细菌室质量控制程序

细菌室质量控制操作规程细菌室质质量管理理目标一一．临临床细菌菌室是为为临床诊诊断与治治疗提供供有否感感染病原原菌以及及药物敏敏感实验验依据的的检查科科室之一一。二．临床床细菌室室的工作作是面向向全院临临床医生生与患者者。其工工作目的的是一切切为了患患者，服服务于患患者；一一切为了了临床，，服务于于临床；；急其所所急，想想其所想想，检验验报告及及时、准准确。三．根据据循证医医学的观观点，不不断进行行实验方方法学的的研究与与改进，，临床价价值探讨讨，经济济学评估估，优选选出最直直接、最最有效、、最准确确、最经经济的实实验或实实验组合合，用于于临床。。四．不断断加强实实验室与与临床的的信息交交流与学学术探讨讨，直接接参与临临床诊断断治疗，，促进检检验医学学的发展展。五．本室室所进行行的试验验方法、、量值可可溯源，，不准确确度限制制在国内内有关部部分标准准。力争争达到国国家规定定的质量量控制标标准.六.仪器设备备完好率率≥85%。七．参加加国际、、国内室室间质评评，其总总成绩““优秀””应为90％，，“良好好”小于于10％％。八．对患患者热情情，服务务周到，，使全科科平均满满意率为为95％％以上。。九．检查查差错发发生率应应小于0.4％％。临床细菌菌学实验验室室内内质量控控制基本本要求一、临床床细菌学学实验室室仪器设设备的性性能维护护临床细菌菌学实验验室常用用仪器设设备主要要包括：：细菌培培养仪、、细菌鉴鉴定及药药敏测试试仪、显显微镜、、高压灭灭菌器、、恒温孵孵育箱、、天平、、冰箱、、水浴箱箱以及比比浊计等等。这些些仪器设设备的质质量维护护对于检检验结果果的质量量保证至至关重要要。性能能维护方方法及维维护频率率参照制制造商提提供的使使用手册册进行。。如使用用手册中中未详细细注明或或实验室室自身无无法完成成，由生生产厂家家协助解解决，每每年至少少一次。。二、培养养基的质质量控制制要求对培培养基进进行两方方面的质质量控制制：无菌菌试验以以及已知知菌生长长试验。。无菌试试验一般般为随机机抽样3-5%%，在35℃条条件下培培养48h，每每批培养养基至少少进行一一次无菌菌试验；；已知菌菌生长试试验的前前提条件件是实验验室有足足够的已已知菌储储备，其其中包括括标准菌菌株(如如ATCC或NCTC标准菌菌株)及及经过准准确鉴定定的临床床分离菌菌。如果果条件允允许，提提倡使用用标准菌菌株。已已知菌生生长试验验应明确确预期结结果。每每批培养养基至少少进行一一次已知知菌生长长试验。。三、细菌菌染色的的质量控控制在临床细细菌学检检查过程程中，革革兰染色色和抗酸酸染色使使用频率率最高。。1．革兰兰染色IQC要要求：利利用标准准菌株((金黄色色葡萄球球菌ATCC25923及大大肠埃希希菌ATCC25922)或或其他已已知的革革兰阳性性菌及革革兰阴性性菌至少少每周进进行一次次质量验验证。2．妻--尼染色色：利用用已知的的抗酸杆杆菌(AFB))阳性涂涂片每周周或在更更新炭酸酸复红染染液时至至少进行行一次质质量验证证。四、细菌菌鉴定或或鉴别常常用试验验的质量量控制细菌鉴定定或鉴别别试验的的IQC就是利利用已知知菌或标标准菌株株(如ATCC或NCTC标标准菌株株)进行行鉴定或或鉴别试试验相关关影响因因素的质质量监控控。应用用频率较较高的试试验IQC每周周至少一一次，频频率较低低的试验验IQC随标本本一同进进行。五、抗微微生物药药物敏感感试验的的质量控控制临床常用用抗微生生物药物物敏感试试验包括括一般ββ-内酰酰胺酶测测试、超超广谱ββ-内酰酰胺酶((ELBLs))测试、、纸片扩扩散法药药敏试验验以及定定量药敏敏试验((即MICs测测定法))。1．一般般β-内内酰胺酶酶测试的的质量控控制：至至少每周周一次。。质控菌菌株可使使用临床床分离的的已知菌菌株，但但最好使使用标准准菌株，，如淋病病奈瑟菌菌ATCC31426(β--内酰胺胺酶阳性性绿脓杆杆菌ATCC27853)和和淋病奈奈瑟菌ATCC43069((β-内内酰胺酶酶阴性或或金黄色色葡萄球球菌ATCC25923)。。