抗生素课件讲义整理-002

第八章抗生素类药物的分析（Antibiotics）1最新课件第八章抗生素类药物的分析1最新课件第一节：概述1、定义：抗生素是某些微生物的代谢产物或合成的类似物，在小剂量的情况下能抑制微生物的生长和存活，而对宿主不会产生严重的毒性。2、特点：由生物体产生或人工合成化学纯度低结构、组成复杂对他种生物体有抑制作用3、名称演变：抗生素——抗菌素——抗生素

60-70年80年后2最新课件第一节：概述1、定义：抗生素是某些微生物的代谢产物或合成2、一、抗生素类药物一般检查项目：

①鉴别试验:用化学法、物理化学法以及生物学法来确认是哪种抗生素②毒性试验:控制药品中的毒性物质③无菌试验:检查药品中有无杂菌污染④热源试验:控制药品中的致热物质3最新课件一、抗生素类药物一般检查项目：3最新课件

⑤水分测定:控制水分含量⑥溶液澄明度检查:检查不溶性物质⑦

溶液pH试验:测定pH⑧降压试验:检查有降压作用的杂质⑨

效价测定:有效成分测定4最新课件⑤水分测定:控制水分含量4最新课件抗生素药品分析常用的方法：物理方法:旋光法、紫外、红外、色谱等化学方法（专属性不强）：功能团反应，鉴别和含量的测定。容量分析法：酸碱滴定（青霉素含量测定）和碘量法。生物学方法：酶反应、微生物法测定效价5最新课件抗生素药品分析常用的方法：物理方法:旋光法、紫外、红外、色谱第二节抗生素类药物的鉴别鉴别方法：理化方法生物学法：微生物法

官能团显色：β–内酰胺环光谱法：UV、IR色谱法:TLC、HPLC6最新课件第二节抗生素类药物的鉴别鉴别方法：理化方法官能团显色：根据化学结构分类：β–内酰胺类抗生素：青霉素、头孢菌素氨基糖苷类：链霉素、庆大霉素四环素类：四环素、金霉素大环内酯类：红霉素、麦迪霉素多稀大环类：两性霉素Ｂ多肽类：多粘菌素苯烃胺类：氯霉素蒽环类：阿霉素其他：

抗生素类药物的分类

7最新课件根据化学结构分类：抗生素类药物的分类7最新课件第二节β-内酰胺抗生素

(β-LactamAntibiotics)

8最新课件第二节β-内酰胺抗生素

(β-LactamAntibi一、β-内酰胺抗生素的结构特征★指分子中含有由四个原子组成β-内酰胺环★是该类抗生素发挥生物活性的必需基团★和细菌作用时，内酰胺环开环与细菌发生酰化作用抑制细菌的生长。★因β-内酰胺由四个原子组成，分子张力较大，化学性质不稳定易发生开环导致失活。9最新课件一、β-内酰胺抗生素的结构特征★指分子中含有由四个原子组成β二、分类：经典结构药物青霉素类(Penicillins)头孢菌素(Cephalosporins)10最新课件二、分类：经典结构药物青霉素类(Penicillins)头孢碳青霉烯(Carbapenem)青霉烯(Penem)单环的β-内酰胺(Monobactam)氧青霉烷(Oxypenam)亚胺培南（泰能）克拉维酸氨曲南分类：非典型结构药物11最新课件碳青霉烯(Carbapenem)青霉烯(Penem)单环的β性质1：酸性分子中游离羧基具有相当强的酸性，能与无机碱或某些有机碱形成盐。其碱金属盐易溶于水，而有机碱盐难溶于水，易溶于甲醇等有机溶剂。12最新课件性质1：酸性分子中游离羧基具有相当强的酸性，能与无机碱或某性质2：旋光性青霉素族分子中含有三个手性碳原子，头孢菌素族含有两个手性碳原子，故都具有旋光性。根据此性质，可用于定性和定量分析。﹡﹡﹡﹡﹡13最新课件性质2：旋光性青霉素族分子中含有三个手性碳原子，头孢菌素族

