罗氏试剂盒说明书 T4 11965263001V14

1、11965263001V14甲状腺素（thyronine，T4） Elecsys 和 cobas e 分析仪 5/5 2009-05, V 14 12017709 122 200测试本试剂盒适用的分析仪Elecsys 1010Elecsys 2010MODULAR ANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601主要用途用于体外定量检测人体血清或血浆中的甲状腺素。Elecsys和cobas e 免疫分析仪的工作原理是电化学发光免疫分析“ECLIA”。临床应用甲状腺激素（T4）由甲状腺生成并分泌，是下丘脑-垂体-甲状腺激素调节系统的组成部份，具有调节机体代谢的作用。甲状腺

2、素在甲状腺组织内由DIT（3,5-二碘酪氨酸）双分子结合而成，并与甲状腺球蛋白结合贮存于甲状腺滤泡腔内。机体根据生理需要通过TSH的调节分泌T4。1，2血清中大部份的T4（99%）是以与蛋白结合的形式存在。评价血清甲状腺激素水平时必须考虑血清中的转运蛋白浓度受内源或外源性因素的影响。如果忽略了结合蛋白浓度的变化（如雌激素类物质的使用，妊娠期或者肾病综合征）将导致甲状腺代谢状况的错误评估。3，4，5，6，7检测T4临床可应用于甲状腺功能亢进的诊断，原发或继发性甲状腺功能减退的诊断，TSH抑制治疗的效果监测。8Elecsys T4检测采用竞争法原理和特异性的T4抗体。使用8-苯基-1-萘磺酸（AN

3、S）释放内源性的T4与添加的生物素化的T4衍生物竞争结合钌复合物标记抗体的结合位点。aa)Tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)三联吡啶钌检测原理竞争法，总检测时间：18分钟第一次孵育：15l样本和钌复合物标记的特异性抗T4抗体一起孵育；样本中与结合蛋白结合的T4受ANS作用而释放。第二次孵育：添加生物素化的T4和包被链霉素的磁珠微粒，前者将与未结合的标记结合，形成抗体-半抗原复合物。复合物通过生物素、链霉素之间的反应结合到微粒上。将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除。给电

4、极加以一定的电压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。Elecsys软件自动通过定标曲线计算得到检测结果。试剂工作溶液M包被链霉素的磁珠微粒（透明瓶盖），每瓶12ml；包被链霉素的磁珠微粒，0.72mg/ml；防腐剂。R1钌复合物标记的Anti-T4抗体（灰色瓶盖），每瓶18ml：钌复合物标记的单克隆Anti-T4抗体（羊），100 ng/mL；ANS 1 mg/mL；磷酸盐缓冲液100 mmol/L，Ph7.4; 防腐剂。R2 生物素化的T4（黑色瓶盖），每瓶18ml：生物素化的T4 20 ng/mL；磷酸盐缓冲液100 mmol/L，pH7.4; 防腐剂。警告和注意事项仅用于体

5、外诊断。在使用本试剂盒时必需遵循所有试验室试剂操作的注意事项。所有废弃物必需按照当地法规进行处置。专业人员可要求获得安全数据报告。避免试剂和样本（样本、定标液和质控品）产生气泡。试剂处理试剂盒（M,R1和R2）为即用型，不能分开使用。试剂相关信息可以通过试剂条形码阅读获取。储存及稳定性存放于28。请垂直摆放Elecsys T4试剂盒，确保仪器的自动搅拌器能够完全混匀磁珠微粒。稳定性：未开封试剂，28有效期内均可使用开封试剂，2812周放置分析仪MODULAR ANALYTICS E170 和cobas e 601上8周放置分析仪Elecsys 2010 和 cobas e 411上8周放置分析

6、仪Elecsys 1010上8周（试剂交替放置于冰箱和20-25的分析仪中，持续开盖的情况下至多20小时）样本的采集和准备仅以下罗列的样本类型通过测试并符合检测要求。血清样本须用标准试管或有分离胶的真空管收集。肝素锂、钠，K3-EDTA，枸橼酸钠抗凝的血浆都适用。如果使用枸橼酸钠抗凝的血浆结果必须+10纠正。标准：回收率90-110%，斜率0.9-1.1，截距0.95。如果使用氟化钠/草酸钾抗凝的血浆，结果比血清要偏低26。稳定性： 2-8可保存7天；-20可保存30天9，一次冻融。选择合适的试管进行不同类型样本的采集，不是所有的试管均可用于检测。不同厂商的样本采集系统可能含有不同的物质，某些