2．ESBLs测试的的质量控控制：美美国临床床实验室室标准化化协会((CLSI：原原NCCLS))目前仅仅提供了了肺炎克克雷伯菌菌、产酸酸克雷伯伯菌、大大肠埃希希菌和奇奇异变形形杆菌ESBLs的测测试标准准。其测测试标准准参照最最新的CLSI文件。。质量控控制随临临床测试试菌株一一同进行行。3．纸片片扩散法法及MIC测定定法药敏敏试验的的质量控控制：质质控试验验条件、、质控菌菌株选择择及质控控允许范范围参照照最新的的CLSI规定定。频率率为每周周至少一一次。4．某些些耐药菌菌检测的的质量控控制：一一些耐药药菌株如如高水平平氨基糖糖苷类耐耐药的肠肠球菌、、苯唑西西林耐药药的金黄黄色葡萄萄球菌以以及万古古霉素耐耐药的肠肠球菌等等的IQC具体体方法、、质控菌菌株及质质控预期期结果参参见最新新的CLSI规规定。质质量控制制随临床床测试菌菌株一同同进行。。

细菌室室室间质量量控制评评价标准准操作程程序1目的的：了解本实实验室测测定结果果的准确确性和实实验室所所处的水水平2SOP变动动程序本标准操操作程序序的改动动，可由由任一使使用本SOP的的工作人人员提出出，并报报经专业业主管、、质控主主管、科科主任批批准签字字。3室间间质评的的组织机机构卫生部临临床检验验中心或或省临床床检验中中心4室间间质评的的重要性性是临床实实验室全全面质量量管理重重要组成成部分，，也是实实验室认认可的重重要依据据。5室间间质评的的适用性性5.1确确定某某个实验验室进行行检测或或测量的的能力，，以及监监控实验验室的持持续能力力。5.2识识别实实验室中中的问题题并制定定相应的的纠正措措施。5.3确确定新新的检测测和测量量方法的的有效性性和可比比性、并并对这些些方法进进行相应应的监控控。5.4增增加实实验室用用户的信信心.5.5识识别实实验室间间的差别别。6室间间质评的的测定原原则室间质评评样本测测定时须须与病人人样本同同样操作作，不得得特殊对对待，并并且不能能与其他他医院核核对测定定结果，，要如实实地反映映实验室室的真实实工作状状况和水水平，如如有疑问问，可与与室间质质评的组组织机构构沟通。。7室间间质评活活动程序序7.1在在建立立实施室室内质控控体系的的基础上上，参加加室间质质评活动动。7.2收收到质质控物后后认真检检查核对对，如有有破损、、缺失、、标本编编号错误误等及时时向科室室反映，，以便及及时与部部临检或或省临检检中心联联系，及及时补寄寄。7.3仔仔细阅读读室间质质评的通通知和要要求，由由室负责责人将质质评样本本保存在在2℃～～8℃冰冰箱，妥妥善保管管好报表表和项目目编码。。8质评评样本检检测操作作程序8.1测测试环环境、仪仪器、试试剂的要要求室温：20～25℃湿度：<<80%%试剂：所所用试剂剂或试条条均为仪仪器配套套产品质控品：：为仪器器配套产产品，并并在使用用效期内内，同时时无变质质或污染染。仪器：仪仪器必须须有质量量控制保保证。8.2质质评样样品的准准备⑴按测测定日期期从冰箱箱中取出出参评物物，放置置至室温温(约30min)。。⑵根据据标本种种类，质质控菌株株分到各各组进行行培养分分离鉴定定。8.3质质评样样品的测测定⑴质控控菌株用用小牛血血清或肉肉汤溶解解，按标标本种类类接种各各种选择择培养基基，放适适当环境境培养。。⑵培养养分离病病原菌，，根据病病原菌种种类进行行鉴定和和耐药表表型检测测，并根根据质控控要求，，病原菌菌进行药药敏试验验(重复复2次))。8.4填填写报报表或网网上回报报⑴填写写报表时时应按要要求逐项项填写，，字迹清清晰整洁洁。实验验室编码码：119082⑵填写写完后再再次核对对，以防防笔误、、样本号号顺序错错误等。。⑶然后后则测定定者、室室负责人人签字。。8.5结结果存存档填写完后后复印或或将网页页另存，，一份寄寄出，一一份存档档，以备备核查。。9评价价方法9.1单单项PT值评评分标准准每一批号号每一项项目结果果在允许许范围内内时，测测定结果果合格，，得分为为100%，若若在允许许范围外外时，测测定结果果不合格格，得分分为0%%。