性质3：紫外吸收特性2、头孢菌素类

母核有共轭体系

1、青霉素类母核无明显UV

多数有苯环取代基

14最新课件性质3：紫外吸收特性2、头孢菌素类母核有共轭体性质4：不稳定性

干燥条件下青霉素盐稳定。青霉素水溶液在pH6-6.8时较稳定。β-内酰胺环是该类抗生素结构最不稳定的部分。四元环张力大

酰胺键易水解不稳定性因素（某些金属离子）（温度）某些氧化剂、羟胺15最新课件性质4：不稳定性

干燥条件下青霉素盐稳定。青霉素水溶液例青霉素的降解反应青霉素青霉噻唑酸H2O/OHˉ青霉素酶青霉酸H2OpH2100℃α–青霉噻唑酰基羟胺酸NH2OH青霉烯酸pH4青霉胺CO2青霉醛HgCl2例16最新课件例青霉素的降解反应青霉素青霉噻唑酸H2O/OHˉ青霉素酶青霉（一）色谱法1、TLC法对照品对照法2、HPLC法和斑点颜色比较供试品对照品相同条件fR¾¾¾®¾Rt比较供试品对照品相同条件¾¾¾®¾二、鉴别试验17最新课件（一）色谱法1、TLC法对照品对照法2、HPLC法和斑点颜色

头孢氨苄

λmax=262nm青霉素V钠

A280nm/A264nm

=1.30～1.50A,Emin,max,,%cm11λ光谱图λ2．紫外分光光度法(UV)（二）光谱法1、IR法18最新课件头孢氨苄λmax=262nm19最新课件19最新课件2、IR法3180cm-1酰胺N-H1780cm-1β–内酰胺C=O3470cm-1酚羟基O-H1690cm-1仲酰胺C=O1250cm-1酚羟基C-O以阿莫西林为例20最新课件2、IR法3180cm-11780cm-13470cm-11β-内酰胺环酰胺115251680-=cm、VOC117501800-=cm~VOCNHV=13300-cmCOOHV-114101600-cm、羧基21最新课件β-内酰胺环酰胺115251680-=cm、VOC11750（三）茚三酮反应某些具有α-氨基的本类药物，如氨苄西林，遇茚三酮即显蓝紫色。

△22最新课件（三）茚三酮反应某些具有α-氨基的本类药物，如氨苄西林，遇茚α-氨基、伯胺某些羟基胺类酮式烯醇式茚三酮茚三酮缩合蓝紫色23最新课件α-氨基、伯胺酮式烯醇式茚三酮茚三酮缩合蓝紫色23最新课件（四）各种盐的反应

青霉素族、头孢菌素族药品中，许多制成钾盐或钠盐供临床使用，因而可利用其火焰反应进行鉴别。1.火焰反应24最新课件（四）各种盐的反应青霉素族、头孢菌素族药品中，许多制三、特殊杂质的检查

本类抗生素的特殊杂质主要有高分子聚合物、有关物质、异构体等，一般采用HPLC法控制其限量，也有采用测定杂质的吸收度来控制杂质量的。25最新课件三、特殊杂质的检查本类抗生素的特殊杂质主要有高分子聚

（二）有关物质和异构体

例：头孢氨苄中有关物质的检查（反相HPLC法）取本品，流动相，成0.4mg/ml，得供试液供试液，流动相，成4ug/ml，得对照液①②对照品，流动相，成4ug/ml，得杂质对照液

杂质①②，外标法。其他杂质，主成分自身对照法。头孢氨苄以青霉素钾为原料，经氧化、扩环、裂解得7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸（7-ADCA）①，再与侧链a-苯甘氨酸②缩合而成。这两种原料有可能成为主要杂质。26最新课件（二）有关物质和异构体26最新课件

（三）杂质吸收度的检查例：青霉素钠（钾）

取本品，加水，成1.80mg/ml。A280nm[控制杂质]不得大于0.10，A264nm

[控制青霉素钠（钾）的含量]应为0.80-0.88。27最新课件（三）杂质吸收度的检查27最新课件（四）有机溶剂氨苄西林钠：CH2Cl2GC头孢哌酮：丙酮GC头孢他啶：吡啶HPLC

28最新课件（四）有机溶剂氨苄西林钠：CH2Cl2GC28最新课件四、含量测定青霉族和头孢菌素族的含量测定大多采用理化测定方法中的HPLC法内标法＋校正因子外标法特点

快速、高效、灵敏专属性强、重现性好一法多用（鉴别、检查、含测）29最新课件四、含量测定青霉族和头孢菌素族的含量测定大多采用理化测定方法哌拉西宁原料药含量测定色谱条件

