过敏、依赖性、免疫毒性光敏和其它试验等

了解毒性反应剂量、时间、强度、症状、靶器官及可逆性等，为临床方案提供参考、预测出现毒性反应，制订临床防护办法、确保受试者用药安全

局部用药毒性全身用药毒性急性毒性长久毒性特殊毒性目

药品毒理学药物安全性评价和GLP实验室第7页第2节药品安全性评价GLP试验室非临床安全性研究质量管理规范（goodlaboratorypracticefornonclinicallaboratorystudies,GLP）GLP法规颁布1999年10月，SDA颁布了《药品非临床研究质量管理规范（试行）》。6月，SFDA局长2号令《药品非临床研究质量管理规范》8药物安全性评价和GLP实验室第8页GLP适用范围各国GLP适用范围不尽相同美国FDA——色素和食品添加剂、饲料添加剂、人用药品、兽用药品、生物制品、人用医疗器具、电子产品等经济合作与发展组织OECD——化学制品如工业化学品、人用药品、兽用药品、化装品、食品添加剂及农药等中国SFDA——药品药物安全性评价和GLP实验室第9页GLP已成为国际上药品安全性试验研究共同遵照规范世界各国GLP即使各有特点，不过基本标准是一致提升药品非临床研究质量确保试验数据真实性、完整性和可靠性最大程度地防止人为原因产生错误和误差，尽可能在试验早期发觉并修正确保临床用药安全实施GLP目标药物安全性评价和GLP实验室第10页GLP基本精神

GLP基本精神在于：“怎样降低人为误差，以得到可信性高试验数据”。降低系统误差防止偶然误差杜绝过失误差试验条件试验系统试验人员试验操作试验资料标准化规范化试验数据和结果质量药物安全性评价和GLP实验室第11页药品GLP认证试验项目单次和屡次给药毒性试验(啮齿类)单次和屡次给药毒性试验(非啮齿类)生殖毒性试验(I段、II段、III段)遗传毒性试验(Ames、微核、染色体畸变、小鼠淋巴瘤试验)致癌试验局部毒性试验免疫原性试验安全性药理依赖性试验毒代动力学试验

药物安全性评价和GLP实验室第12页药品GLP认证检验主要内容组织机构和人员试验设施与管理仪器设备和试验材料标准操作规程研究工作实施资料档案其它(试验技术现场考评、计算机系统)申请试验项目药物安全性评价和GLP实验室第13页二、组织机构设置与职责三、机构人员组成情况、人员基本情况以及参加培训情况14一、机构概要机构发展概况组织机构框架图试验设施平面图GLP试验室申请资料审查内容药物安全性评价和GLP实验室第14页GLP试验室申请资料审查内容（续）15四、机构主要人员情况机构责任人质量确保部门责任人专题责任人动物喂养管理责任人组织病理学检验部门责任人资料保管责任人供试品管理责任人其它责任人药物安全性评价和GLP实验室第15页五、动物喂养区域及动物试验区域情况动物设施面积和动物收容能力情况各动物喂养区平面图动物喂养区人流、动物流、物品流、污物流、空气流等流向图环境条件饲料、饮水、垫料等动物用具起源与检测功效试验室、化学及生物污染特殊区域环境控制情况清洁剂、消毒剂、杀虫剂使用情况试验动物起源、质量合格证实和检疫情况16GLP试验室申请资料审查内容（续）药物安全性评价和GLP实验室第16页资料审查内容（续）六、仪器、仪表、量具、衡器等七、机构主要仪器设备八、SOP（制订、修改及废弃）九、计算机系统运行和管理情况十、药品安全性评价研究实施情况17药物安全性评价和GLP实验室第17页GLP试验流程制订试验方案。由项目责任人依据药品特点、药品安全性试验指导标准和GLP实施要求制订将试验方案递呈质量确保部门审查，同时检验以往SOP是否适应于该项试验。试验进行中各业务部门试验工作统计、执行试验方案和SOP实施情况。18药物安全性评价和GLP实验室第18页GLP试验流程（续）总结汇报：搜集试验统计、对资料和数据进行处理，计算统计学及生物学意义；归纳药品毒性主要靶器官，及临床上可能出现毒性反应。资料存档：将试验方案、各个步骤原始统计、各种标本及总结汇报保留于档案部门。19药物安全性评价和GLP实验室第19页软件要求1.建立完善组织管理体系2.高素质工作人员队伍3.对各项工作必须采取标准操作规程（SOP）4.对试验全过程要求详细进行统计5.对数据管理与统计分析要求6.组织严密试验全过程监督、检验和审查20药物安全性评价和GLP实验室第20页硬件要求1.对试验环境中各种设施结构、宽广度、配置等有严格要求2.对试验数据搜集、测定或分析等使用仪器设备以及控制设备内环境有严格要求21药物安全性评价和GLP实验室第21页