单个个项目的的得分计计算公式式为：(该项目目的合格格结果数数÷该项项目的总总的测定定样本数数)×100%%。合格：该该项目的的测定成成绩≥80%不合格：：该项目目的测定定成绩≤≤80%%9.2总总项目目的PT值评分分标准总项目的的计算公公式为：：(总项目目的合格格结果数数÷总项项目的总总的测定定样本数数)×100%%合格：总总项目的的测定总总分≥80%不合格：：总项目目的测定定总分≤≤80%%9.3部部临检检中心给给参加实实验室发发证书的的规定合格证书书：每年年每个专专业参加加2次或或3次以以上，不不得缺席席，每次次有五个个调查样样本。每每次总项项目的测测定总分分≥80%；颁颁发合格格证书。。参加证书书：不符符合合格格证书的的要求和和标准的的均颁发发参加证证书。10质质评反馈馈分析10.1收到到反馈报报告后要要及时分分析，检检查各项项目的准准确程度度、有无无系统性性误差、、有无不不合格项项目，对对不合格格项目需需要分析析失误的的原因。。10.2不可可接受结结果的原原因可分分为以下下几个类类型10.2.1书书写误误差⑴此类类误差大大致由于于不正确确的报告告单位或或小数点点位数错错误引起起。⑵在报报告单上上填写仪仪器、方方法、试试剂等编编码错误误。⑶检测测结果没没有正确确地从仪仪器、磁磁盘、读读数窗口口抄写到到报告单单上(如如标本的的结果以以相反的的顺序抄抄写或拷拷贝)。。10.2.2方方法学学问题⑴仪器器功能检检查(如如温度、、空白读读数、压压力)未未按要求求执行，，性能指指标不在在可接受受范围内内。⑵未能能适当地地进行仪仪器的定定期维护护或不正正确的仪仪器校准准。⑶标准准品和试试剂不恰恰当的复复溶和保保存或超超出有效效期而疏疏忽地在在使用。。⑷仪器器数据处处理功能能出现问问题。⑸厂家家试剂//标准品品，或生生产厂家家规定的的仪器设设置问题题(实验验室需要要与厂家家联系来来评价此此类问题题)。⑹标本本的携带带污染率率问题，，导致细细菌鉴定定错误。。⑺方法法的灵敏敏度低限限或高限限结果的的不精密密度。⑻结果果不在仪仪器/试试剂线性性范围，，可能为为疑难((或特殊殊菌株，，如嗜肺肺军团菌菌，霍乱乱弧菌等等)不在在仪器鉴鉴定编码码范围，，仪器鉴鉴定错误误或按鉴鉴定为生生化反应应相似的的细菌。。10.2.3技技术问问题⑴室间间质评物物的不恰恰当的复复溶或复复溶后延延迟检测测。⑵测定定时样本本放置顺顺序有误误。⑶当天天的室内内质控结结果失控控但仍检检测室间间质控品品并发出出报告。。⑷室内内质控数数据虽在在可接受受限之内内，但检检测显示示出呈趋趋势性。。⑸不适适当的质质控限//规则。。(如果果可接受受的质控控范围太太宽，结结果落在在可接受受的范围围内的概概率增加加，同时时超过可可接受的的室间质质评限的的概率增增加)⑹没有有按实验验室的规规范程序序操作。。10.2.4室室间质质控品的的问题⑴基质质效应：：有些仪仪器/方方法的性性能会受受到EQA样本本基质的的影响。。导致不不可按受受的结果果。⑵非均均匀性质质控物((如不恰恰当的混混匀，或或质评物物不一致致的前处处理等))。⑶细菌菌污染，，药敏纸纸片不合合格。10.2.5室室间质质量评价价的问题题⑴不适适当的分分组。⑵不适适当的靶靶值。⑶不适适当的评评价区间间。⑷EQA组织织者不正正确的数数据输入入。10.2.6经经调查查后无法法解决的的问题⑴当已已排除了了所有的的可识别别的误差差，单个个不可接接受结果果可能是是由于随随机误差差，特别别是当重重复分析析结果是是可接受受时，在在这种情情况下不不应采取取纠正措措施。⑵所发发质控药药敏纸片片本身不不合格((不在标标准质控控范围))，导致致药敏试试验结果果偏差较较大，无无法进行行统一质质评。⑶经调调查后无无法解决决的问题题(因是是质控品品)，及及时与检检验中心心联系，，提出问问题，给给出解决决办法。。11将将所有的的失控调调查原因因及纠正正措施做做好记录录，并上上报科质质量控制制小组和和科主任任，由科科主任签签字后，，质控结结果归档档保存。。

