实验室生物安全标准操作规程

实验室生物安全标准操作规程HYEY-PGC-2016（第三版）2016年1月11日宣布2016年1月20日实行怀远县第二人民医院实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC-2016校正表

第1页共1页第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日实行校正表版号规程号校正序次校正内容赞同日期实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC-2016第1页共1页目录第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日实行目录HYEY-PGC01-2016实验室人员出入实验室HYEY-PGC02-2016实验室检测样品收集HYEY-PGC03-2016实验室检测样品包装和运送HYEY-PGC04-2016实验室检测样品接收HYEY-PGC05-2016样品检测操作规程HYEY-PGC06-2016电气设备操作规程HYEY-PGC07-2016实验室消毒剂配制标准操作规程HYEY-PGC08-2016无菌间使用标准操作规程HYEY-PGC09-2016实验室荒弃物办理标准操作规程HYEY-PGC10-2016实验室消毒标准操作程序HYEY-PGC11-2016实验室不测事故办理实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC01-2016第1页共1页查验科实验室人员出入实验室第3版第0次校正201年1月11日宣布/1月20日实行目的制定查验科实验室人员出入的标准操作程序，保障实验室生物安全。合用范围合用于查验科实验室人员出入程序。职责实验室工作人员履行本程序的规定。实验室负责人负责督查履行。规程要求进入程序实验室人员需将外衣挂入（防范将外衣与工作服混放），穿上工作服，按要求戴手套、口罩等防范用品方可进入实验室。退出程序工作结束后，实验室人员在实验室将一次性口罩、手套、鞋套等放入指定容器。先用%新洁尔灭敌手进行消毒，再用消毒肥皂洗手。在指定地区脱下工作服，必要时进行紫外消毒。实验室人员退出实验室后，必然将实验室入口门关好，方可走开实验室。实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC02-2016第1页共4页实验室检测样品收集第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日实行目的为保障检测实验的顺利进行，规范采样程序，防范病原微生物在实验室采样过程中产生污染。合用范围合用于实验室内收集、办理动物样品。职责收集检测样品的工作人员在收集过程中应该防范病原扩散，并对样本的根源、收集过程和办理方法等作详尽记录。查验人员必然严格依据本操作规程操作，不能够私自做出超出本规程的操作，所有实验人员对所从事的工作负相应的责任。过程要求工作条件拥有收集、办理样品所需要的生物安全防范设备；拥有掌握有关专业知识和操作技术的工作人员；拥有有效的防范病原扩散的举措；拥有保证检测样质量量的技术方法和手段。实验资料准备灭菌的解剖器械（剪刀、镊子、手术刀、大刀、斧优等）、灭菌试管、平皿或自封袋、载玻片、棉签、营养肉汤、30%、50%甘油盐水缓冲液、加抗生素的PBS（病毒保留液）、50％甘油磷酸盐缓冲液、酒精灯、灭菌注射器、15mL的离心管、管、记号笔、署名笔、防范服、无粉乳胶手套、防范口罩、铅笔、空白标签纸、胶布、75%酒精棉球、碘酒棉球、冰袋、冷藏容器、消毒药品、采样单等。活畜样品的收集血清样品的收集实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC03-2016第2页共4页实验室检测样品收集第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日实行采血方法对采血部位的皮肤先剃（拔）毛，碘酊消毒，75%的酒精消毒，待干燥后采血。采血方法实行生猪站立式前腔静脉、牛羊站立式颈静脉、禽类翅静脉采血，采血过程严格无菌。采血数量单调病种抗体监测的每头（只）收集2～3mL全血，多病种抗体检测的每头（只）收集5～10mL全血。全血保留收集好的全血转入盛血试管，斜面寄存，室温凝结后直接放在盛有冰块的保温箱，送实验室。从全血采出到血清分出的时间不超出10h。血清分别凝结全血在室温2～4h后，有血清析出时，用无菌针剥离血凝块，此后放入4℃冰箱4～8h后，待大量血清析出时，吸出血清。必要时经离心计3000rpm、30min离心，吸出血清。分其他血清，一般不加防腐剂。血清若在1～2周内即可查验，可放4℃冰箱内保留；假如保留时间较长，应放在-20℃～-80℃冰箱内保留。运送血清时可将血清放在盛有冰块的保温箱中运送。全血样品的收集全血收集后应直接注入盛有抗凝剂的试管中，马上摇动，充分混淆。也可将全血液注入盛有玻璃珠的灭菌瓶中，马上连续振荡脱纤维蛋白。活禽样品的收集咽喉拭子的收集：将棉签插入喉头口及上颚裂处往返刮3～5次取咽喉分泌液，泄殖腔拭子的收集：将棉签插入取泄殖腔转2～3圈并沾取少量粪便，再将咽喉拭子、泄殖腔拭子一并放入盛有～加有抗生素PBS的EP管中，加盖，编号。病死（屠宰）畜禽样品的收集解剖前检查实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC03-2016第3页共4页实验室检测样品收集第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日实行急性死亡的牛、羊、猪、马等动物，解剖以前应作临床检查，疑似炭疽病的应采血、镜检，除去炭疽病时，方可解剖。动物死亡后应在6h内进行剖检。解剖人员要做好自我防范工作。肝、脾、肾、淋奉承、肺和牛、马心脏样品的收集3在肝、脾、肾、淋奉承、肺和牛、马心脏有病变的部位各采用2～3cm的小方块，分别置于灭菌的试管或平皿中。其他畜禽收集整个心脏，置于自封袋中。