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇–0.2mol/L磷酸二氢钠溶液–10％氢氧化四乙基铵溶液–水（400︰50︰3︰547）用磷酸调节pH值至5.5为流动相。检测波长为254nm。30最新课件哌拉西宁原料药含量测定30最新课件二氨基糖苷类抗生素链霉素双氢链霉素新霉素卡那霉素庆大霉素巴龙霉素31最新课件二氨基糖苷类抗生素链霉素双氢链霉素3链霉素链霉胍+链霉糖+N-甲基-L-葡萄糖胺

苷元链霉双糖胺链霉糖N-甲基-L-葡萄糖胺链霉胍32最新课件链霉素链霉胍+链霉糖+N-甲基-L-葡萄糖胺庆大霉素

糖

苷元绛红糖胺+脱氧链霉胺+加洛糖胺

糖

绛红糖胺紫素胺2-脱氧链霉胺加洛糖胺N-甲基-3-去氧-4-甲基戊糖胺33最新课件庆大霉素糖苷元绛红糖胺+脱氧链霉胺+庆大霉素C复合物庆大霉素C1R=HR1、R2=CH3

庆大霉素C2R=R2=H

R1=CH3

庆大霉素C1aR、R1、R2=H

庆大霉素C2aR=CH3R1=R2=H

庆大霉素C2bR=R1=HR2=CH334最新课件庆大霉素C复合物34最新课件一、结构与性质多与硫酸成盐链霉素3个庆大霉素5个碱性中心（一）碱性水溶性（二）溶解性（三）

UV（四）苷的水解与稳定性链霉素pH5～7.5庆大霉素pH2～12

稳定链霉素在230nm处有吸收，庆大霉素、奈替米星无35最新课件一、结构与性质多与硫酸成盐链霉素3个庆大霉素坂口反应N-甲基葡萄糖胺反应麦芽酚反应36最新课件坂口反应N-甲基葡萄麦芽酚反应36最新课件二、鉴别

茚三酮反应（一）△羟基胺结构硫酸庆大霉素鉴别(1)取本品约5mg，加水1ml溶解后，加0.1％茚三酮的水饱和正丁醇溶液1ml与吡啶

0.5ml，在水浴中加热5分钟，即显紫蓝色。

37最新课件二、鉴别茚三酮反应（一）△羟基胺结构硫酸庆（二）Molisch反应

具五碳或六碳糖的氨基糖苷类抗生素经酸水解后，在盐酸（或硫酸）作用下脱水生成糠醛或羟甲基糠醛。这些产物遇α-萘酚或蒽酮呈色。红紫色38最新课件（二）Molisch反应具五碳或六碳糖的氨基糖蒽酮呈色原理：蓝紫色阿米卡星鉴别(1)取本品约10mg，加水1ml溶解后，加0.1％蒽酮的硫酸溶液4ml，即显蓝紫色。

39最新课件蒽酮呈色原理：蓝紫色阿米卡星鉴别39最新课件N-甲基葡萄糖胺反应（三）乙酰丙酮OH-吡咯衍生物对二甲氨基苯甲醛H+红色（Elson-Morgan反应）H+40最新课件N-甲基葡萄糖胺反应（三）乙酰丙酮OH-吡咯衍生物对二甲氨基

麦芽酚反应（四）

链霉糖特有反应H+分子重排扩环41最新课件麦芽酚反应（四）链霉糖特有反应H+分子重排扩环紫红麦芽酚42最新课件紫红麦芽酚42最新课件链霉胍特有反应（或α-萘酚）8-羟基喹啉坂口反应（五）α-萘酚43最新课件链霉胍特有反应（或α-萘酚）8-羟基喹啉坂口反应（五）α-（六）反应H+光谱法（八）庆大霉素无UV吸收色谱法（七）44最新课件（六）反应H+光谱法（八）庆大霉素无UV吸收色谱法（七）44三、检查链霉素杂质（一）链霉素B（甘露糖链霉素）方法TLC中的对照品法（BP）1.来源反应中间体45最新课件三、检查链霉素杂质（一）链霉素B（甘露糖链霉素）对微生物的活性无明显差异毒副作用和耐药性不同发酵菌种不同工艺差别C组分比例不一致规定控制各组分的相对百分含量HPLCChPUSPBPJP庆大霉素C组分的测定（二）46最新课件对微生物的活性无明显差异毒副作用和耐药性不同发酵菌种不同C组λmax=330nm1.衍生化原理