细菌室室室内质量量控制标标准操作作程序1目的的：保证证检验结结果的准准确性和和可比性性2SOP变动动程序本标准操操作程序序的改动动，可由由任一使使用本SOP的的工作人人员提出出，并报报经专业业主管、、质近主主管、科科主任批批准签字字。3室内内质控的的重要性性是临床实实验室全全面质量量管理重重要组成成部分，，也是实实验室认认可的重重要依据据4室内内质控的的适用性性4.1连连续监监测和评评价本室室工作质质量，评评价结果果的可信信性。4.2排排除质质量环节节中所有有阶段导导致不满满意的原原因。4.3反反映检检验操作作中所有有步骤的的工作情情况，包包括从收收集标本本到结果果发出的的全过程程。提高高常规测测定工作作的批间间和批内内标本检检测结果果的一致致性。5室内内质控的的方法5.1药药敏纸纸片质控控采集时时间散点点图。5.2定定性或或半定量量检测项项目采用用靶值比比对判断断法。6室内内质控的的准备程程序6.1培培训实实验室工工作人员员，增强强实验人人员对质质控的重重要性、、基础知知识、实实验方法法的充分分了解。。并在实实际工作作中不断断提高质质控工作作能力，，培养一一些质控控骨干。。6.2建建立一一套完整整的标准准操作规规程(SOP))文件6.3仪仪器检检定与校校准的校校准品应应能溯源源到参考考方法或或/参考考物质，，确立校校准频度度。6.4质质控品品的选择择、应用用与保存存严格按按室内质质控制度度要求执执行(见见细菌指指导作业业书(2)中的的程序文文件-临临床细菌菌实验室室的管理理和质量量控制))。7定量量检测项项目的质质控规则则12s：为警告规规则，提提示有一一水平质质控值超超出×±±2S，，发出警警告。13s：失控规规则，提提示有一一水平质质控值超超出×±±3S，，提示随随机误差差增大造造成的失失控；①同一个个水平的的质控品品连续2次控制制值同方方向超出出×+2S或××－2S限值。。②在1批批检测中中，2个个水平的的质控值值同方向向超出××+2S或×－－2S限限值。R4s：失控规则则，在1批检测测中，1个水平平控制品品的控制制值超出出×+2S限值值，另1个水平平控制品品超出××－2S限值，，提示随随机误差差增大造造成的失失控。41s：失控规则则，有连连续4次次的控制制值超出出×+1S或××－1S限值，，是系统统误差，，有二种种表现：：①1个水水平控制制品连续续4次控控制值超超出×++1S或或×－1S限值值；②2个水水平控制制品连续续2次控控制值同同方向××+1S或×－－1S限限值；10x：失控规则则，有连连续10次控制制值在均均数的一一侧，是是系统误误差，有有二种表表现：①1个水水平的控控制品连连续10次控制制值在均均值的一一侧；②2个水水平的控控制品连连续5次次的控制制值在均均值的一一侧；8定性或或半定量量检测项项目的质质控规则则要求90%的结结果完全全与靶值值相符，，10%%的结果果只允许许相差一一个“级级差”((如药敏敏纸片的的质控直直径必须须在标准准菌株规规定的范范围内))9室内内质控的的操作程程序9.1质质控样样本的准准备9.1..1测测试环境境、仪器器、试剂剂的要求求室温：20～25；湿湿度：<<80%%仪器空白白值在允允许范围围内。试剂：所所用试剂剂均为仪仪器配套套产品。。9.1..2质质控样品品的准备备从冰箱中中取出质质控物，，放置至至室温((约30min)，如如纸片、、抗血清清、仪器器卡片等等。9.2质质控样样本的测测定9.2..1在在仪器准准备测量量的状态态下，输输入质控控编号或或菌株标标准编号号，按仪仪器操作作规程进进行。9.2..2按按常规操操作程序序进行质质控品的的检测。。9.2..3检检测完毕毕，检测测数据应应记录在在各种质质控登记记本上。。9.2..4质质控品测测定“在在控”后后，才能能测定病病人样本本10失失控的原原因与处处理10.1超出出规定的的靶值或或质控品品规定的的参考范范围为失失控,发发生失控控后各组组立即上上报室负负责,并并集中分分析失控控原因。。10.2检查查质控图图或失控控的规则则，确定定误差的的类型。。