细菌分别样品的收集可用烧红的刀片烫烙脏器表面，在烧烙部位刺一孔，用灭菌后的铂金耳伸入孔内，取少量组织或液体，作涂片镜检或划线接种于合适的培养基上。脑、脊髓样品的收集3取脑、脊髓2～3cm浸入50%甘油盐水中或将整个头部（猪、牛、马除外）割下，用消毒纱布包裹，置于不漏水的容器中。肠、肠内容物及粪便样品的收集肠样品的收集：选择病变最严重的部分，将其中的内容物弃去，用灭菌的生理盐水轻轻冲刷后，置于试管中。肠内容物样品的收集：烧烙肠壁表面，用吸管扎穿肠壁，从肠腔内吸取肠内容物，放入盛有30%甘油盐水中或许直接将带有粪便的肠管两头结扎，从两头剪断。粪便样品的收集：用棉签插到直肠黏膜表面收集粪便，此后将拭子放入盛有30%甘油盐水中。液体病料样品的收集收集胆汁、脓、粘液、关节液、水泡液等样品时，用药物或烫烙法消毒采样部位，用灭菌吸管（毛细吸管、注射器）经消毒部位插入，吸取内部液体，此后将病料注入灭菌试管中，加盖。也可用接种环经消毒部位插入，提取病料直接接种在培养基上。胎儿样品的收集取流产后的整个胎儿，装入自封袋或不透水塑料薄膜中。皮肤样品的收集用清水冲刷病变皮肤后，取病变皮肤3～5g放入灭菌小瓶中，加合适50％甘油磷实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC03-2016第4页共4页实验室检测样品收集第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日实行酸盐缓冲液，加盖密封。死（屠宰）禽样品的收集死（屠宰）禽样品的收集除按上述方法收集，也可将整个死禽装入不透水塑料薄膜袋或自封袋中或其他容器内。组织样品收集完后的无害化办理活畜禽、病死畜禽组织样品收集完后，应做好样品外包装和环境消毒以及病死畜禽及其产品的无害化办理。样品编号、抽样单填写样品编号每头动物的不同样部位的组织样品应独自包装。包装好后，在样品袋或平皿外贴上标签，标签注明样品名、样品编号、采样日期等。收集好不同样部位的样品后，同一动物的样品集中包装。采样单填写可依据详尽要求填写。实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC03-2016第1页共2页实验室检测样品包装和运送第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日实行目的保护检测样品的质量，防范病原的泄露和扩散，保障样品检测的顺利睁开。合用范围合用于检测样品的包装和运送。职责操作者必然严格依据本程序操作，不能够私自做出超出本程序的操作，所有实验人员对所从事的工作负相应的责任。实验室负责人负有对样品包装、运输的督查和管理职责，并督查检查有关工作人员的安全工作程序和行为。过程要求拟运输的样品，要求严实包装，表面加以消毒，编号、登记后，贴上“生物危险”表记，并严防表记零落。样品必然经三层包装。样品的包装内包装必然是不透水、防泄露的主容器，保证圆满密封。必然是结实、不透水和防泄露的协助包装。必然在主容器和协助包装之间填充吸附资料。吸附资料必然充分，能够吸取所有的内装物。多个主容器装入一个协助包装时，必然将它们分别包装。主容器的表面贴上标签，注明样品种类、编号、名称、数量等信息。有关文件，比方毒种或样本数量表格、危险性声明、信函、毒种或样本判断资料、发送者和接收者的信息等应该放入一个防水袋中，并贴在协助包装的外面。外包装外包装的强度应该充分知足关于其容器、重量及预期使用方式的要求。外包装应该印上生物危险表记。实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC03-2016第2页共2页实验室检测样品包装和运送第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日实行包装要求液体或许固体样品在协助包装周围必然放置冰、干冰或许其他冷冻剂，或许依据规定将冷冻剂放在由一个也好多个圆满包装件组成的合成包装件中，内部要有支撑物，干冰或许干冰耗费掉此后，还能够把协助包装固定在原地点上。假如使用冰，包装必然不透水；假如使用干冰，外包装必然能排出二氧化碳气体；假如使用冷冻剂，主容器和协助包装必然保持优秀的性能，在冷冻剂耗费完此后，还能够承受运输中的温度和压力。冻干样品主容器必然是火焰封口的玻璃安瓿或许是用金属封口的胶塞玻璃瓶。在协助包装周围还必然放置冰、干冰或许其他冷冻剂。实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC04-2016第1页共1页实验室检测样品接收第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日实行目的规范接收检测样品，保证生物安全。合用范围合用于送检样品的交接收理。职责专人负责接收样品和接样的生物安全。过程要求检测样品由专人接收，在接收送检样品时应作好样品登记，填写《样品接收登记表》,并对样品进行符合性检查，检查包括：样品包装、标志及外观能否圆满；比较抽样单核查样品的名称、采样地点、样品数量、性状等信息；样品能否损坏、污染或已过有效期。接样人进行样品登记、保留后，报告实验室负责人安排检测工作。查验后的节余样品，由样品保留人负责保留。实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC05-2016第1页共1页样品检测操作规程第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日实行目的为规范样品的检测，特制定本规程。合用范围合用不同样待检样品的检测。职责实验室工作人员严格依据本规程进行样品的检测。实验室负责人负责督查实验室工作人员样品的检测工作。过程要求样品的检测方法应采用《作业指导书-检测标准》（GTCADC-ZYBZ-2016）规定的方法。有关文件《作业指导书-检测标准》（GTCADC-ZYBZ-2016）实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC06-2016电气设备操作规程目的