GLP基本内容和要求

(一).研究课题组织与管理(二).对试验设施和仪器设备要求与要求(三).标准操作程序(SOP)制订和执行(四).试验设计方案(Protocol)及其主要内容(五).研究资料搜集、整理和汇报

WHOGLPTainingCourseCopyrightofNextCentury22药物安全性评价和GLP实验室第22页

（一）研究课题组织和管理

1．业务／行政主管及其职责任命,指定和更换课题组长确保质量确保单位推行职能提供人力，物力，财力等方面确保确认各种错误或过失得以纠正对研究人员和质保单位之间争议作出裁决WHOGLPTainingCourseCopyrightofNextCentury23药物安全性评价和GLP实验室第23页2．课题组长及其职责-设计签署试验方案及其它正式文件而且注明日期。-确保全部试验资料，包含意料之外试验反应，都被准确地统计并核实。-当试验过程中一些可能影响研究质量和结果一致性性未预料到情况发生时，及时采取办法（行动）补救，而且马上如实统计。-确保GLP各项要求都恪守执行。确保全部原始资料、文件、试验设计、标本及正式试验汇报按档案材料保留和管理。 签署正式研究汇报，按照国家法规要求签署恪守申明（ComplianceStatement）。24药物安全性评价和GLP实验室第24页3．质量确保单位及其职责

保留试验机构MasterSchedule，Protocols和SOPs（各1份）。研究进行期间对研究课题屡次监察，以确保研究一致性。统计和签署每次监察结主要问题和发觉马上口头知会课题长或提交书面汇报，陈说所发觉问题以及采取对应办法审定无未经同意或统计偏离Protocol和SOP情况发生或出现审校正式试验汇报，确保汇报中对研究方法SOP描述准确无误，试验结果确实是原始资料整理分析结果拟写和签署附在正式汇报质量确保申明25药物安全性评价和GLP实验室第25页（二）试验设施和仪器设备要求要求

1.试验设施试验机构具备足够试验动物房间或者其它试验系统区域，以使（1）不一样种属动物或试验系统分别饲育（2）不一样课题分离饲育（3）Quarantine动物（4）建立常规或尤其动物饲育系统。试验机构应有足够动物房间或其它试验系统区域，以分别隔离那些用已知有生物危害试验系统、受试物、对照物或参考物，包含易挥发物质、气溶胶、放射活性材料以及感染性（传染性）微生物。隔离房间或区域应有诊疗、处理和控制试验系统／动物疾病装置。应有效地隔离有疾病、疑有疾病、或疾病携带试验系统／动物房间或区域。

26药物安全性评价和GLP实验室第26页1.试验设施（续)试验设施应有和排放污染水、土壤或其它材料能力。如存养动物,则应有搜集和处理全部动物废物和排泄物能力，或者含有安全消毒装置。试验设施应按试验设计方案要求，具备调控环境条件如温度、温度、光线等能力。WHOGLPTainingCourseCopyrightofNextCentury27药物安全性评价和GLP实验室第27页2.仪器设备关键仪器设备(criticalequipment)常规仪器设备安全设施与设备仪器设备认证。计量审计及日常维修保养28药物安全性评价和GLP实验室第28页

（三）SOP制订和执行

1.种类和制订过程标准操作程序（StandardOperatingProcedure,SOP）

凡是试验设计方案中没有详细说明常规方法和操作程序，都应该制SOP。GLP明确要求，最少需要就以下详细方法和操作步骤制订标准操作程序:

1.试验系统／动物准备 2.试验系统／动物喂养管理 3.受试物、对照物和参考物接收、判别、贮放、配制，以及采样方法； 4.对试验系统观察; 5.（试）验和测试（定）方法29药物安全性评价和GLP实验室第29页1.种类和制订过程(续)6.

