细菌鉴定课件

细菌鉴定流程与方法临床微生物检验标本的采集标本采集的一般原则：1、早期采集2、无菌采集3、根据目的菌的特性用不同方法采集4、采取适量标本5、安全采集标本采集的种类：1、血液标本2、脑脊液标本3、脓液标本4、痰液标本5、粪便标本6、尿液标本7、生殖道标本标本的处理：1、增菌培养2、分离培养3、涂片革兰染色一些对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌等应保温并立即送检，而其他所有的标本采集后最好在２小时内送到实验室，若不能及时送检，标本应置于一定环境中保存，一般情况下，用于细菌培养的标本保存时间不应超过２４小时病人标本中可能含在大量致病菌，不管标本运送距离远近，都必须注意安全。标本切勿污染容器的瓶口和外壁，容器必须包装好，防止送检过程中倒翻或碰破流出。对于烈性传染病标本运送时更要特别严格，必须按规定包装，由专人运送．厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送，有时可直接用抽取标本的注射器运送。临床细菌室的任务：1、是从临床感染标本中分离出病原菌并进行准确鉴定2、指导临床合理使用抗菌药物3、临床感染性疾病的诊断、治疗和流行病学调查4、为院内感染的监控提供可靠的依据.临床细菌学检验技术形态学观察生化反应试验血清学试验分型试验血清学分型噬菌体分型（不常用）细菌素分型（不常用）动物试验（普通临床实验室不用）细菌的形态学检查镜下形态学观察：不染色标本暗视野动力观察念珠菌孢子和菌丝的观察丝状真菌小培养动态观察L型菌落与特殊细菌菌落解剖结构染色后镜下形态Gram染色抗酸染色异染颗粒染色荧光染料染色荧光抗体染色乳酸酚棉兰染色墨汁染色菌落形态观察：大小（细如针尖、小、中等、大）质地（坚硬、干燥、湿润、水滴状）光滑程度（粗糙、光滑、粘液型）凹凸（扁平、微凸、凸起、中性凹陷）颜色（白色、灰色、黄色、绿色、红色、黑色等）透明程度（透明、半透明、不透明）边缘（整齐、星状、有伪足、枫叶状、树叶状等）溶血性（α、β、γ）其他、琼脂凹陷、气生菌丝、菌落背面颜色、菌落特殊气味等营养需求（血琼脂、巧克力、营养琼脂生长情况）胆盐耐受（麦康凯生长情况）万古霉素耐受（含万古霉素巧克力生长情况）液体培养基生长现象（菌膜、上半部生长、均匀浑浊、下半部生长、沉淀）半固体动力现象（清晰、毛刷样、倒伞状细菌分离与鉴定—培养基的种类1、按成分分：天然培养基和合成培养基2、按用途分：基础培养基营养培养基选择培养基鉴别培养基特殊培养基3、按形态分：液体、固体、半固体培养基—培养基的选择1、血平板（BA）：各类细菌生长2、巧克力平板：嗜血杆菌、奈瑟菌3、中国蓝平板或伊红亚甲蓝平板4、麦康凯平板5、SS琼脂6、碱性琼脂平板或TCBS平板7、血液増菌培养基8、营养肉汤—分离培养细菌分离：1、平板划线分离法2、斜面接种法3、液体接种法4、穿刺接种法5、倾注平板法6、涂布接种法细菌培养1、需氧培养2、CO2培养3、厌氧培养生化反应

一、碳水化合物代谢试验1、OF试验2、糖苷醇类发酵试验3、ONPG实验4、七叶苷水解实验5、甲基红试验6、V-P实验二、蛋白质代谢试验1、明胶液化实验2、吲哚试验3、硫化氢试验4、尿素分解试验5、苯丙氨酸脱氨酶试验6、氨基酸脱羧酶试验碳源、氮源利用试验酶类试验氧化酶触酶凝固酶DNA酶酯酶CAMP试验

革兰阳性球菌

触酶链球菌科—+葡萄糖发酵微球菌—+玻片凝固酶金葡试管凝固酶

金葡+—+—新生霉素

表葡腐生葡萄球菌