1-烷基硫代-2-烷基异吲哚衍生物47最新课件λmax=330nm1.衍生化原理1-烷基硫代-2-烷RP－HPLC方法2.规定C125~50%C1a15~40%C2a+C220~50%计算3.峰面积归一化法48最新课件RP－HPLC方法2.规定C149最新课件49最新课件四、

含量测定链霉素、庆大霉素微生物检定法

本法系利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用量反应平行线原理的设计，比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小，以测定供试品效价的一种方法。50最新课件四、含量测定链霉素、庆大霉素微生物检定法50最新离子交换色谱法离子对色谱法RP-HPLC法HPLC法51最新课件离子交换色谱法HPLC法51最新课件第四节四环素类抗生素(TetracyclineAntibiotics)52最新课件第四节四环素类抗生素(TetracyclineAnti苯并蒽环结构,C-4为α结构,是由放线菌产生的,天然有

一、天然四环素结构特点ABCD4R1R2R3R4四环素HOHCH3H53年得到土霉素OHOHCH3H50年得到金霉素HOHCH3Cl48年得到53最新课件苯并蒽环结构,C-4为α结构,是由放线菌产生的,天然有二、作用：广谱抗生素，G+、G-、部分立克次体、病毒、原虫等近年来四环素类抗生素新药开发不理想三、作用机制:干扰细菌蛋白质的生物合成与细菌中的Mn+形成金属离子络合物54最新课件二、作用：广谱抗生素，G+、G-、部分立克近年来四环素类抗生四、理化性质：黄色结晶性粉末1、酸碱两性：Ar10-OH、=C3-OH为酸性

C4–N=为碱性。可溶酸碱临床用其碱，成HCl盐55最新课件四、理化性质：黄色结晶性粉末1、酸碱两性：Ar10-OH、=2、稳定性：PH=2脱水产物（C6-OH；C5α-H）1)在酸性条件下发生消除反应,失活56最新课件2、稳定性：PH=2脱水产物（C6-OH；C5α-H）1)在PH=2-6差向异枸化（C4-N；由α→β）难易：土（氢键）＞四＞金（位阻）2)pH2-6,C-4二甲胺基易发生差向异构化,失活57最新课件PH=2-6差向异枸化（C4-N；由α→βPH＞7成内酯（C环，C6-OH；C11=O）3)OH-下C环开裂,失活58最新课件PH＞7成内酯（C环，C6-OH；C11=O）3)OH-五、临床用缺点：耐药性严重吸收不好，血药浓度低影响骨骼生长孕妇及儿童为何不可用四环素：牙齿变黄、骨骼生长抑制4)和金属离子的反应含OH、C=O、=C-OH等基团，可与Mn+生成不溶性螯合物,如成Ca、Mg、Fe盐等,生成不同色59最新课件五、临床用缺点：耐药性严重孕妇及儿童为何不可用四环素：牙齿变2.降解反应（1）酸性下降解λmax=445nmλmax=435nm橙黄色60最新课件2.降解反应（1）酸性下降解λmax=445nmλmax脱水四环素61最新课件脱水四环素61最新课件～～TCETCATCEATC＜＜62最新课件～～TCETCATCEATC＜＜62最新课件63最新课件63最新课件二、

鉴别试验H2SO4反应（一）64最新课件二、鉴别试验H2SO4反应（一）64最新课件（三）1mol/L盐酸-甲醇（1→100）0.01mg/mlUV法（二）（三）荧光法UV绿色荧光H+UV65最新课件（三）1mol/L盐酸-甲醇（1→100）UV法（二）（三）TLC法（四）HPLC法（五）EDTA克服痕量金属造成的拖尾现象（六）IR法硅藻土做载体66最新课件TLC法（四）HPLC法（五）EDTA克服痕量金属三、检查有关物质（一）HPLC法自身稀释对照法盐酸四环素67最新课件三、检查有关物质（一）HPLC法自身稀释对照法盐吸收度（二）68最新课件吸收度（二）68最新课件杂质吸收度69最新课件杂质吸收度69最新课件四、含量测定HPLC法（外标法）70最新课件四、含量测定HPLC法（外标法）70最新课件第五节抗生素类药物中高分子杂质的检查1.高分子杂质分子量大于药物本身的杂质总称。71最新课件第五节抗生素类药物中高分子1.高分子杂质71最新蛋白、多肽、多糖或抗生素与蛋白、多肽、多糖的结合物。主要来自于发酵工艺，致敏，如青霉噻唑蛋白、青霉噻唑多肽。