垂（频）死中死亡试验系统／动物处理；7.试验系统尸检或者尸解；8.标本搜集采取与标识；9.组织病理学检验；10.文件资料处理、存放和检索；11.仪器设备校正（准）和保养；12.试验系统转移（运）、取（替）代和判别方法。

30药物安全性评价和GLP实验室第30页

2.SOP格式和内容

－每一个标准操作程序都必须有各自编号（码），而且署明部门、版本和副本数目；－标准操作程序名称（题目）和生效日期；－审批者和共（会）签者包含质量确保部门责任人签字及签署日期；－该标准操作程序目标，涵盖范围,以及文中所用术语定义；－材料，操作程序和过程;－转换和计算方法；－汇报要求，并将文中“材料”部分和汇报格式（惯用表格式）作为标准操作程序之附件；－分发和保留要求与要求；31药物安全性评价和GLP实验室第31页2.SOP格式和内容(续)－负责此标准操作程序有效性，而且监督其恪守执行人员；－该标准操作程序复审和修订计划；－意外事件补救对策略；－保密要求；－参考文件和附件，包含各种表格。32药物安全性评价和GLP实验室第32页（四）试验设计方案及其主要内容

试验设计方案(Protocol)主要内容应该包含:

－课题名称和研究目标； －受试物、对照物和参考物名称、化学文摘号（CAS）,或者其它代码； －试验委托者（确保者）和实（试）验实施机构名称和详细地址： －试验起始和终止完成日期； －试验动物/试验系统选择及其理由； －尽可能地写明试验系统种属（系）、年纪、性别，以及试验系统起源；

33药物安全性评价和GLP实验室第33页（四）试验设计方案及其主要内容(续)－试验系统判别方法和判别程序；－描述详细试验设计，包含控制偏倚方法；－说明试验期间所用饮料，溶剂、以及用以助溶或混悬其它材料。对于饮料中可能出现污染物，要详细说明这些污染物特征，可能影试验结果含量（浓度），以及试验过程中能够允许含量（浓度）；－染毒路径及其选择理由；－染毒剂量/浓度单位。受试物、对照物和参考物给予方式和次数；34药物安全性评价和GLP实验室第34页（四）试验设计方案及其主要内容(continue) －试验、分析和测定（量）方法和次数；－需要保留统计和资料；－委托者（确保者）和课题组长准备签署日期；－对研究中所用统计处理方法加以说明。35药物安全性评价和GLP实验室第35页（五）研究资料搜集、整理和汇报

文字统计(包含表格)1原始统计应该用不裉色笔（最好是用黑色）及时统计,字迹应清楚易认。2写明观察日期和统计日期（最好为同一天），试验观察者须在每页上签字。3不得用各种涂改液。4不准涂改重描（Re--Writes），应重写。5允许改错，但只能用单线斜线在需更正处，而且署名、署日期，说明更正原因或理由（惯用代码示之）。6必须用装订成册试验统计本。7标准上不得有空白页。全部空页（处）要斜划注明“空白”，或者在最终一页加以尤其说明。

36药物安全性评价和GLP实验室第36页（五）研究资料搜集、整理和汇报(续) 8.如某部分原如资料与多项课题相关，能够复印（制）副本。但每份副本均须注明“原样副本”（普通盖章），由复印（制）人署名和署日期而且说明原件在何处存放。自动搜集原始资料 1自动统计各种资料，应逐一记统计日期、时间和仪器操作人。 2如需改动，一样不准原统计上“涂改”（Obscure）。要注明改动理由、改感人并署明改动日期。