7、情况下会影响检测结果。如果使用原始管进行检测（样本前处理系统）时，应遵循生产商所提供的指导。有沉淀和冰冻的样本检测前必须先作离心处理。避免使用热灭活的样本。添加叠氮化合物的样本和质控品均不能使用。检测前，样本、定标液及质控品须室温平衡(20-25)。由于蒸发因素的影响，样本、定标液及质控品在分析仪上的检测必须2小时内完成。提供的物品参阅“试剂工作溶液”章节。需要的物品（未提供）货号12017717122, T4 CalSet, 规格4 x1 ml货号11731416122, PreciControl Universal，规格2 x3 ml，分别为PreciControl Universal 1

8、和2或货号11731416190, PreciControl Universal，规格2 x3 ml，分别为PreciControl Universal 1和2实验室基础设备Elecsys 1010/2010 、MODULAR ANALYTICS E170或cobas e分析仪Elecsys 1010/2010和cobas e 411分析仪所需材料：货号11662988122, ProCell, 6 x 380 mL ,系统缓冲液货号11662970122, CleanCell, 6 x 380 mL,测量池洗液 货号11930346122, Elecsys SysWash, 1 x 500

9、mL 附加洗液货号11933159001, SysClean 适配器 货号11706829001, Elecsys 1010分析杯, 12 x 32反应管或者货号11706802001, Elecsys 2010 分析杯, 60 x 60 反应管货号11706799001, Elecsys 2010 分析吸头, 30 x 120 移液管吸头 MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析仪所需材料：货号04880340190,ProCell M, 2 x 2 L 系统缓冲液货号04880293190, CleanCell M, 2 x 2 L测量池洗液 货号03023

10、141001, PC/CC杯, 12个用于在检测前预热Procell M及Cleancell M。货号03005712190,ProbeWash M, 12 x 70 mL 清洗液，用于在检测完毕后或更换试剂时清洗试剂针。货号12102137001,反应杯/吸头 组合装,84反应杯/吸头 组合装48盒,废物袋 货号03023150001, WasteLiner,废物袋 货号03027651001,系统清洁适配器 M所有分析仪需要：货号11298500316, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL 系统清洗液 检测要优化检测性能，请遵照本说明书中有关分析仪的相关指导，并参照分

11、析仪操作手册。试剂使用前分析仪自动搅拌磁珠微粒，使其处于悬浮状态。试剂相关信息可通过条形码自动读取，在特殊情况下，分析仪无法自动读取条码信息时，请输入条码标签上的15位数字序列。MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys2010和cobas e分析仪：将冷藏试剂室温平衡至20C左右，放置分析仪的试剂盘（20C）内。避免泡沫产生。分析仪能自动调节试剂温度和开、关各试剂盒瓶盖。Elecsys 1010 分析仪: 将冷藏试剂室温平衡至20-25C左右，放置分析仪的试剂盘（20- 25C）内。避免泡沫产生。使用前后手动开关试剂盒瓶盖。使用后保存于2-8C冰箱。定标溯源性：Elecsy

12、s T4 检测可溯源至同位素稀释气相色谱/质谱检测。10每套Elecsys T4试剂的条码标签上均含有其批号特异的定标信息。使用Elecsys T4 定标液可调整定标曲线。定校频率：新批号试剂必须进行定标（新试剂盒在分析仪上放置不能超过24小时）。以下情况建议重新进行定标：MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 和cobas e 分析仪:使用同一批号试剂，1月后（28天）7天后（同一试剂盒在分析仪上使用）Elecsys 1010 分析仪:每盒试剂7天后（室温 20-25C）3天后（室温 25-32C）所有仪器根据需要：如失控。质控室内质控可使用Elecsys

13、PreciControl Universal 1和2。也可以使用其他合适的质控品。各浓度质控至少每24小时内检测一次，每次更换试剂盒或定标后也须进行质控。每个实验室可根据各自的情况设定合适的控制限和质控周期。质控值必须处于规定的控制限内。若失控每个试验室必须采取相应的纠正措施。请遵循政府或行业导则关于质控的规定。计算仪器会自动计算每个样本中的分析物浓度，单位是nmol/L，ug/dL或ng/L。转换因子:nmol/L0.077688=ug/dLug/dL12.872nmol/L nmol/L0.77688=ug/L 干扰因素检测结果不受黄疸（胆红素633mol/L或37 mg/dL）, 溶血（

