低密度脂蛋白胆固醇试剂盒企业标准

医疗器械产品企业标准（建议稿）低密度脂蛋白胆固醇试剂盒LowDensityLipoproteinCholesterolReagentKit直接测定法DIRECTMETHOD2005-02-27发布 深圳市德朝电子技术有限公司发布前言低密度脂蛋白胆固醇试剂盒目前无国家标准和行业标准，本公司制定本标准作为组织生产、质量检定和营销活动的依据。本标准的编写格式按照GB/T1.1-2000《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则》、GB/T1.2-2002《标准化工作导则第2部分：标准中规范性技术要素内容的确定方法》。本标准自2005年本标准由深圳市德朝电子技术有限公司质量部提出并起草。本标准起草单位：深圳市德朝电子技术有限公司。本标准主要起草人：

低密度脂蛋白胆固醇试剂盒1、范围本标准规定了低密度脂蛋白胆固醇试剂盒的要求、试验方法、检验规则、标志、标签、使用说明书、包装、运输及贮存等要求。本标准适用于体外定量检测人血清中低密度脂蛋白胆固醇的浓度。本产品适用于各种类型的半自动、全自动临床生化分析仪。2、规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB191-2000 包装储运图示标志GB9969.1-1998 工业产品使用说明书总则3、试剂组成组成组分包装规格R1MOPS缓冲液R145mL，R215mL胆固醇氧化酶R12×45mL，R230mL胆固醇酯酶R13×50mL，R22×25mL过氧化物酶R12×60mL，R240mL非离子表面活性剂R14×60mL，R22×40mL高分子化合物4－氨基安替比林R2MOPS缓冲液DSBmT非离子表面活性剂4、方法原理样本中的低密度脂蛋白胆固醇在试剂中表面活性剂的作用下被胆固醇脂酶选择性地催化水解为胆固醇和游离脂肪酸，生成的胆固醇经胆固醇氧化酶氧化生成胆甾-4-烯-3-酮和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的催化下与苯胺类色原物质和4-氨基安替比林作用产生水和醌亚胺色素，醌亚胺色素的生成量与样本中低密度脂蛋白胆固醇的含量成正比，通过测定特定波长处反应最终生成的色素量，可以计算出样本中低密度脂蛋白胆固醇的浓度。低密度脂蛋白胆固醇脂＋H2O胆固醇＋游离脂肪酸胆固醇+O2＋胆甾-4-烯-3-酮＋H2O2H2O2+4-氨基安替比林+苯胺类色原物质醌亚胺色素+水5、技术要求5.1、外观液体双试剂试剂1为无色澄清液体，试剂2为无色或微黄色澄清液体。5.2、空白吸光度值低密度脂蛋白胆固醇试剂1与试剂2按3:1比例混合成的工作试剂在37℃、测定波长为560nm、比色光径为1.0cm时，空白吸光度值A应≤0.150。5.3、试剂空白变化率低密度脂蛋白胆固醇试剂1与试剂2按3:1比例混合成的工作试剂在37℃、测定波长为560nm、比色光径为1.0cm时，空白吸光度变化率︱A︱≤0.010/5min。5.4、线性范围采用6.2测定参数，试剂测定线性范围为0~450mg/dL，测定结果r值≥0.970。5.5、准确度低密度脂蛋白胆固醇试剂盒在适用机型上测定两个已知浓度的质控品时，其测定结果应在靶值范围之内。5.6、精密度5.6.1、批内精密度：CV≤5.0%(n=10)5.6.2、批间精密度（批间差）：CV≤7.0%5.7、装量低密度脂蛋白胆固醇试剂盒装量应不低于标示量的95%。5.8、稳定性：低密度脂蛋白胆固醇试剂1和试剂2分别在2~8℃放置12个月，各项检测结果应符合5.1~5.7的要求。6、试验方法6.1、试验环境6.1.1、测定器材：各类适用的自动生化分析仪或具有测试波长的分光光度计、恒温设备、定时器、移液器或加样器。6.1.2、按定值质控血清说明书规定溶解稀释定值质控血清。6.1.3、试剂配制：液体试剂可直接使用。6.1.4、线性测定时可采用线性质控品或将高值血清按0%、20%、40%、60%、80%、100%比例稀释备用。6.2、基本参数：表1：基本测定参数参数名称要求参数名称要求测定温度37试剂1用量300主波长540~570nm样本用量3副波长700nm试剂2用量100吸光度范围0~2A反应时间300秒比色杯光径1.0测定模式两点终点法参数设定应根据不同的测定仪器进行调整，参照仪器说明书。6.3、外观检测在自然光下目测低密度脂蛋白胆固醇试剂，溶液外观应符合5.1条的规定。6.4、空白吸光度测定试剂1与试剂2按3:1比例混合成工作试剂，在37℃预温10分钟后，在测定波长为560nm、比色光径为1.0cm时，以纯水为空白管，所测试剂空白吸光度值A应符合5.2的规定。6.5、试剂空白变化率试剂1与试剂2按3:1比例混合成工作试剂，在37℃预温10分钟后，在测定波长为560nm、比色光径为1.0cm时，以纯水为空白管，连续监测试剂空白吸光度值5分钟，计算5分钟试剂空白变化的差值，结果︱A︱应符合5.3的规定。