血型鉴定和交叉配血技术的进展

血型断定和交织配血技能的希望医学界在输血治疗本领出现之初，曾产生过很多血的教导。1492年，首例输血由于利用的要领很原始，没有乐成病人殒命；1667年法国国王御医jean用羊血治疗精力病患者，偿试将动物血输给人导致殒命，这一严峻变乱使以后150多年没人再敢实行输血治疗。1818年，英国产科大夫jaesblundell初次用人血输治患者，获得必然结果。1900年奥地利维也纳大学科学家karllandsteiner创造ab血型及rh血型体系，增长了人类对血型体系的熟悉。直到1907年，hekten发起通过献血者和受血者之间的交织配血才进步了输血的宁静性，reubenttenberg完成了首例利用血型和交织配血的输血实行，开启了当代输血医学的新纪元职称论文。输血前试验包罗血型断定、抗体挑选和交织配血，此中交织配血是关键[1]。交织配血是在血型断定的底子上，进一步证明血型测定是否有误，以及受血者和供血者之间是否存在血型不合的抗原抗体反响，以包管受血者的输血宁静。这一试验对付未举行红细胞血型抗体挑选的患者尤为紧张，红细胞血型抗体有完全抗体和不完全抗体。完全抗体为分子量较大的ig抗体，可在盐水介质的交织配血中与相应的红细胞产生凝集反响；不完全抗体指ab体系以外的其他血型抗体，为分子量较小的igg抗体，在盐水介质中固然可以或许结合红细胞上的抗原，但不克不及使红细胞凝集，必需通过特定的要领使致敏红细胞产生凝集。按照红细胞血型抗体的特性，血型断定和交织配血要领在不竭产生，其检测技能也在不竭生长。1盐水交织配血法盐水法配血时，用生理盐水配制红细胞悬液，红细胞膜上由于唾液酸中的羧基离子而带负电，此负电荷形成的排挤力〔zeta电位〕使单个红细胞之间保持必然的间隔，当其与血清相配适时，血清中的大分子完全抗体，能在相应红细胞之间搭桥，使其产生凝集，通过不雅察凝集或溶血来断定配血结果。盐水法是交织配血的必做工程，能轻便快速的检测ig型抗体，创造血型是否错误或断定是否产生溶血，但不克不及检出不完全igg型抗体[2,3]，不克不及有用的防范免疫性溶血性和非溶血性输血反响的产生，因此单用盐水法配血存在必然的伤害性。2抗人球卵白交织配血法〔agt〕1908年arlreshi利用分子搭桥的原理记载了抗人球卵白试验。此法又称bs试验，分为检测红细胞外貌有无不完全抗体的直接抗人球卵白试验和检测血清中有无不完全抗体的间接抗人球卵白试验，是最经典、最早用于查抄不完全抗体的要领，是如今交织配血的金尺度。本法敏捷，但是传统的抗人球要领，操纵繁杂、反响时间较长、结果不易断定和同一、试剂效期短，不克不及满意输血检测实时正确的要求，因此未被海内普及接纳。3酶介质交织配血法酶法是接纳卵白水解酶〔如菠萝酶、木瓜酶等〕举行配血的要领。酶可以粉碎红细胞外貌带电荷的唾液酸，从而低落红细胞外貌电荷，使其得以挨近，因此能使具有特异性的不完全抗体与经酶处置惩罚的具有相应抗原红细胞产生凝集。此法的特点是操纵较为轻便，经济，但较难质控，时间长，实行重复性较差，并且酶大概部门的改变红细胞布局，使某些埋伏的抗原得以表露，轻易产生假阳性；有的抗原颠末消化后便消散活力，真阳性酿成假阴性。因此，此法也有必然的范围性。4凝结胺交织配血法〔pt〕1980年palezari和jiang起首将凝结胺技能应用在血库作业上。凝结胺交织配血，是利用低离子介质淘汰红细胞四周的阳离子云，以促进红细胞与血清或血浆中抗体结合。聚凝胶分子是带有高价阳离子多聚季镀盐，溶解后带有许多正电荷可以中和红细胞外貌负电荷，有利于红细胞凝集，低离子强度溶液也能减低红细胞的zeta电位，可进一步增长抗原抗体间的吸引力。当血清中存在ig或igg类血型抗体时，与红细胞产生精细结合，此时参加枸橼酸盐解聚液以消除聚凝胶的正电荷，使ig或igg类血型抗体与红细胞产生凝集不会散开；假设血清中不存在ig或igg类血型抗体，参加解聚液可使非特异性凝集消散。此法可以检出ig与igg两种性子的抗体，能创造可引起溶血性输血反响的险些全部完全与不完全抗体。据报道，凝结胺法应用于血型断定、交织配血、不完全抗体的挑选，其敏捷度及特异性远高于其他介质的1-250倍，尤其是rh体系抗体，但对igg抗-ab抗体的检出本领较低[4，5，6]。此法操纵轻便、快速，在一些下层病院均已普及利用。聚凝胺法固然轻便快速，但有大概漏检紧张的kell血型体系[7]及血液中低效价的不规矩抗体[8]，并且易受到温度、天气、临床药物、试剂及操纵因素的滋扰，而使交织配血出现一些非常结果[9]。5微柱凝胶交织配血法(gt)又称微管〔板〕凝胶抗球卵白试验。