①系统误误差(或或偏倚))的失控控：每天天质控值值有定向向的漂移移或倾向向性，并并且随时时间在增增大，逐逐渐形成成失控。。②随机误误差的失失控：表表现突然然，失控控的质控控值相对对于均值值的离散散度较大大。10.3误差差类型和和失控原原因的关关系①造成系系统误差差的原因因：使用用不同批批号的试试剂、不不同批号号的校准准品、校校准品过过期或保保存不妥妥造成校校准值变变化、校校正系数数设定错错误、试试剂的质质量或由由于使用用不当引起起试剂变变质、吸吸样器或或调试错错误、仪仪器的故故障、检检验人员员的变动动等。②造成随随机误差差的原因因：试剂剂瓶或试试剂管道道中有气气泡、电电源电压压不稳、、检验人人员操作作不熟练练、重现现性差等等。③在检测测中偶尔尔出现的的不恒定定因素。。10.4自动动分析仪仪多项目目检测系系统常见见的原因因①如果失失控仅1个项目目，在确确定误差差性质后后，按照照不同误误差可能能具有的的问题去去寻找原原因。②如果多多个项目目同时出出现失控控问题，，应从出出现问题题的共性性上考虑虑。10.5与近近期变化化有关的的原因10.6确认认解决问问题，作作好记录录找出原因因，经纠纠正后须须重新测测定质控控品，以以“在控控”来确确认问题题解决与与否，在在失控时时测定的的病人样样本也须须重测，，应将出出现的质质控事件件和纠正正过程形形成文件件。11做做好质控控日记12定期随机机抽查病病历，综综合分析析病人的的诊断、、疗效与与检验结结果的相相关性13经常征求求临床意意见，了了解检验验结果与与诊疗事事件的相相关性，，使检验验结果得得到临床床的认可可14参加部、、省临检检中心的的室间质质评活动动，保证证检验结结果的准准确性和和可比性性15室室内质控控的步骤骤15室室内质控控的步骤骤质控品检检测在控控否？是否否同一质控控品重新新检测在控否??是否否标本检测测更更换换质控品品重新检检测标本本检测是在在控否??否否更换试剂剂或试条条重新检测测是在在控否否?否否

仪器检修修、校准准或联系系厂商项目：细细菌药敏敏纸片质质控程序序目的：保证细菌菌药敏纸纸片的正正常使用用和药敏敏试验的的准确性性及安全全性负责人：：质控内容容：1.对细菌药药敏纸片片每批每每周进行行质控，，如不合合格→连连续1周周质控→→合格后后改每周周质控→→如不合合格，连连续30天质控控→如合合格后改改每周质质控→不不合格应应查找整整个操作作过程及及纸片、、试剂、、培养基基、培养养环境等等，严格格按CLSI//NCCLS标标准和药药敏试验验失控措措施进行行操作。。查找和和纠正操操作过程程中的问问题，并并制定纠纠正措施施。每月月对细菌菌药敏纸纸片室内内质控结结果张贴贴公布。。2.纸纸片扩散散法药敏敏试验流流程图3．做好质控控记录，，如有失失控，应应进行及及时纠正正和处理理。失控原因因及处理理：⑴按室内质质控标准准操作程程序查找找失控原原因。发发现问题题及时处处理，如如不能处处理及时时向科主主任汇报报。⑵问题及时时处理后后，要记记录失控控原因和和纠正措措施。⑶由于很多多因素均均能影响响药敏试试验扩散散法的结结果，因因此对以以下每一一可变因因素应按按要求加加以控制制：（按按CLSI/NCCLS标准准操作））①培养养基目目前国国际上认认可的药药敏方法法为改良良的Kirby-Bauer（简称称K-B）法，，该法采采用水解解酪蛋白白琼脂（（M-H琼脂）），配制制后的pH为7.2±±0.1，倾入入平皿后后的深度度应为4mm。。②抗生生素纸片片要要求自配配或购买买的抗生生素纸片片其含药药量符合合标准而而且均匀匀。库存存的抗生生素纸片片贮存于于-20℃，小小时应用用的抗生生素纸片片密封后后存放于于4℃冰冰箱，盛盛抗生素素纸片的的容器内内含有硅硅胶等吸吸潮剂。。使用时时取出，，放置室室温1小小时使温温度平衡衡再开启启使用，，同时抗抗生素纸纸片应于于有效期期内应用用。③菌液液浓度取取对对数期生生长已分分纯的细细菌，校校正菌液液浓度与与Kirby--Bauer法法规定的的标准比比浊管相相同为止止。