第1页共1页第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日实行为规范实验室电气设备的使用和保护，特制定本规程。合用范围合用于电气设备的操作和保护。职责实验室工作人员严格依据本规程进履行用电气设备。过程要求实验室工作人员必然熟悉仪器的性能、用途、使用方法，严格依听闻明书使用，恪守仪器操作规程。仪器使用过程中发生故障必然马上停止使用，并报告实验室负责人，实时查找原因，赶快除去，并登记。使用完成必然对使用过的仪器设备按有关要求去除污染，以减少污染风险。有关文件《作业指导书-仪器设备操作规程》(GTCADC-ZYGC-2016)实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC07-2016实验室消毒剂配制标准操作规程目的

第1页共2页第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日实行规范实验室消毒剂配制，保证消毒液的有效性和实验室生物安全。2．合用范围合用于查验科实验室常用消毒剂的配制。3．职责实验室工作人员负责常用消毒剂的配制。4．过程要求消毒剂配制配制前，实验室工作人员应洗净配制容器及量具，自然晾干。按试剂配制的配方和配质量量取所需药品。按配制要求的先后序次加入药品，搅拌平均配制试剂。配制过程产热的试剂待自然冷却后分装，并将填写好品名、浓度、配制时间、有效期的标签贴于盛装容器上。做好配制记录。常用消毒剂的配方及注意事项见下表1。实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC07-2016第2页共2页实验室消毒剂配制标准操作规程第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日实行表1常用消毒剂种类和配制方法表消毒剂名称用途配制方法备注%新洁尔灭手消毒，仪器表面消量取5%新洁尔灭溶液100mL置于配制容器中，加入2400mL纯化水搅拌混匀。毒等2%NaOH溶液称取20gNaOH固体，迟缓加入纯化水定容到强碱pH值大原位消毒1000mL。于1375%乙醇手表面消毒取750mL无水乙醇加纯化水定容到1000mL。配制好的过氧乙酸需室冰醋酸∶H2O2∶浓H2SO4按体积比∶∶配制。根温放置48h后15%~18%过氧乙酸实验室薰蒸消毒据需要量分别量取所需的过氧化氢、冰醋酸和使用。超出浓硫酸。置于配制容器中搅拌平均。使用时可20%的过氧乙加入催化剂高锰酸钾或加热。酸会发生爆炸。一周内用完。实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC08-2016第1页共2页无菌间使用标准操作规程第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日实行目的保证无菌室环境的无菌状态。合用范围合用于无菌间空气微生物监测。职责实验室工作人员负责实验室空气微生物监测和实行。过程要求实验室工作人员在进无菌间以前，应先用2%石碳酸或来苏尔敌手进行浸泡消毒。缓冲间在每次使用前，应先翻开紫外灯，紫外照射30min；工作人员在进入无菌室前，必然于缓冲间内改换消毒过的工作服、工作帽及工作鞋。查验用的有关器械（待检品除外），搬入无菌室前必然分别进行灭菌消毒。将无菌间和生物安全柜的紫外灯翻开照射30min后，才能进行工作。实验完成后，用%新洁尔灭消毒液擦拭生物安全柜台面，翻开生物安全柜内紫外灯，照射30min。同时无菌间缓和冲间的紫外灯一并翻开，照射30min。工作人员在缓冲间脱下工作服、工作帽及工作鞋。合时对付无菌间进行熏蒸消毒。每个月对付无菌间进行一次无菌检查记录营养琼脂平板的制备按营养琼脂说明书配制营养琼脂，120℃15min高压灭菌后，冷却到50℃左右倾倒于9cm的平板。待琼脂凝结后，放37℃48h培养，无菌生长，方能够使用。沉降菌数测定先翻开无菌室内紫外灯照射30min后，将备妥的营养琼脂平板5个。