植物组织中水势的测定演示文稿_第1页
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文档简介

植物组织中水势的测定演示文稿第一页,共四十七页。水势表示水分的化学势;水从水势高处流向低处;植物体细胞之间,组织之间以及植物和环境之间的水分移动方向由水势差决定(流速和方向)。水势:第二页,共四十七页。

植物组织水势(和渗透势)的测定方法:

液相平衡法-小液流法、重量法;质壁分离法。所需仪器设备简单,但手续繁琐、效率低,难以自动记录。压力平衡法-压力室法。适于测定枝条或整个叶片的水势,对于小型样品叶圆片等则无能为力。气相平衡法-热电耦湿度计法、露点法。能广泛用于各种植物叶片水势和渗透势的测定,所需样品量极少、测量精度高,是近年来发展起来的一类较好的植物水势及其组分的测定技术。水势测定:平衡法第三页,共四十七页。一、液体交换法测定植物组织水势(小液流法)小液流法测定植物组织水势的原理?第四页,共四十七页。组织失水,外液浓度变小;ψw植物>

ψS(一)原理1、当植物组织与外液接触时发生水分交换:★植物组织的水势低于外液的渗透势(溶质势):组织吸水,外液浓度变大;ψw植物<ψS★植物组织的水势与外液的渗透势相等,则水分交换保持动态平衡:★植物组织的水势高于外液的渗透势(溶质势):外液浓度保持不变;ψw植物=ψS第五页,共四十七页。

3、根据外液浓度的变化情况即可确定与植物组织相同水势的溶液浓度。根据以下公式计算出溶液的渗透势,即为植物组织的水势。

2、同一种物质浓度不同时其比重不一样,浓度大的比重大,把高浓度的溶液一小液滴放到低浓度溶液中时,液滴下沉;反之则上升。第六页,共四十七页。

溶液渗透势的计算:

ψS=﹣iCRT

式中ψS—溶液的渗透势,以MPa为单位;

R=0.008314MPa·L·mol﹣1·K﹣1

T—绝对温度,即273+t℃;

C—溶液的质量摩尔浓度,以mol·kg-1

H2O为单位

i-溶液的等渗系数,CaCl2可用2.6。CaCl2溶液粘度大,容易形成液滴,便于观察。第七页,共四十七页。(二)实验材料

大叶黄杨叶片(取叶片8-10个,随去随用,不要带枝条?)纸擦干叶片,勿水洗!第八页,共四十七页。试剂:

CaCl2溶液:

0.05,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5mol·kg-1H2O

甲烯蓝粉末

用具:

特制试管架1个;10ml试管12支(具橡皮塞)

(为什么使用特制的试管架?)(二)实验用品第九页,共四十七页。取干燥洁净的试管12支,分成甲、乙两组。甲组试管中分别加0.05~0.5六种浓度的溶液之一各0.5ml(量准确?)。用一只移液器低高。乙组试管加入6种浓度的CaCl2溶液各4ml,用一只移液器低高。4ml需要很准确吗?4.甲、乙两组试管分别塞上相应的橡皮塞备用。

为什么盖橡皮塞?(三)操作步骤第十页,共四十七页。5.选取均匀一致的植物叶片8~10片(勿水洗!),打取叶圆片60余片,甲组试管内各加入叶圆片10个,使叶片浸入溶液,盖上橡皮塞,平衡20min以上。期间多次摇动试管,以加速水分平衡。6.染色:在甲组每一试管中用解剖针放入微量甲烯蓝粉末,摇匀,溶液变蓝。(干燥针头先用蒸馏水湿润,加入的甲烯蓝量一定少)第十一页,共四十七页。7.

观察液滴升降:用毛细管取甲组试管有色液乙组试管中部液滴位置?观察液滴升降并记录。

观察一个浓度后用吸水纸将毛细管内的溶液吸净,再进行下一个测定。第十二页,共四十七页。静止不动液滴植物材料ψw<ψS溶液浓度变大ψw

>ψS溶液浓度变小溶液浓度不变ψw=ψS液滴第十三页,共四十七页。毛细管放置稳定挤出小液滴取出毛细管观察液滴升降第十四页,共四十七页。毛细管放置稳定第十五页,共四十七页。8.

分别测定不同浓度中有色液滴的升降,找出与组织水分势相当的浓度,根据原理公式计算出组织的水势。第十六页,共四十七页。第十七页,共四十七页。溶液浓度0.050.10.20.30.40.5液滴移动方向具有平衡浓度结果第十八页,共四十七页。溶液浓度0.050.10.20.30.40.5液滴移动方向无平衡浓度结果第十九页,共四十七页。溶液浓度0.050.10.20.30.40.5液滴移动方向错误结果第二十页,共四十七页。溶液浓度0.050.10.20.30.40.5液滴移动方向结果是否正确,为什么?溶液的浓度偏小第二十一页,共四十七页。溶液浓度0.050.10.20.30.40.5液滴移动方向结果是否正确,为什么?溶液的浓度偏大第二十二页,共四十七页。加样器的使用正确使用:注意事项:吸取溶液后不能倒置第二十三页,共四十七页。注意事项:

1.所取材料在植株上的部位要一致,打取叶圆片要避开主脉和伤口。

2.取材以及打取叶圆片的过程操作要迅速,以免失水。到实验材料生长处操作。

3.甲烯蓝易吸附在试管壁上,先用水洗刷,再用铬酸洗液浸泡。,铬酸洗液回收,可以重复使用。第二十四页,共四十七页。

小液流法植物组织水势的测定思考题:

小液流法测定植物组织水势的实验中,甲组试管中叶园片的多少对测定结果有无影响?为什么?如果蓝色小液滴在乙组试管中均下降,能否求出组织水势?第二十五页,共四十七页。二、露点法测定植物组织水势

测定动物材料、植物材料、愈伤组织、根尖、土壤的水势以及各种液体的渗透势及活体叶片的水势,并可以兼做渗透压计使用。到目前为止,HR-33-T-R型露点微伏压计是测定范围最广、性能最完善的水势仪第二十六页,共四十七页。

将叶片或组织汁液(测渗透势)密闭在体积很小的样品室内,经一定时间后,样品室内的空气和植物样品将达到温度和水势的平衡状态。既:气体的水势(也是蒸气压)=叶片的水势(或组织汁液的渗透势)测出样品室内空气的蒸气压,便可得知植物组织的水势。空气的蒸气压与其露点温度具有严格的定量关系,本仪器便通过测定样品室内空气的露点温度而得知其蒸气压。测定原理:第二十七页,共四十七页。

测量时,先给热电偶施加反向电流,使样品室内的热电偶结点降温,当结点温度降至露点温度以下时,将有少量液态水凝结在热电偶结点表面,此时切断反向电流;仪器工作原理:第二十八页,共四十七页。

停止外加电流后,热电偶结点温度因热交换平衡而很快上升;但是,当到达露点温度时,因表面水分蒸发带走热量,降温,从而使其温度保持在露点温度,呈现短时间的稳衡状态。根据热电偶的输出电位记录结点温度变化。第二十九页,共四十七页。室温露点温度时间第三十页,共四十七页。

待结点表面水分蒸发完毕后,其温度将再次上升,直至恢复原来的温度平衡。记录露点时的稳衡状态的温度,便可将其换算成待测样品的水势或渗透势。第三十一页,共四十七页。HR-33T-R型露点微伏压计

第三十二页,共四十七页。

C-52样品室第三十三页,共四十七页。第三十四页,共四十七页。露点微伏压计操作方法

2、植物材料的平衡1、植物材料:大叶黄杨叶圆片(小液流打取的叶圆片1片)逆时针旋转样品室上部调节旋钮,打开样品室。第三十五页,共四十七页。干旱叶片平衡时间延长顺时针转动调节旋钮封闭样品室平衡20min第三十六页,共四十七页。打开主机电源℃/μV开关置于“μV”

位置连接探头FUNCTION旋钮置于“SHORT”

调节Πv值按下Πv按钮调节ΠvSET旋钮使表头指针达到已知的Πv值调零量程(RANGE)旋钮放在预期的位置上,30FUNCTION旋钮放在READ位置上调节ZEROOFFSET旋钮使指针读数为零{FUNCTION旋钮调到“COOL”位置指针右移达到最大FUNCTION旋钮调到“DP”位置指针向左偏转读取测定值FUNCTION置于“SHORT”

拔出探头关闭电源第三十七页,共四十七页。(1)打开主机电源开关。将℃/μV开关置于“μV”位置。(2)将C-52探头连接到插口上。注意:在连接和拔出C52探头时FUNCTION开关处在“SHORT”位置上。

2、测定第三十八页,共四十七页。严禁手握插头连线插拔探头第三十九页,共四十七页。(3)按下Πv按钮,调节ΠvSET旋钮使表头指针达到C52连接线上标注的Πv值。第四十页,共四十七页。(4)将量程(RANGE)旋钮放在预期的位置上(通常在30位置),FUNCTION旋钮放在READ位置上,调节ZEROOFFSET旋钮使指针读数为零。(5)将FUNCTION旋钮调到COOL位置,此时表头的指针向右偏转,当指针移动到最大时,将FUNCTION旋钮调到DP位置,此时表头的指针向左偏转,当表头的指针稳定后,从表头上读取测定值。第四十一页,共四十七页。如果RANGE旋钮位于10或100的位置,按上排刻度读数

如果RANGE旋钮位于30或300的位置,按下排刻度读数

第四十二页,共四十七页。

读数为电势差,电势差与水势的呈线性函数,比例系数为﹣7.5μV/MPa。

样品水势(MPa)=

读数μV/(-7.5μV/MPa)第四十三页,共四十七页。测定结束,打开C-52顶部的旋钮,推出样品室第四十四页,共四十七页。清理植物组织第四十五页,共四十七页。仪器操作特别注意:1、拔下样品室插头时握住

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