④其他他包包括涂菌菌均匀，，每只9cm平平皿至多多贴7张张抗生素素纸片，，测试平平皿最多多两只叠叠在一起起，不得得过多，，量取抑抑菌圈需需用卡尺尺或米尺尺等。⑤除控控制上述述各因素素外，每每次作药药敏试验验时，以以金黄色色葡萄球球菌ATCC25923、大大肠埃希希氏菌ATCC25922及铜绿绿假单胞胞菌ATCC27853三三株质控控标准菌菌株按Kirby-Bauer法同同时作药药敏试验验，观察察其抑菌菌圈直径径是否落落在标准准菌株规规定的范范围内（（参见CLSI/NCCLS2006年操操作标准准）；如如果超出出范围，，应查明明误差原原因予以以纠正。。项目：细细菌室仪仪器设备备维修﹑﹑校验质质控程序序目的：保证仪器器设备的的正常使使用和细细菌鉴定定准确性性及安全全性负责人：：质控内容容：1.每日早晨晨上班前前对室内内的温度度、湿度度、冰箱箱温度、、培养箱箱温度、、水浴箱箱温度及及各种仪仪器的运运行状况况进行登登记，如如发现问问题及时时纠正和和上报。。((杨佩红红，张鹏鹏亮)。。2.每年定期期对pH计、天天平、加加样器、、自动高高压灭菌菌器、生生物安全全柜、气气压阀、、厌氧指指示剂等等定量设设备进行行年检校校准和记记录（参参见检验验科细菌菌室仪器器校检计计划）。。（徐修修礼，樊樊新）。。3．仪器和设设备按操操作规程程进行，，按要求求每日进进行清洁洁及使用用登记，，鉴定卡卡片在有有效期内内每月进进行质控控。(樊樊新)4．VITEK仪器器的质控控：⑴各种鉴定定卡片在在有效期期内每月月进行质质控。⑵按仪器的的质控操操作程序序进行（（参见VITEK仪器器的质控控操作程程序）。。⑶做好质控控记录，，如有失失控，应应进行及及时纠正正和处理理。5．血培养仪仪器的质质控：⑴目前无血血培养仪仪器的质质控培养养瓶，由由于各种种血培养养仪器不不同，无无法进行行统一质质评。⑵每年定期期对血培培养仪器器的培养养瓶孔位位进行光光学校验验，对不不合格的的培养瓶瓶孔位进进行封闭闭。⑶血培养仪仪出现报报警应及及时进行行校验。。⑷如有其他他问题及及时与厂厂家工程程师联系系。失控原因因及处理理：⑴按室内质质控标准准操作程程序查找找失控原原因。⑵发现问题题及时处处理，如如不能处处理及时时向科主主任汇报报。⑶问题及时时处理后后，要记记录失控控原因和和纠正措措施。项目：革革兰氏染染色液质质控程序序目的：保证染色色液的正正常使用用和试验验的准确确性及安安全性负责人：：樊新，杨杨佩红质控内容容：1.对每批染染色液配配制后﹑﹑每周或或使用时时应用标标准菌株株（如ATCC25922、、ATCC25923、ATCC27853、ATCC29212、、枯草杆杆菌黑色色变种等等）进行行质控。。2.试剂配制制和染色色方法参参见细菌菌指导作作业书⑴⑴中的程程序性文文件39页（细细菌常用用的染色色技术及及方法））。3．对每种染染色液的的质控方方法参见见细菌指指导作业业书⑵中中的程序序性文件件243页（临临床细菌菌实验室室的管理理和质量量控制-------试剂剂﹑染色色液及诊诊断抗血血清的质质控）。。4．做好质控控记录，，如有失失控，应应进行及及时纠正正和处理理。

失控原因因及处理理：⑴按室内质质控标准准操作程程序查找找失控原原因。发发现问题题及时处处理，如如不能处处理及时时向科主主任汇报报。⑵问题及时时处理后后，要记记录失控控原因和和纠正措措施。

项目：抗抗酸染色色液质控控程序目的：保证染色色液的正正常使用用和试验验的准确确性及安安全性负责人：：质控内容容：1.对每批染染色液配配制后﹑﹑每周或或使用时时应用标标准菌株株（如结结核菌HRV37、ATCC27853等等）进行行质控。。2.试剂配制制和染色色方法参参见细菌菌指导作作业书⑴⑴中的程程序性文文件39页（细细菌常用用的染色色技术及及方法））。3．对每种染染色液的的质控方方法参见见细菌指指导作业业书⑵中中的程序序性文件件243页（临临床细菌菌实验室室的管理理和质量量控制-------试剂剂﹑染色色液及诊诊断抗血血清的质质控）。。4．做好质控控记录，，如有失失控，应应进行及及时纠正正和处理理。失控原因因及处理理：⑴按室内质质控标准准操作程程序查找找失控原原因。发发现问题题及时处处理，如如不能处处理及时时向科主主任汇报报。⑵问题及时时处理后后，要记记录失控控原因和和纠正措措施。