药物的自身聚合物，来自于生产、贮存过程。可引发过敏。

外源性杂质内源性杂质72最新课件蛋白、多肽、多糖或抗生素与蛋白、多肽、73最新课件73最新课件74最新课件74最新课件75最新课件75最新课件

3.高分子杂质的质控方法

（1）凝胶色谱法测定高分子杂质：使高分子杂质与药物分离。

（2）高分子杂质的控制方法---自身对照外标法原理：测定在Kav=0处药物缔合物的峰响应指标

样品中高分子杂质的响应指标

按外标法计算，得样品中高分子杂质相当于药物本身的相对含量。

76最新课件3.高分子杂质的质控方法

（1）凝胶色谱法测定高分子杂质：（3）高分子杂质的分析方法

简单测定系统：葡聚糖凝胶G-10（40～

120μm）柱.

HPLC系统:葡聚糖凝胶G-10柱.

77最新课件（3）高分子杂质的分析方法

简单测定系统：葡聚糖凝胶G-102、链霉素毒性杂质:

链霉胍,链胍双氢链糖;双氢链霉素;链霉素醛基结合物;

神经毒性：二链霉胺二链霉胺含量测定原理:二链霉胺等不被KBH4还原，能与盐酸氨基脲反应，生成的缩氨脲在233nm有吸收峰78最新课件2、链霉素78最新课件3、土霉素脱水土霉素、差向土霉素、α-阿扑土霉素、β-阿扑土霉素等降解产物薄层分离，荧光测定4、四环素脱水四环素、差向四环素、差向脱水四环素

HPLC测定79最新课件3、土霉素79最新课件感谢亲观看此幻灯片，此课件部分内容来源于网络，如有侵权请及时联系我们删除，谢谢配合！80感谢亲观看此幻灯片，此课件部分内容来源于网络，80感谢亲观看此幻灯片，此课件部分内容来源于网络，如有侵权请及时联系我们删除，谢谢配合！81感谢亲观看此幻灯片，此课件部分内容来源于网络，81第八章抗生素类药物的分析（Antibiotics）82最新课件第八章抗生素类药物的分析1最新课件第一节：概述1、定义：抗生素是某些微生物的代谢产物或合成的类似物，在小剂量的情况下能抑制微生物的生长和存活，而对宿主不会产生严重的毒性。2、特点：由生物体产生或人工合成化学纯度低结构、组成复杂对他种生物体有抑制作用3、名称演变：抗生素——抗菌素——抗生素

60-70年80年后83最新课件第一节：概述1、定义：抗生素是某些微生物的代谢产物或合成2、一、抗生素类药物一般检查项目：

①鉴别试验:用化学法、物理化学法以及生物学法来确认是哪种抗生素②毒性试验:控制药品中的毒性物质③无菌试验:检查药品中有无杂菌污染④热源试验:控制药品中的致热物质84最新课件一、抗生素类药物一般检查项目：3最新课件

⑤水分测定:控制水分含量⑥溶液澄明度检查:检查不溶性物质⑦

溶液pH试验:测定pH⑧降压试验:检查有降压作用的杂质⑨

效价测定:有效成分测定85最新课件⑤水分测定:控制水分含量4最新课件抗生素药品分析常用的方法：物理方法:旋光法、紫外、红外、色谱等化学方法（专属性不强）：功能团反应，鉴别和含量的测定。容量分析法：酸碱滴定（青霉素含量测定）和碘量法。生物学方法：酶反应、微生物法测定效价86最新课件抗生素药品分析常用的方法：物理方法:旋光法、紫外、红外、色谱第二节抗生素类药物的鉴别鉴别方法：理化方法生物学法：微生物法

官能团显色：β–内酰胺环光谱法：UV、IR色谱法:TLC、HPLC87最新课件第二节抗生素类药物的鉴别鉴别方法：理化方法官能团显色：根据化学结构分类：β–内酰胺类抗生素：青霉素、头孢菌素氨基糖苷类：链霉素、庆大霉素四环素类：四环素、金霉素大环内酯类：红霉素、麦迪霉素多稀大环类：两性霉素Ｂ多肽类：多粘菌素苯烃胺类：氯霉素蒽环类：阿霉素其他：

抗生素类药物的分类

88最新课件根据化学结构分类：抗生素类药物的分类7最新课件第二节β-内酰胺抗生素

(β-LactamAntibiotics)