1988年创造的微柱凝胶配血法使抗人球卵白应用于输血通例检测成为实际，它保持了传统抗球卵白试验的正确性，并且要领简朴，易于批量操纵[10]，是新生长的一项免疫学检测技能。此法可在全主动血型阐发仪上举行，成为国际宁静输血查抄的保举要领，如今外洋已普及应用[11]。微柱凝胶法是凝胶过滤技能和抗原抗体反响的结合，在微量柱中布满特制的凝胶介质或微小的玻璃珠介质，介质之间的间隙只能使单个红细胞变形通过，起到雷同细胞筛的作用。红细胞与相应抗体产生凝结反响，经离心后不克不及完全到达柱的底部，而出现阳性，全部沉到底部者为阴性。微柱根据血清反响特点和试剂差异分为不含特异性抗体的中性柱、含特异性抗体的特异性柱、用于检测igg类不完全抗体和交织配血的抗球卵白柱。此法根本原理固然与抗人球卵白法雷同，但一样平常以为抗人球卵白更为可靠，而微柱凝胶法有产生漏检的大概。这是由于微柱凝胶法必要在凝胶内离心，少量薄弱凝集的红细胞在离心外力的作用下大概会散开，大概由于具有易变性的红细胞在通过凝胶孔时变形通过，从而使薄弱阳性凝集漏检。与手工凝结胺pt法比拟，微柱法敏捷度高，能捕获到非常薄弱的抗原抗体反响因此结果更正确，交织配血时其敏捷度较pt法高约1-5个滴度[12]。微柱凝胶法具有操纵轻便、结果不变、重复性好、标本用量少且结果可保存等长处，试验时增长了孵育步调，也淘汰了冷凝集对实行结果的影响。但有文献[6]报道，微柱凝胶法对致敏红细胞和igg抗-ab血清的检出本领低于抗人球卵白法和凝结胺法，对igg抗-d血清的检出本领高于抗人球卵白法和凝结胺法；且红细胞悬液浓度过高时因离心力不敷或离心时间过短、血清中含纤维卵白出现细胞凝块或血液标本被细菌污染、血浆中的卵白质〔包罗ig和补体〕非特异性的吸附到患者的红细胞外貌而产生非特异性凝集反响[13]。6．近况及方法随着临床输血技能的快速生长，血型断定和交织配血要领不竭的更新和美满，很好的包管了病人的输血宁静。但在一些下层病院由于信息雷同不敷，技能还很原始，血型断定和交织配血要领仍停顿在盐水法。由于盐水配血法只能检测出不相合的完全抗体，因此除盐水法外，还必要应用别的的配血要领来检测是否存在不完成抗体，以制止不完全抗体造成的输血反响。由于传统抗人球卵白法、酶法自己的范围以及微柱凝胶法仪器昂贵、试剂本钱高，如今大多数的下层病院，在未能通例开展红细胞不完全抗体筛查环境下，只能接纳盐水法加凝结胺配血法来举行输血前配血试验。段慧玲等[14]报道，几种交织配血要领的敏捷度依次为：微柱凝胶法凝结胺法盐水法。如今，外洋根本接纳微柱凝胶法，海内也正在普及。何子毅[15]、罗志[16]的研究表白，微柱凝胶法、抗人球卵白法和凝结胺法用于交织配血检测igg型抗体，假设超出其最低检测限，均存在阳性漏检的征象。因此我们发起在一样平常交织配血事情中，接纳多种要领同时做交织配血试验，以防范供受血者血液中存在的效价较低、或效价较低、亲协力也较低的igg抗体漏检。别的，有些交织配血试验，由于受到过高量的球卵白的影响，试验结果也可出现假阳性，此时应对结果做进一步断定，以确保交织配血结果的正确性。参考文献[2]王培华,输血技能学[],第2版,北京:人民卫生出书社,2002:126-131[3]李延年,谭丽莉.由单纯盐水介质配血的危害性[j]，临床血液学杂志,1996，9(3):137-137[4]赵修风,尤崇革.凝结胺检测技能在交织配血中的应用[j].兰州医学院学报，2022,29(4):44-45[5]马利平,张开国.凝结胺试验在交织配血中的应用[j]，济宁医学院学报，2022,28(2)62[6]桑胜去,胡宗煌,徐正同等.手工凝结胺技能在产前免疫性抗体及新生儿溶血病查抄中的应用[j],临床查验杂志,1997,15(1):50-50[7]张俊玲,尚锦青,杨波等.3种配血要领对含rh抗体血样本配血结果研究[j].中国输血杂志,2022,21(1):12-14[8]薛莉,李鹏,侯振娇.抗球卵白法与凝结胺法用于低效价抗-d标本配血的比力[j].中国输血杂志,2022,22(10):825-826[9]陈桂冰,张然,曾兰英.凝结胺法交织配血的滋扰及去除要领研究[j].今世医学,2022,17(29):42-43[10]夏琳,周新.临床输血与输血技能学实行引导[],北京:人民卫生出书社.2022:56-57[12]张红梅.微柱凝胶法与凝结胺法交织配血结果的比力[j],临床输血与查验,2022,13(1):66-67[13]杨世明,田榆,张勇萍等.微柱凝胶法交织配血试验及其影响因素的探究[j],细胞与分子免疫学杂志,2022,2