14、血红蛋白1.4 mmol/L或 2.3 g/dL）, 脂血(甘油三酯28.5 mmol/L或 2500mg/dL)和生物素409 nmol/L或 5mg/天），必须在末次生物素治疗8小时后采集样本。浓度高达2400 IU/ml的类风湿因子和血液透析样本均对检测无影响。体外对15种常用药物进行试验,除治疗剂量水平的速尿会升高T4结果外，其他药物未发现会影响检测结果。接收含有D-T4成份降脂药物治疗的病人不能检测T4。如果需要对这类病人进行甲状腺功能的检测，必须停药46周，使生理状态回复正常后方能进行。11甲状腺激素的自身抗体干扰检测。结合蛋白异常，如FDH患者 (家族性异常白蛋白高甲状腺素血症)

15、在特定条件下可能会导致检测值偏离预期结果。12少数病例中极高浓度的链霉素抗体和钌会影响检测结果。这类影响可通过适宜的实验设计进行消除。作为诊断指标，必须结合患者病史，临床检查和其他临床资料来综合评估检测结果。检测范围5.40-320.0 nmol/L或O.420-24.86 ug/dL（通过最低检出限和厂商定标曲线的最高值确定）。低于检出限的值报告320 nmol/L或24.86 ug/dL。稀释由于检测范围较宽无须对标本进行稀释。期望值通过使用Elecsys T4检测德国和日本共2526份甲状腺功能正常的健康个体的样本，取2.5th和97.5th的百分位点值获得：66-181 nmol/L或

16、5.1-14.1 ug/dL通过使用Elecsys T4和Elecsys T-摄取检测825份状腺功能正常的健康个体的样本获得FT4（T4/TBI）指数并计算得到的期望值（取2.5th和97.5th的百分位点值）为：62-164 nmol/L或4.8-12.7 ug/dL如果需要获取儿童、青春期和妊娠妇女的参考区间信息可参见名为儿童和成人参考区间的小册子，货号：04640292（英语）；04625889（德语）。该手册还包含了参考人群组的甲状腺参数影响因素的研究结果。参照NACB导则的入选及排除规则也罗列在内（如：甲状腺超声检测的体积和密度）。每个实验室应通过实验确定参考范围的适用性，必要时建

17、立本实验室的参考范围。特殊的性能指标试剂在分析仪上的性能试验数据如下。各实验室由于具体情况不同，所得出的数据可能会稍有差异。精密度应用Elecsys试剂盒、人混合血清和质控品验证重复性，按照CLSI的EP5-A执行：每天6次，共10天 (n=60)。批内精密度由 MODULAR ANALYTICS E170分析仪完成，n=21下面是获得的结果。b) HS =人血清c) PC U = PreciControl Universal分析灵敏度（最低检出限）5.4 nmol/L（0.42 ug/dL）最低检出限是指区别于零浓度的最低分析物水平。最低检出限是最低浓度标准品+2SD得到的浓度（厂商定标品1

18、+2SD，批内精密度，n=21）方法学比较使用临床标本比较Elecsys T4检测和酶免 T4 检测，相关性数据如下（nmol/L）：标本数n=71Passing/Bablok23 线性回归y = 0.77x + 7.77 y = 0.75x + 9.88r = 0.841 r = 0.975比较样品浓度约为8250 nmol/L(0. 619 ug/dL)。分析特异性抗体交叉反应如下：L-T4和D-T4 100%; L-T3 1.53；D-T3 1.38；3-rT3 0.002%;3,5-二碘-L-酪氨酸 0.01%; 3,3,5,5-tetra-iodothyroacetic acid 3

19、8.5%.参考文献1. Wheeler MH, Lazarus JH. Diseases of the Thyroid. London, Glasgow, Weinheim, New York, Tokyo, Melbourne, Madras:2. Pfannenstiel P, Saller B. Schilddrsenkrankheiten Diagnose und Therapie. Berliner Medizinische Verlagsanstalt GmbH, 1995;2:43-62,97-106.3. Wenzel KW. Pharmacological interfere

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