罗氏试剂盒说明书 DHEA-S 12175690001-en-t

1、硫酸脱氢表雄酮Dehydroepiandrosterone sulfate12175690001V14硫酸脱氢表雄酮Dehydroepiandrosterone sulfate Elecsys 和 cobas e 分析仪 4/5 2008-05, V 14中文2009-05, V 14中文 5/5 Elecsys 和 cobas e 分析仪03000087 122 100测试本试剂盒适用的分析仪Elecsys 1010Elecsys 2010MODULAR ANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601主要用途用免疫学方法定量测定人血清或血浆中硫酸脱氢表雄酮（DHEA

2、-S）含量。电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Elecsys和cobas e免疫测定分析仪。临床应用DHEA-S（硫酸脱氢雄甾酮）是一种由肾上腺皮质网状带和阔筋膜内的胆固醇前体物质产生的类固醇类激素。1检测DHEA-S值升高有助于诊断妇女多毛症和女性男性化。2，3除了对妇女多毛症和女子男性化进行鉴别诊断，该检测值还可用于诊断各种雄性化，高催乳素血症，多囊卵巢综合症和排除肾上腺皮质产生雄激素的肿瘤。2DHEA-S仅表现出微弱的雄激素活性，但其代谢产物，例如雄烯二酮和睾丸酮的雄激素活性较强，能间接引起妇女多毛症和女子男性化。2,4从七岁起，可检测到DHEA-S值逐步升高，在三十岁之后又逐步下降。5

3、仅DHEA-S的单纯升高具有临床意义；其它导致DHEA-S过度产生的因素包括遗传性肾上腺皮质酶缺陷（肾上腺性腺综合症），6肾上腺皮质增生和产生雄激素的肿瘤。2DHEA-S分泌入血的速率仅仅比DHEA略快。但由于DHEA-S的半衰期约为一天，DHEA-S的浓度比DHEA要高约一千倍。7DHEA-S相对更容易与白蛋白结合，仅有一小部分不与蛋白质结合，且不会与性激素结合球蛋白（SHBG）结合。8由于它的高浓度以及在日内和日间变异性小的特点，DHEA-S是肾上腺皮质激素诊断相关疾病的良好指标。7,9结合睾丸酮测定DHEA-S是了解妇女多毛症患者雄激素水平是否提高的初筛试验中值得选择的方法。大约84%的

4、妇女多毛症患者中的雄激素水平升高。10该检测的主要目的是排除产生雄激素的肿瘤（来自肾上腺皮质或卵巢）。患肿瘤的妇女中DHEA-S的含量超过700ug/dL。6Elecsys DHEA-S检测采用竞争检测原则，使用了特异性抗DHEA-S的多克隆抗体（兔）。样本中内源性DHEA-S与钌标记的DHEA-S衍生物一起竞争生物酰化抗体上的结合位点。a)Tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)三联吡啶钌检测原理双抗体夹心法，总检测时间：18分钟第一次孵育：15l标本、生物素化的DHEA-S特异性抗体一起反应生成一种免疫复合物，该复合物的量取决于样本

5、中分析物的浓度。第二次孵育：添加包被链霉亲和素的磁珠微粒和钌标记的DHEA-S衍生物后，随着抗体半抗原复合物的形成，生物素化抗体的空白位点被占据。该复合物通过生物素和链霉素之间的反应结合到微粒上。将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除。给电极加以一定的电压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。仪器自动通过2点校正的定标曲线计算得到检测结果。试剂工作溶液M包被链霉亲和素的磁珠微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml；包被链霉亲和素的磁珠微粒，0.72mg/ml；防腐剂。R1 生物素化的抗DHEA-S抗体（灰盖），1瓶，9mL：生物

6、素化抗DHEA-S多克隆抗体（兔）600ng/L；磷酸盐缓冲液100mmol/L，pH 值6.8；防腐剂。R2 Ru(bpy)32+标记的抗DHEA-S抗体（黑盖），1瓶，9mL；钌标记的DHEA-S衍生物（合成）0.5ng/mL；磷酸盐缓冲液100mmol/L，pH值6.8；防腐剂。警告和注意事项仅用于体外诊断。在使用本试剂盒时必需遵循所有试验室试剂操作的注意事项。所有废弃物必需按照当地法规进行处置。专业人员可要求获得安全数据报告。避免试剂和样本（样本、定标液和质控品）产生气泡。试剂处理试剂盒（M、R1和R2）为即用型，不能分开使用。试剂相关信息可以通过试剂条形码阅读获取。储存及稳定性存放于