89最新课件第二节β-内酰胺抗生素

(β-LactamAntibi一、β-内酰胺抗生素的结构特征★指分子中含有由四个原子组成β-内酰胺环★是该类抗生素发挥生物活性的必需基团★和细菌作用时，内酰胺环开环与细菌发生酰化作用抑制细菌的生长。★因β-内酰胺由四个原子组成，分子张力较大，化学性质不稳定易发生开环导致失活。90最新课件一、β-内酰胺抗生素的结构特征★指分子中含有由四个原子组成β二、分类：经典结构药物青霉素类(Penicillins)头孢菌素(Cephalosporins)91最新课件二、分类：经典结构药物青霉素类(Penicillins)头孢碳青霉烯(Carbapenem)青霉烯(Penem)单环的β-内酰胺(Monobactam)氧青霉烷(Oxypenam)亚胺培南（泰能）克拉维酸氨曲南分类：非典型结构药物92最新课件碳青霉烯(Carbapenem)青霉烯(Penem)单环的β性质1：酸性分子中游离羧基具有相当强的酸性，能与无机碱或某些有机碱形成盐。其碱金属盐易溶于水，而有机碱盐难溶于水，易溶于甲醇等有机溶剂。93最新课件性质1：酸性分子中游离羧基具有相当强的酸性，能与无机碱或某性质2：旋光性青霉素族分子中含有三个手性碳原子，头孢菌素族含有两个手性碳原子，故都具有旋光性。根据此性质，可用于定性和定量分析。﹡﹡﹡﹡﹡94最新课件性质2：旋光性青霉素族分子中含有三个手性碳原子，头孢菌素族

性质3：紫外吸收特性2、头孢菌素类

母核有共轭体系

1、青霉素类母核无明显UV

多数有苯环取代基

95最新课件性质3：紫外吸收特性2、头孢菌素类母核有共轭体性质4：不稳定性

干燥条件下青霉素盐稳定。青霉素水溶液在pH6-6.8时较稳定。β-内酰胺环是该类抗生素结构最不稳定的部分。四元环张力大

酰胺键易水解不稳定性因素（某些金属离子）（温度）某些氧化剂、羟胺96最新课件性质4：不稳定性

干燥条件下青霉素盐稳定。青霉素水溶液例青霉素的降解反应青霉素青霉噻唑酸H2O/OHˉ青霉素酶青霉酸H2OpH2100℃α–青霉噻唑酰基羟胺酸NH2OH青霉烯酸pH4青霉胺CO2青霉醛HgCl2例97最新课件例青霉素的降解反应青霉素青霉噻唑酸H2O/OHˉ青霉素酶青霉（一）色谱法1、TLC法对照品对照法2、HPLC法和斑点颜色比较供试品对照品相同条件fR¾¾¾®¾Rt比较供试品对照品相同条件¾¾¾®¾二、鉴别试验98最新课件（一）色谱法1、TLC法对照品对照法2、HPLC法和斑点颜色

头孢氨苄

λmax=262nm青霉素V钠

A280nm/A264nm

=1.30～1.50A,Emin,max,,%cm11λ光谱图λ2．紫外分光光度法(UV)（二）光谱法1、IR法99最新课件头孢氨苄λmax=262nm100最新课件19最新课件2、IR法3180cm-1酰胺N-H1780cm-1β–内酰胺C=O3470cm-1酚羟基O-H1690cm-1仲酰胺C=O1250cm-1酚羟基C-O以阿莫西林为例101最新课件2、IR法3180cm-11780cm-13470cm-11β-内酰胺环酰胺115251680-=cm、VOC117501800-=cm~VOCNHV=13300-cmCOOHV-114101600-cm、羧基102最新课件β-内酰胺环酰胺115251680-=cm、VOC11750（三）茚三酮反应某些具有α-氨基的本类药物，如氨苄西林，遇茚三酮即显蓝紫色。

△103最新课件（三）茚三酮反应某些具有α-氨基的本类药物，如氨苄西林，遇茚α-氨基、伯胺某些羟基胺类酮式烯醇式茚三酮茚三酮缩合蓝紫色104最新课件α-氨基、伯胺酮式烯醇式茚三酮茚三酮缩合蓝紫色23最新课件（四）各种盐的反应

青霉素族、头孢菌素族药品中，许多制成钾盐或钠盐供临床使用，因而可利用其火焰反应进行鉴别。1.火焰反应105最新课件（四）各种盐的反应青霉素族、头孢菌素族药品中，许多制三、特殊杂质的检查

