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文档简介

1、微生物学实验 实验二（P74) 微生物测数稀释平板测数法 一、实验原理微生物测数：测定各类样品中微生物的数量。 土壤、食品、微生物制品（菌肥、农药等） 微生物测数方法DBCA稀释平板测数法显微镜直接计数法比 浊 法滤膜浓缩法稀释平板测数法原理： 又叫平板菌落计数法。 将待测样品经适当稀释之后，其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量稀释样液接种到平板上。经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数，根据其稀释倍数和接种量即可换算出样品中的含菌数。 优点：能够获得活菌的信息；对环境微生物分离纯化。 缺点：受多种因素限制，计数的结果比实际含

2、菌量偏低。 以小组为单位，用实验一准备的物品、采用稀释平板测数测定土壤样品中的细菌、放线菌、真菌 的数量。 学习无菌操作（接种、菌液稀释、倒培养基）的基本方法。二、实验内容马丁氏培养基接种液稀释浓度：细菌：104、105、106放线菌：103、104、10-5真 菌：10-2、10-3、10-4每组每个稀释度作2个重复，共6个人平板四、实验结果观察与计算 菌落计数 培养后取出培养平板，计数平板上的菌落数,计算出同一稀释度2个平板上的菌落平均数。 计算 含菌量（CFU）/g(ml)鲜样=（计数皿平均菌落数计数皿稀释倍数）接种量 含菌量（CFU）/g(ml)干样= CFU /g(ml)鲜样样品水分系数样品水分系数=1/(1-样品水分含量) CFU： colony forming units，菌落形成单位计数皿的选择方法1.只有一个稀释度的平均菌落数符合范围： 选择该稀释度计算含菌数。2.两个稀释度的菌落数符合范围： 高稀释倍数菌落数稀释倍数 低稀释倍数菌落数稀释倍数 比值2，取稀释倍数较低的菌落平均数计算CFU。3.所有的稀释度平均菌落数300或100： 按稀释倍数最高的平均菌落数计算。4. 所有的稀释度平均菌落数10或30： 按稀释倍数最低的平均

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