7、28请垂直摆放Elecsys DHEA-S试剂盒，确保使用前仪器通过自动搅拌能够完全混匀磁珠微粒。稳定性：未开封试剂，28有效期内均可使用开封试剂，2812周放置分析仪MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 6018周放置分析仪Elecsys 2010 和 cobas e 411上8周放置分析仪Elecsys 2010上4周（交替储存在冷藏室和分析仪上室温20-25样本的采集和准备仅以下罗列的样本通过检测要求。血清样本须用标准试管或有分离胶的真空管收集。肝素锂、肝素钠、肝素铵、K3-EDTA、枸橼酸钠、草酸钾和氟化钠抗凝的血浆都适用。标准：回收率在血清值的90-110%以

8、内或斜率0.9-1.1截距0.95。稳定性：2-8保存2天，-20保存2个月。样本只能冰冻选择合适的试管进行不同类型样本的采集，不是所有的试管均可用于检测。不同厂商的样本采集系统可能含有不同的物质，某些情况下会影响检测结果。如果使用原始管进行检测（样本前处理系统）时，应遵循生产商所提供的指导。有沉淀的样本和冰冻样本检测前必须先作离心处理。避免使用热灭活的样本。避免使用添加叠氮化合物的样本和质控品。检测前，样本、定标液及质控品须室温平衡(20-25由于蒸发因素的影响，样本、定标液及质控品在分析仪上的检测必须2小时内完成。提供的物品参阅“试剂工作溶液”章节。需要的物品（未提供）货号03000095

9、122，DHEA-S定标液，41mL货号11731416122，PreciControl Universal，PreciControl Universal 1和2分别为23mL，或货号11731416190，PreciControl Universal，PreciControl Universal 1和2分别为23mL货号11731416160，PreciControl Universal，PreciControl Universal 1和2分别为23mL（美国专用）实验室基础设备Elecsys 1010/2010、MODULAR ANALYTICS E170或cobas e分析仪Elecsy

10、s 1010/2010和cobas e 411分析仪所需材料：货号11662988122，ProCell，6380 mL，系统缓冲液货号11662970122，CleanCell，6380mL，测量池洗液 货号11930346122，Elecsys SysWash，1500mL，附加洗液货号11933159001，SysClean适配器货号11706829001，Elecsys 1010分析杯，1232反应管或货号11706802001，Elecsys 2010分析杯，6060反应管货号11706799001，Elecsys 2010分析吸头，30120移液管吸头MODULAR ANALYTI

11、CS E170和cobas e 601分析仪所需材料：货号04880340190，ProCell M，22L货号04880293190，CleanCell M，22L货号12135027190，CleanCell M，12L货号03023141001，PC/CC杯，12个用于在检测前预热Procell M及Cleancell M货号03005712190，ProbeWash M，1270mL 清洗液，用于在检测完毕后或更换试剂时清洗试剂针货号12102137001，反应杯/吸头组合装84反应杯/吸头组合装48盒，废物袋 货号03023150001，WasteLiner，废物袋 货号030276

12、51001，系统清洁适配器M所有分析仪需要：货号11298500316，Elecsys SysClean，5100mL系统清洗液美国专用：货号03004970122，Elecsys DHEA-S CalCheck，3种浓度范围检测要优化检测性能，请遵照本说明书中有关分析仪的相关指导，并参照分析仪操作手册。MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析仪：必须使用PreClean M溶液。试剂使用前分析仪自动搅拌磁珠微粒，使其处于悬浮状态。试剂相关信息可通过条形码自动读取，在特殊情况下，分析仪无法自动读取条码信息时，请输入条码标签上的15位数字序列。MODULAR AN

13、ALYTICS E170、Elecsys2010和cobas e分析仪：将冷藏试剂室温平衡至20C左右，放置分析仪的试剂盘（20C）内。避免泡沫产生。分析仪能自动调节试剂温度和开、关各试剂盒瓶盖。Elecsys 1010分析仪：将冷藏试剂室温平衡至20-25C左右，放置分析仪的样本盘/试剂盘（室温20-25C）内。避免泡沫产生。使用前手工打开瓶盖，使用后手工关上瓶盖。使用后储存在2定标溯源性：通过使用比重测定法生产的厂商定标液（在去除特异组分的人血清基质中含确定浓度的DHEA-S）进行标准化。每个Elecsys DHEA-S试剂组都有一张条形码编码的标签，其中含有定标各个试剂批次的专用信息。通

14、过使用Elecsys DHEA-S定标液，预定义的厂商定标曲线适用于分析仪。定校频率：新鲜试剂必须进行定标（新试剂盒注册后在分析仪上放置不能超过24小时）。以下情况建议重新进行定标：MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys 2010和cobas e分析仪：使用同一批号试剂，1月后（28天）7天后（同一试剂盒在分析仪上使用）Elecsys 1010分析仪：使用每个试剂盒7天后（室温20-253天后（室温20-32所有分析仪：根据需要：如失控。质控质控可使用Elecsys PreciControl Universal 1和2。多个浓度范围的质控品至少每24小时内检测一次，每次更