37药物安全性评价和GLP实验室第37页（六）正式试验汇报基本内容和要求

正式试验汇报（FinalReport）。标准上应有以下项目和内容：

1、试验实施机构名称和地址：实（试）验起如日期、完成日期或者终（停）止日期。2、设计方案中确定研究目标和程序以及研究过程中设计方案任何修改和变更。3、用于分析试验数据资料统计方法（必须与设计方案对应部分一致）。4、受试物、对照物和参考物名称，化学文摘号或其它编码。这些物质强度、纯度、组成及其它理化特征，以及它们在试验条件下稳定性和溶解度。

38药物安全性评价和GLP实验室第38页（六）正式试验汇报基本内容和要求(续)5、描述说明实（试）验方法、、试验系统和染毒剂量。对于试验系统描述应包含动物数目、性别、体重范围、种属（系）、年纪和起源，以及标识和判别动物方法等；染毒剂量应同时说明剂量、给毒次数和间隔时间，染毒路径和连续时间等。6、描述和说明全部可能影响数据资料质量和一致性环境条件原因。7、课题组长、业务主管和全部参加课题专业人员姓名。8、数据资料转换、计算及统计处理。资料分析与总结，以及由资料分析而得出结论。39药物安全性评价和GLP实验室第39页（六）正式试验汇报基本内容和要求(续)

9、课题组全部专业人员，包含委托或确保单位代表、在资料或标本搜集之后参加分析和评价专业人员姓名，签字和签署日期。10、标本、原始资料和正式汇报和存放地点。11、质量确保单位申明（Statement）。40药物安全性评价和GLP实验室第40页（七）研究资料保管、存贮和检索

1.指定档案保管人，而且在组织机构图上反应出来。 2.确定档案材料设施、区域、或者机构。 3.明确有权进出档案材料保管区域人员，限制其它人进出该区域。 4.建立来该登记制度，借阅档案材料要严格登记。 5.建立便于检索索引系统。 6.分类管理各类档案材料，严格执行保留其限要求。 7.保管区域环境条件要适宜于档案材料长久保留，应有防/火设备和防虫蛀办法，以及紧急情况下转移疏散方案。

41药物安全性评价和GLP实验室第41页（七）研究资料保管、存贮和检索(续)EPA(FIFRA)-要求从以下三条中选择最长时间为保留期限：1、用于向报审产品研究或上市研究档案，在全部相关研究全部结束之前，都应妥善保管；2、报审自向正式递交报审之日起，最少保留五年；3、如该项研究未用于报审，则从研究结束或终止之日起最少存二年。EPA(TSCA)-1、除湿（鲜）标本外，自最终试验规则有效起，最少保留；2、商讨方案“(NegotiatedTestAgreement)”自该方法案公布之日起，最少保留; 3.其它研究档案材料，从向政府管理部门递交正式研究结果之日算，最少保留5年。

42药物安全性评价和GLP实验室第42页（七）研究资料保管、存贮和检索(续)FDA（非临床研究）－要求从以下三条中择最短时间为规范保留期限：1、用来支持或补充已经同意研究和上市产品档案材料，自同意之日起，最少保留2年；2、研究档案材料，自递交正式申请之日起，最少保留5年；3、未能作为报审材料档案，在实（试）验结束或终止后，再保留5年以上。43药物安全性评价和GLP实验室第43页试验设计目标

1.有目标、有计划、有步骤地进行试验。

2.最大程度地降低试验误差。

3.节约时间、样本、经费开支，降低人力物力财力，取得较高效率。第3节试验设计随机、对照、重复标准“预事则立，不预则废”药物安全性评价和GLP实验室第44页试验设计标准对照标准：

-意义：消除系统误差，判别处理和非处理原因差异

-类型：空白对照、阳性对照、阴性对照、本身对照随机标准：

-对照组和处理组除处理原因不一样外，其余应全部相同。

-动物试验随机分组；观察切片也应随机选择视野重复标准：

-随机标准可排除大部分非处理原因影响，但不能全部消除；所以，有必要重复，以排除偶然原因影响。

-表现为一定试验样本数（人、动物、细胞株）