色谱例题主题知识讲座

［例18-1］有一根lm长柱子，分离组分1和2得到如图18d5色谱图。图中横坐标l为统计笔走纸距离。若欲得到R=1.2分离度，有效塔板数应为多少？色谱柱要加到多长？色谱例题主题知识讲座第1页解：先求出组分2对组分1相对保留值r2，1（即α值）色谱例题主题知识讲座第2页求有效塔板数neffneff＝16×（0.8）2[1.1/(1.1-1)]2＝1239若使R=1.2,所需塔板数可计算,即色谱例题主题知识讲座第3页所以,欲使分离度到达1.2,需有效塔板数为2788块,则所需柱长为

L=2788/1329×1m=2.25m色谱例题主题知识讲座第4页[例18-2]已知某色谱柱理论塔板数为3600,组分A和B在该柱上保留时间为27mm和30mm,求两峰峰半宽和分离度.

解:∵Y1/2=Y/1.7

w1=27/(3600/16)1/2=1.8mm(w1)1/2＝1.8/1.7＝1.06mmw2=30/(3600/16)1/2=2.0mm(w2)1/2＝2.0/1.7＝1.18mmR＝2(30-27)/(1.8+2)＝6/3.8＝1.6色谱例题主题知识讲座第5页

[例18-3]已知一色谱柱在某温度下速率方程A=0.08cm;B=0.65cm2/s;C=0.003s,求最正确线速度u和最小塔板高H.

解:

欲求u最正确和H最小,要对速率方程微分,即

dH/du＝d(A+B/u+Cu)/du＝-B/u2+C＝0

而,最正确线速:u最正确＝(B/C)1/2

最小板高:H最小＝A+2(BC)1/2

可得u最正确＝(0.65/0.003)1/2＝14.7cm/sH最小＝0.08+2(0.65×0.003)1/2

＝0.1683cm色谱例题主题知识讲座第6页

[例18-4]已知物质A和B在一个30.0cm柱上保留时间分别为16.40和17.63分钟.不被保留组分经过该柱时间为1.30分钟.峰宽为1.11和1.21mm,计算:(1)

柱分辨本事;

(2)

柱平均塔板数目;

(3)

塔板高度;

(4)

到达1.5分离度所需柱长度;

(5)在较长柱上把物质B洗脱所需要时间.

色谱例题主题知识讲座第7页解:

(1)R=2(17.63-16.40)/(1.11+1.21)=1.06(2)nA=(16.40/1.11)2=3493nB=16(17.63/1.21)2=3397nav=(3493+3397)/2=3445=3.44×103(3)H=L/n=30.0/3445=8.708×10-3cm=8.71×10-3cm(4)n2=3445×2.25/1.124=6.90×103

源于(n1/n2=R1/R2)2L=nH=6.90×103×8.71×10-3=60.1cm(5)tr2=tr1(R2/R1)2=17.63×1.52/1.062

=35.3分钟色谱例题主题知识讲座第8页

内标法关键是选择适当内标物，它必须符合以下条件：（1）内标物应是试样中原来不存在纯物质，性质与被测物相近，能完全溶解于样品中，但不能与样品发生化学反应。（2）内标物峰位置应尽可能靠近被测组分峰，或位于几个被测物之峰中间并与这些色谱峰完全分离。（3）内标物质量应与被测物质质量靠近，能保持色谱峰大小差不多。色谱例题主题知识讲座第9页内标法优点：（1）因为ms/m比值恒定，所以进样量无须准确；（2）又因为该法是经过测量Ai/As比值进行计算，操作条件稍有改变对结果没有什么影响，所以定量结果比较准确。（3）该法适宜于低含量组分分析，且不受归一法使用上局限。色谱例题主题知识讲座第10页

内标法主要缺点：每次分析都要用分析天平准确称出内标物和样品质量，这对常规分析来说是比较麻烦；其次，在样品中加入一个内标物，显然对分离度要求比原样品更高。色谱例题主题知识讲座第11页3.外标法外标法实际上就是惯用标准曲线法。首先用纯物质配制一系列不一样浓度标准试样，在一定色谱条件下准确定量进样，测量峰面积（或峰高），绘制标准曲线。进样品测定时，要在与绘制标准曲线完全相同色谱条件下准确进样，依据所得峰面积（或峰高），从曲线查出被测组分含量。色谱例题主题知识讲座第12页练习题

已知物质A和B在一根30.00cm长柱上保留时间分别为16.40min和17.63min。不被保留组分经过该柱时间为1.30min。峰底宽度分别为1.11min和1.21min，计算：（1）柱分离度；（2）柱平均塔板数；（3）到达1.5分离度所需柱长度。色谱例题主题知识讲座第13页解：（1）柱分离度

R=2（17.63-16.40）/（1.11+1.21）=1.06（2）柱平均塔板数

n=16(16.40/1.11)2=3493n=16(17.63/1.21)2

=3397n平均=（3493+3397）/2=3445

色谱例题主题知识讲座第14页（3）到达1.5分离度所需柱长度

R1/R2=(n1/n2)1/2