本类抗生素的特殊杂质主要有高分子聚合物、有关物质、异构体等，一般采用HPLC法控制其限量，也有采用测定杂质的吸收度来控制杂质量的。106最新课件三、特殊杂质的检查本类抗生素的特殊杂质主要有高分子聚

（二）有关物质和异构体

例：头孢氨苄中有关物质的检查（反相HPLC法）取本品，流动相，成0.4mg/ml，得供试液供试液，流动相，成4ug/ml，得对照液①②对照品，流动相，成4ug/ml，得杂质对照液

杂质①②，外标法。其他杂质，主成分自身对照法。头孢氨苄以青霉素钾为原料，经氧化、扩环、裂解得7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸（7-ADCA）①，再与侧链a-苯甘氨酸②缩合而成。这两种原料有可能成为主要杂质。107最新课件（二）有关物质和异构体26最新课件

（三）杂质吸收度的检查例：青霉素钠（钾）

取本品，加水，成1.80mg/ml。A280nm[控制杂质]不得大于0.10，A264nm

[控制青霉素钠（钾）的含量]应为0.80-0.88。108最新课件（三）杂质吸收度的检查27最新课件（四）有机溶剂氨苄西林钠：CH2Cl2GC头孢哌酮：丙酮GC头孢他啶：吡啶HPLC

109最新课件（四）有机溶剂氨苄西林钠：CH2Cl2GC28最新课件四、含量测定青霉族和头孢菌素族的含量测定大多采用理化测定方法中的HPLC法内标法＋校正因子外标法特点

快速、高效、灵敏专属性强、重现性好一法多用（鉴别、检查、含测）110最新课件四、含量测定青霉族和头孢菌素族的含量测定大多采用理化测定方法哌拉西宁原料药含量测定色谱条件

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇–0.2mol/L磷酸二氢钠溶液–10％氢氧化四乙基铵溶液–水（400︰50︰3︰547）用磷酸调节pH值至5.5为流动相。检测波长为254nm。111最新课件哌拉西宁原料药含量测定30最新课件二氨基糖苷类抗生素链霉素双氢链霉素新霉素卡那霉素庆大霉素巴龙霉素112最新课件二氨基糖苷类抗生素链霉素双氢链霉素3链霉素链霉胍+链霉糖+N-甲基-L-葡萄糖胺

苷元链霉双糖胺链霉糖N-甲基-L-葡萄糖胺链霉胍113最新课件链霉素链霉胍+链霉糖+N-甲基-L-葡萄糖胺庆大霉素

糖

苷元绛红糖胺+脱氧链霉胺+加洛糖胺

糖

绛红糖胺紫素胺2-脱氧链霉胺加洛糖胺N-甲基-3-去氧-4-甲基戊糖胺114最新课件庆大霉素糖苷元绛红糖胺+脱氧链霉胺+庆大霉素C复合物庆大霉素C1R=HR1、R2=CH3

庆大霉素C2R=R2=H

R1=CH3

庆大霉素C1aR、R1、R2=H

庆大霉素C2aR=CH3R1=R2=H

庆大霉素C2bR=R1=HR2=CH3115最新课件庆大霉素C复合物34最新课件一、结构与性质多与硫酸成盐链霉素3个庆大霉素5个碱性中心（一）碱性水溶性（二）溶解性（三）

UV（四）苷的水解与稳定性链霉素pH5～7.5庆大霉素pH2～12

稳定链霉素在230nm处有吸收，庆大霉素、奈替米星无116最新课件一、结构与性质多与硫酸成盐链霉素3个庆大霉素坂口反应N-甲基葡萄糖胺反应麦芽酚反应117最新课件坂口反应N-甲基葡萄麦芽酚反应36最新课件二、鉴别

茚三酮反应（一）△羟基胺结构硫酸庆大霉素鉴别(1)取本品约5mg，加水1ml溶解后，加0.1％茚三酮的水饱和正丁醇溶液1ml与吡啶

0.5ml，在水浴中加热5分钟，即显紫蓝色。

118最新课件二、鉴别茚三酮反应（一）△羟基胺结构硫酸庆（二）Molisch反应

具五碳或六碳糖的氨基糖苷类抗生素经酸水解后，在盐酸（或硫酸）作用下脱水生成糠醛或羟甲基糠醛。这些产物遇α-萘酚或蒽酮呈色。红紫色119最新课件（二）Molisch反应具五碳或六碳糖的氨基糖蒽酮呈色原理：蓝紫色阿米卡星鉴别(1)取本品约10mg，加水1ml溶解后，加0.1％蒽酮的硫酸溶液4ml，即显蓝紫色。

