免疫分析技术之ELISA共106张课件

1、免疫分析技术之ELISA王娟聪明出于勤奋，天才在于积累免疫分析技术之ELISA王娟聪明出于勤奋，天才在于积累弟度分祈技术之 ELISA广东省功能蛋白质组学重点实验室王娟弟度分祈技术之 ELISA免疫学检测技术细胞水平分子水平基因水平体外(或体内)测定测定各类免疫球蛋白、测定免疫应答相关基各类细胞及其亚群的补体、细胞因子及其因的表达与调控、免数量和效应,从而受体、黏附分子的表疫分子的遗传多态性解机体的细胞免疫水达水平和生物活性及基因型别分析从而了解机体免疫因子间的相互关系免疫学检测技术ELISA概念酶联免疫吸附实验( Enzyme Linked ImmunoSorbent assay, ELIS

2、A),是在免疫酶技术( immunoenzymatic techniques)上发展起来的种新型免疫测定技术,基础是:抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的标记。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,由此进行定性或定量分析。ELISA概念酶免疫测定类型均相酶免疫测定酶免疫测定非均相酶免疫测定液相酶免疫测定这种固相酶免疫测定方法在1971年最初建立时称为酶联免疫吸附剂测定,简称 JELISA酶免疫测定类型1.1抗原抗体反应1.1.1可逆性抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡,其反应式为Ag+AbAg:Ab抗体的亲和力( affinity),

3、可以用平衡常数K表示K=AgAb/AAb,AgAb的解离程度与K值有关。高亲和力抗体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合两者结合牢固,不易解离。解离后的抗原或抗体均能保持原有的结构和活性1.1抗原抗体反应1.1.2特异性抗原抗体的结合发生在抗原的决定簇与抗体的结合位点之间。化学结构和空间构型互补关系,具有高度的特异性。测定某一特定的物质,而不需先分离待检物1.1.2特异性113敏感性化学比色法的敏感度为mg/m水平酶反应测定法的敏感度约为5-10g/ml免疫测定中凝胶扩散法和浊度法的敏感度与酶反应法相仿标记的免疫敏感度可提高数千倍,达ng/m水平例如,HBsA9,其敏感度可达01ng

4、/113敏感性1.2免疫测定在临床检验中的应用由于各种抗原成份,包括小分子的半抗原,均可用以制备特异性的抗血清或单克隆抗体,利用此抗体作为试剂就可检测标本中相应的抗原,因此免疫测定的应用范围极广1.2免疫测定在临床检验中的应用基本原理使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性.使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的

5、比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析由于酶的催化频率很高,故可极大地地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。基本原理ELISA的类型ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三个必要的试剂(1)固相的抗原或抗体,即免疫吸附剂( immunosorbent);(2)酶标记的抗原或抗体,称为结合物”( conjugate);(3)酶反应的底物可设计出各种不同类型的检测方法ELISA的类型免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之E

6、LISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析

7、技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件

8、免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共10

9、6张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELIS

10、A共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件免疫分析技术之ELISA共106张课件谢谢！21、要知道对好事的称颂过于夸大，也会招来人们的反感轻蔑和嫉妒。培根22、业精于勤，荒于嬉；行成