15、换试剂盒或定标后也须进行质控。每个实验室可根据各自的情况设定合适的控制限和质控周期。质控值必须处于规定的控制限内。若失控每个试验室必须采取相应的纠正措施。质控应遵循地方规则和当地指引。计算分析仪自动计算每份样本的分析物浓度（以mol/L、g/dL或g/mL为单位）。转换因子：mol/L36.846g/dL g/dL0.02714mol/L g/dL0.01g/mL干扰因素本测定法不受黄疸（胆红素222mol/L或13mg/dL）、溶血（血红蛋白0.35mmol/L或0.56g/dL）、脂血（脂肪乳剂Intralipid2000mg/dL）和生物素5mg/天），必须在末次生物素治疗8小时后采集样

16、本。浓度为600 IU/ml的类风湿因子对检测无影响。体外对17种常用药物进行试验，未发现会影响检测结果。少数病例中极高浓度分析物特异性抗体，链霉素抗体和钌抗体会影响检测结果。适合的试验设计可将影响因素降到最低。作为诊断指标，必须结合患者病史，临床检查和其他临床资料来综合评估检测结果。检测范围0.003-27mol/L或0.100-1000g/dL（通过最低检出限和厂商定标曲线的最高值确定）。低于检出限的值报告0.003mol/L或27mol/L或1000g/dL(1：5稀释结果可报告至135mol/L或5000g/dL)。线性范围：1.09-27mol/L或40-1000g/dL稀释高于检测

17、范围的标本可用分析物含量较低的人样本稀释。建议1：5稀释。稀释标本的DHEA-S浓度必须高于 1.5mol/L（45g/dL）。如果内源性DHEA-S浓度可忽略，结果应乘稀释倍数或使用以下方程进行计算。Cc4（cD）C样本中正确的DHEA-S浓度c检测的DHEA-S浓度D稀释样本（人样本）中DHEA-S浓度期望值使用Elecsys DHEA-S检测的扩展研究在德国的两个临床中心进行，研究纳入总共519份来自女性个体的样本、489份来自男性个体的样本和269份来自儿童的样本，得出各年龄组的参考范围如下（研究协议编号：C00P032和P01P005状态05/01至11/01）：*检验了绝经对相应年

18、龄组女性样本结果的影响，发现该效应可忽略不计。由于母体激素可透过胎盘屏障，新生儿的DHEA-S值很大程度上受母体激素的影响。每个实验室应通过实验确定参考范围的适用性，必要时建立本实验室的参考范围。特殊的性能指标试剂在各分析仪上的性能试验数据如下。各实验室得出的数据可能会稍有差异。精密度NCCLS（国家临床实验室标准委员会）的改良协议（EP5-A）应用Elecsys试剂盒、人血清样本和质控品验证重复性：每日6次，共10天（n=60）；MODULAR ANALYTICS E170分析仪上验证批内精密度：n21。下面是获得的结果。b）HS人血清c）PC UPreciControl Universal

19、分析灵敏度（最低检出限）0.003mol/L（0.10g/dL）最低检出限指区别于零浓度的分析物最低检测浓度。最低检出限是最低浓度标准品+2SD得到的浓度（厂商定标品1+2SD，批内精密度，n=21）。方法学比较使用临床标本比较Elecsys DHEA-S检测（y）和市面上有售的Elecsys DHEA-S检测（x），相关性数据如下（g/dL）：标本数：603Passing/Bablok12 线性回归y1.06x4.78 y0.94x14.0r0.865 r0.952样品浓度约为0.33至19.8mol/L（12至730g/dL）。分析特异性对于使用的抗体衍生物，发现以下交叉反应性（）：a）加

20、入的底物，每1000g/dL：雄烯二酮 0.399DHEA 0.178b) 加入的底物，每2000g/dL：雄甾酮 0.033睾酮 0.033c) 加入的底物，每5000g/dL：醛固酮 0.008葡糖苷酸盐雄酮 0.014硫酸雄酮 0.137葡糖苷酸盐DHEA 0.020雌二醇 0.005雌二醇-3-硫酸酯-17-葡糖苷酸盐 0.009雌三醇 0.006雌酮 0.012雌酮-3-硫酸酯 0.136黄体酮 0.0345-双氢睾酮 0.02819-羟雄烯二酮 0.018d) 加入的底物，每10000g/dL:可的松 0.004参考文献1. Bindlingmaier F. Nebennieren

21、rindenhormone. In: Greiling H, Gressner AM (ed.). Lehrbuch der Klinischen Chemie und Pathobiochemie. 3. Auflage, Stuttgart; New York: Schattauer 1995:1025-1031,1036.2. Goldfien A, Monroe SE. Ovaries. In: Greenspan FS, Baxter JD (eds), Basic & Clinical Endocrinology, 4th edition, Appleton & Lange, US

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