项目：成成品或自自制培养养基质控控程序目的：保证培养养基的正正常使用用和细菌菌培养的的准确性性及安全全性负责人：：质控内容容：1.对成品或或自制培培养基按按配制时时间、有有效期进进行记录录，并用用相应的的标准菌菌株进行行生长特特性试验验和无菌菌试验，，并质控控记录在在有效期期内的变变化。2.培养基配配制方法法参见细细菌指导导作业书书⑵中的的程序性性文件182页页（临床床细菌学学培养基基的制备备）。3．对成品或或自制培培养基的的质控方方法：⑴培养基来来源可靠靠，各个个成分中中不应含含有对目目的菌生生长的抑抑制物。。特殊要要求的培培养基，，如葡萄萄糖氧化化-发酵酵（O//F试验验），除除加入的的葡萄糖糖外，其其它成分分中不应应含有糖糖类。又又如药敏敏试验用用培养基基中不应应含有抗抗菌药物物的拮抗抗物。接接种产少少量酸或或碱的细细菌，所所用鉴定定培养基基不宜含含缓冲系系统。制制备培养养基要求求用不含含杂质的的蒸馏水水。⑵培养基的的pH测测定：不不同培养养基需要要调至不不同的pH，但但波动范范围应在在规定的的pH±±0.2之内。。要注意意高压前前后的pH变化化，一般般高压后后pH下下降0..1～0.2。。⑶分装培养养基的平平皿或试试管应为为中性，，无残存存的酸、、碱抑制制物。药药敏用平平皿底要要平，以以免琼脂脂厚薄不不一，影影响药敏敏结果。。⑷每批培养养基制备备均应做做配制记记录，且且每批制制备好的的培养基基一般要要求抽取取5%～～10%%的样样品做无无菌试验验，抽验验的样品品不能再再用。制制备好的的平板或或试管培培养基（（固体或或半固体体）为了了防止失失水，最最好装入入塑料袋袋，4℃℃冰箱保保存，可可延长使使用期。。如溶封封于细玻玻璃管内内，一般般室温保保存可用用3～6个月甚甚至1年年。而培培养基的的大批制制备也便便于控制制。⑸培养基的的性能试试验：①每批培养养基在用用于临床床标本的的分离鉴鉴定之前前，都应应做性能能试验。。培养基基按使用用的目的的的不同同，可分分为增菌菌培养基基、分离离培养基基和鉴定定培养基基。②增菌培养养基如如营养养培养基基。增菌菌培养基基的性能能试验主主要是定定量性能能试验。。应接种种难生长长的细菌菌，最好好接种少少量，在在一定时时间观察察增菌情情况，必必要时可可将接种种菌液稀稀释成不不同浓度度，分别别接种于于增菌培培养基内内，观察察能生长长的最小小接种浓浓度，接接种浓度度越小，，说明增增菌培养养基性能能越好。。③分离培养养基观观察目目的菌是是否生长长良好，，非目的的菌是否否被抑制制或部分分被抑制制，如SS，麦麦康凯培培养基。。应选用用该培养养基上能能生长，，但易受受某些因因素影响响且生长长能力弱弱的菌种种做性能能试验。。④含某些生生长因子子的培养养基的性性能试验验，应选选用该生生长因子子存在时时，才能能生长的的菌做质质控。如如巧克力力平板需需用流感感嗜血杆杆菌，脑脑膜炎奈奈瑟菌做做性能试试验。常常用的分分离培养养基质控控见表1。⑤鉴定用培培养基应应使使用具有有典型特特征的菌菌株做性性能试验验，经鉴鉴定能出出现预期期的生化化反应，，此鉴定定培养基基方可使使用。用用于生化化试验的的质控菌菌株见表表2。4．做好质控控记录，，如有失失控，应应进行及及时纠正正和处理理。失控原因因及处理理：⑴按室内质质控标准准操作程程序查找找失控原原因。发现问题题及时处处理，如如不能处处理及时时向科主主任汇报报。⑵问题及时时处理后后，要记记录失控控原因和和纠正措措施。表1用用于分分离培养养基作质质量控制制的菌株株培养基菌名发育观察指标羊血琼脂溶血性链球菌、绿色链球菌+、+明显的乙型溶血环、明显的甲型溶血环巧克力琼脂流感嗜血杆菌+能够生长良好，不受抑制脑膜炎奈瑟菌+能够生长良好，不受抑制普通琼脂大肠埃希菌+生长良好表皮葡萄球菌+生长良好甘露醇高盐琼脂金黄色葡萄球菌+分解甘露醇、菌落黄色普通变形杆菌—表皮葡萄球菌+不分解甘露醇、菌落白色苯乙醇培养基表皮葡萄球菌+不溶血溶血性链球菌+乙型溶血环奇异变形杆菌—麦康凯培养基大肠埃希菌+分解乳糖、菌落红色福氏志贺菌+不分解乳糖、菌落无色透明肠球菌+不分解乳糖、菌落小、红色SS琼脂大肠埃希菌—分解乳糖、菌落大、红色福氏志贺菌+不分解乳糖、菌落无色透明肠球菌+不分解乳糖、菌落小、红色表2用用于生生化试验验的质控控菌株