6.6、线性范围取R1，R2试剂各1瓶，采用线性质控品或将高值血清按0%、20%、40%、60%、80%、100%比例稀释后进行测定，以样本管的浓度为X值，以每样本管相对应的理论值为Y值，按下式求出回归系数r值，其结果应符合5.4条的要求：式中： Xi为样本管的浓度 Yi为与样本管相对应的吸光度测定值 n为测定样本数6.7、准确度测定用待检试剂2管平行测定两个已知浓度的质控品，计算样本测定结果均值（），其结果应在靶值范围之内。6.8、精密度测定6.8取R1，R2试剂各3瓶，测定同一份异常质控血清样本10次，计算3瓶测定结果的变异系数CV(%)，其结果应符合5.6.1的要求。6.8取3个批号试剂，每个批号取R1，R2各1瓶；分别测定同一份异常质控血清样本各10次，计算3批试剂测定总均值（）和总标准差ST，按下式计算出批间变异系数CV(%)，其结果应符合5.6.2的要求。6.9、最低装量检测低密度脂蛋白胆固醇试剂盒用适用的量具称量或量取应符合5.7条的规定。6.10、稳定性测定低密度脂蛋白胆固醇试剂1和试剂2分别在2~8℃放置12个月，各项测定结果应符合5.1~6.9的要求。6.11、操作步骤管号12345678在540~570nm处，分光光度计用纯水调“0”试剂1（L）300300300300300300300300生理盐水（L）3－－－－－－－20%高值血清（L）－3－－－－－－40%高值血清（L）－－3－－－－－60%高值血清（L）－－－3－－－－80%高值血清（L）－－－－3－－－100%高值血清（L）－－－－－3－－定值质控品（L）－－－－－－3－定值校准品（L）－－－－－－－3混匀，37℃孵育300秒后，读取各管吸光度值（Ai试剂2（L）100100100100100100100100混匀，孵育300秒后，读取各管吸光度值（Af）。根据不同测定仪器，可以调整试剂与样本比例7、检验规则7.1、检验分为出厂检验和型式检验。7.2、出厂检验7.2.1、出厂检验由公司质量部检验，检验合格后方可销售。7.2.2、抽样在本标准规定的限度内具有同一性质和质量，并在同一连续生产周期中生产出来的一定数量的试剂盒为一批。每批试剂盒均应编制唯一的生产批号。根据批生产数量，设每批产品的成品数为n，当n≤300时，按取样数随机取样（不少于一个包装）；当n＞300时，按取样数随机取样。7.2.3、检验判定出厂检验项目为5.1~5.7（不包含5.6.2批间精密度），只有按全部出厂检验项目对全部抽样样本的判断是合格的，才能最终判断合格，否则就判断不合格。7.3、型式试验7.3.1、在下列情况下，应进行型式检验：a)新产品投产前；b)正式生产后，如生产工艺发生较大改变，可能影响产品性能时；c)停产超过6个月，恢复生产时；d)主要原料改变时；e)国家监督管理部门进行质量抽查时。7.3.2、型式试验抽样型式试验的样本从生产厂检验合格的成批产品中，随机抽取，抽取方法同7.2.3。其中产品注册为送样。7.3.3、检验判定按5.1-5.7条项目测定，只有按全部出厂检验项目对全部抽样样本的判断是合格的，才能最终判断合格，否则就判断不合格。7.4、留样检验7.4.1、每一生产批次均应留样，用作留样检验或稳定性检验。留样数量不低于出厂检验抽样数量的三分之一（不少于一个包装）。7.4.2、留样检验适用于产品有效期内的质量跟踪或验证，检验项目与出厂检验相同，只有全部被检抽样样本的检验项目是合格的，才能判断合格，否则就判断不合格。7.4.3、稳定性检验按5.8条项目测定，只有对全部抽样样本的判断是合格的，才能最终判断合格，否则就判断不合格。8、标志、标签、说明书8.1、标志标志应符合GB191-2000标准的规定。8.1.1、单个包装盒上应有下列标志：a) 生产单位名称、地址、邮政编码、电话、商标；b) 产品名称、规格；c) 生产批号、有效期；d) 产品注册号；e) 执行的产品标准号；f) 贮藏条件；g) 合格封签；h) 注意事项。8.2、说明书上应有下列标志:a) 生产单位名称，地址，邮政编码，电话；b) 产品名称，规格；c) 产品注册号；d) 执行的产品标准号；e) 有效期、贮藏条件；f) 用途；g) 测定原理和技术要求；h) 试剂主要成分、量、浓度或比例；i) 适用仪器；j) 样本要求；k) 测定步骤；l) 计算（并附举例说明）；m) 线性范围；n) 灵敏度；o) 注意事项；p) 参考值范围。8.3、试剂瓶包装标签应有下列标志：a) 生产单位名称、地址和商标；b) 试剂名称、规格；c) 生产批号、失效日期；d) 储存条件；e) 注意事项。8.4、外包装箱上应有下列标志：a) 生产者名称、地址、邮政编码；b) 产品名称；c)毛重、净重；d)体积（长×宽×高）；e) 出厂日期；f) 贮运条件；g) 数量。9、包装、运输、贮存9.1、包装规格9.1.1、试剂盒包装规格分为5种。9.1.2、各包装规格试剂盒上加贴标签。9.1.3、1号包装规格为R145mL，R215mL，试剂盒内含使用