120最新课件蒽酮呈色原理：蓝紫色阿米卡星鉴别39最新课件N-甲基葡萄糖胺反应（三）乙酰丙酮OH-吡咯衍生物对二甲氨基苯甲醛H+红色（Elson-Morgan反应）H+121最新课件N-甲基葡萄糖胺反应（三）乙酰丙酮OH-吡咯衍生物对二甲氨基

麦芽酚反应（四）

链霉糖特有反应H+分子重排扩环122最新课件麦芽酚反应（四）链霉糖特有反应H+分子重排扩环紫红麦芽酚123最新课件紫红麦芽酚42最新课件链霉胍特有反应（或α-萘酚）8-羟基喹啉坂口反应（五）α-萘酚124最新课件链霉胍特有反应（或α-萘酚）8-羟基喹啉坂口反应（五）α-（六）反应H+光谱法（八）庆大霉素无UV吸收色谱法（七）125最新课件（六）反应H+光谱法（八）庆大霉素无UV吸收色谱法（七）44三、检查链霉素杂质（一）链霉素B（甘露糖链霉素）方法TLC中的对照品法（BP）1.来源反应中间体126最新课件三、检查链霉素杂质（一）链霉素B（甘露糖链霉素）对微生物的活性无明显差异毒副作用和耐药性不同发酵菌种不同工艺差别C组分比例不一致规定控制各组分的相对百分含量HPLCChPUSPBPJP庆大霉素C组分的测定（二）127最新课件对微生物的活性无明显差异毒副作用和耐药性不同发酵菌种不同C组λmax=330nm1.衍生化原理

1-烷基硫代-2-烷基异吲哚衍生物128最新课件λmax=330nm1.衍生化原理1-烷基硫代-2-烷RP－HPLC方法2.规定C125~50%C1a15~40%C2a+C220~50%计算3.峰面积归一化法129最新课件RP－HPLC方法2.规定C1130最新课件49最新课件四、

含量测定链霉素、庆大霉素微生物检定法

本法系利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用量反应平行线原理的设计，比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小，以测定供试品效价的一种方法。131最新课件四、含量测定链霉素、庆大霉素微生物检定法50最新离子交换色谱法离子对色谱法RP-HPLC法HPLC法132最新课件离子交换色谱法HPLC法51最新课件第四节四环素类抗生素(TetracyclineAntibiotics)133最新课件第四节四环素类抗生素(TetracyclineAnti苯并蒽环结构,C-4为α结构,是由放线菌产生的,天然有

一、天然四环素结构特点ABCD4R1R2R3R4四环素HOHCH3H53年得到土霉素OHOHCH3H50年得到金霉素HOHCH3Cl48年得到134最新课件苯并蒽环结构,C-4为α结构,是由放线菌产生的,天然有二、作用：广谱抗生素，G+、G-、部分立克次体、病毒、原虫等近年来四环素类抗生素新药开发不理想三、作用机制:干扰细菌蛋白质的生物合成与细菌中的Mn+形成金属离子络合物135最新课件二、作用：广谱抗生素，G+、G-、部分立克近年来四环素类抗生四、理化性质：黄色结晶性粉末1、酸碱两性：Ar10-OH、=C3-OH为酸性

C4–N=为碱性。可溶酸碱临床用其碱，成HCl盐136最新课件四、理化性质：黄色结晶性粉末1、酸碱两性：Ar10-OH、=2、稳定性：PH=2脱水产物（C6-OH；C5α-H）1)在酸性条件下发生消除反应,失活137最新课件2、稳定性：PH=2脱水产物（C6-OH；C5α-H）1)在PH=2-6差向异枸化（C4-N；由α→β）难易：土（氢键）＞四＞金（位阻）2)pH2-6,C-4二甲胺基易发生差向异构化,失活138最新课件PH=2-6差向异枸化（C4-N；由α→βPH＞7成内酯（C环，C6-OH；C11=O）3)OH-下C环开裂,失活139最新课件PH＞7成内酯（C环，C6-OH；C11=O）3)OH-五、临床用缺点：耐药性严重吸收不好，血药浓度低影响骨骼生长孕妇及儿童为何不可用四环素：牙齿变黄、骨骼生长抑制4)