生化反应名称或培养基阳性对照菌阴性对照菌1．靛基质试验大肠埃希菌产气肠杆菌2．甲基红试验大肠埃希菌产气肠杆菌3．V-P试验阴沟肠杆菌大肠埃希菌4．西蒙柠檬酸盐培养基产气肠杆菌大肠埃希菌5．Christensen柠檬酸盐培养基产气肠杆菌宋内志贺菌6．尿素酶分解试验奇异变形杆菌大肠埃希菌7．硫化氢产生试验普通变形杆菌宋内志贺杆菌8．苯丙氨酸脱氨酶奇异变形杆菌大肠埃希菌9．丙二酸盐利用试验肺炎克雷白或亚利桑那沙门菌大肠埃希菌10．赖氨酸脱羧酶鼠伤寒沙门菌或粘质沙雷杆菌普通变形杆菌11．鸟氨酸脱羧酶鼠伤寒沙门菌或奇异变形杆菌普通变形杆菌12．精氨酸双水解酶鼠伤寒沙门菌或阴沟肠杆菌普通变形杆菌13．邻位硝基苯β-D半乳糖苷大肠埃希菌奇异变形杆菌14．明胶液化试验铜绿假单胞菌硝酸盐阴性杆菌15．硝酸盐还原试验铜绿假单胞菌硝酸盐阴性杆菌16．凝固酶试验（兔血浆）金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌17．触酶试验金黄色葡萄球菌肺炎链球菌18．胆盐溶菌试验肺炎链球菌绿色链球菌19．七叶树苷分解试验肠球菌溶血性链球菌20．65g/L氯化钠肉汤肠球菌溶血性链球菌21．氧化酶试验铜绿假单胞菌大肠埃希菌22．葡萄糖酸钾铜绿假单胞菌硝酸盐阴性不动杆菌23．厚膜孢子形成试验白色假丝酵母菌类假丝酵母菌24．氰化钾抑制试验产气肠杆菌大肠埃希菌25．DNase试验粘质沙雷菌阴沟肠杆菌26．杆菌肽试验A群链球菌B群链球菌27．奥普托欣试验肺炎链球菌草绿色链球菌

项目：血血浆凝固固酶、触触酶、氧氧化酶、、β-内内酰胺酶酶等常用用酶学试试验质控控程序目的：保证酶学学试验和和试剂的的正常使使用和试试验的准准确性及及安全性性负责人：：质控内容容：1.对血浆凝凝固酶、、触酶、、氧化酶酶、β--内酰胺胺酶等常常用酶学学试验每每批及每每日使用用时质控控。(樊樊新，杨杨佩红))2．试验方法法参见细细菌指导导作业书书⑴中的的程序性性文件28页（（细菌的的酶学试试验方法法）。3．对各种新新鲜配制制的酶学学试剂每每批及每每日使用用时质控控：①血浆凝固固酶：应应用金黄黄色葡萄萄球菌ATCC25923做做阳性对对照；应应用表皮皮葡萄球球菌ATCC14990做阴阴性对照照。②触酶：应应用金黄黄色葡萄萄球菌ATCC25923做做阳性对对照；应应用粪肠肠球菌ATCC29212做做阴性对对照。③氧化酶：：应用绿绿脓杆菌菌ATCC27853做阳性性对照；；应用大大肠杆菌菌ATCC25922做阴性性对照。。④β-内酰酰胺酶：：应用大大肠杆菌菌ATCC35218做阳性性对照；；应用大大肠杆菌菌ATCC25922做阴性性对照。。4．做好质控控记录，，如有失失控，应应进行及及时纠正正和处理理

失控原因因及处理理：⑴按室内质质控标准准操作程程序查找找失控原原因。发发现问题题及时处处理，如如不能处处理及时时向科主主任汇报报。⑵问题及时时处理后后，要记记录失控控原因和和纠正措措施。项目：诊诊断抗血血清试验验质控程程序目的：保证诊断断抗血清清试剂的的正常使使用和试试验的准准确性及及安全性性负责人：：质控内容容：1.沙门菌属属、志贺贺菌属及及致病性性大肠菌菌等诊断断血清，，使用时时应注意意有效期期及效价价，并经经常用相相应的菌菌株检查查其有效效性。如如有变浊浊，表示示变质或或有菌污污染，不不能继续续使用。。2．对新购买买的沙门门菌属诊诊断血清清应用卫卫生部临临床检验验中心质质控菌株株甲型付付伤寒沙