以无菌方式移入操作间，置四个角落和中央各1个，开盖，裸露30分钟后将盖盖上。在37℃培养箱内倒置培养48h，取出检查。分别数出5个平板的生长菌落数并得出5个平板的平均菌落数。实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC08-2016第2页共2页无菌间使用标准操作规程第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日实行结果判断无菌室内的洁净级别应达到10000级，即在进行沉降菌数测准时，平均菌落数应小于或等于3个（φ90mm，）。如所测得的平均菌落数小于3个，则证明该无菌室无菌程度符合要求，否则该无菌室的无菌程度不符合要求，需要对无菌间进行完整消毒，直至重复检查符合要求为止。实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC09-2016第1页共2页实验室荒弃物办理标准操作规程第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日实行目的制定实验室荒弃物安全办理操作规程，保障实验室生物安全。合用范围合用于实验室荒弃物的办理。职责实验室工作人员严格恪守本规程，并对所从事的工作负有生物安全责任。实验室负责人负有督查和管理责任。过程要求实验室工作人员做好个人防范。穿好工作服、戴妙手套、口罩和帽子等。实验室荒弃物使用防渗专用包装容器（袋）或许防锐器穿透密闭容器收集，实时进行无害化办理，并做好实验室荒弃物办理记录。荒弃物分类办理感染性荒弃物办理培养基、标本和菌（毒）种保留液、血液、血清、临床标本等感染性荒弃物须进行压力蒸汽灭菌。用过的一次性实验用品（包括手套、口罩、帽子等）及试管、吸管、移液器吸优等感染性荒弃物可进行压力蒸汽灭菌或消毒液浸泡24h。伤害性荒弃物办理针头、缝合针、解剖刀、手术刀、备皮刀、手术锯，试验玻片、玻璃试管、玻璃安瓿等能够刺伤或割伤人体的荒弃的实验利（锐）器等伤害性荒弃物需放入符合要求的利器盒里，容器装满3/4后封盖，进行高压蒸汽灭菌办理。药物性荒弃物办理过期、裁汰、变质或许被污染的诊疗试剂可采用压力蒸汽灭菌办理。病理性荒弃物办理动物组织及动物尸体使用两层防渗专用包装容器（袋）包装好（外包装进行完整的消毒办理），按要求进行燃烧、深埋或送往无害化办理场办理。做好荒弃物处实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC09-2016第2页共2页实验室荒弃物办理标准操作规程第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日实行理记录。化学品荒弃按组分收集后，倒入专用化学荒弃物收集桶内，集中办理。实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC10-2016第1页共1页实验室消毒标准操作规程第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日实行目的保护实验室的生物安全，防范病原逃逸。合用范围实验室平常洁净，实验过程中产生的污染荒弃物、使用过的防范装备及设备设备等的消毒。3职责实验室工作人员依据本标准进行平常消毒。4过程要求仪器设备表面：用%新洁尔或%～%有效氯消毒液擦拭，30min后再用洁净的湿抹布擦拭2次。荒弃的病毒资料和操作过程中使用的一次性耗材先置于

2%NaOH溶液浸泡

2h，依据废弃物的办理程序办理。生物安全柜台面：用

%新洁尔、%～%有效氯等消毒液浸润的无纺抹布擦拭，

30min后再用洁净的湿抹布擦拭

2次。使用生物安全柜前后，要用紫外线照射消毒

30min。个人防范装备：工作鞋、橡胶手套可用%～%有效氯消毒液浸泡2h，工作衣帽和口罩高温高压消毒后冲刷。手消毒：用75%乙醇进行消毒。地面及墙壁：用%～%有效氯消毒液浸润的抹布擦拭，30min