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文档简介
1、细胞工程植物细胞工程动物细胞工程植物组织培养技术植物体细胞杂交技术植物细胞工程的实际应用动物细胞培养动物体细胞核移植技术动物细胞融合单克隆抗体1-细胞工程植物细胞工程动物细胞工程植物组织培养技术植物体细胞杂细胞工程植物细胞工程动物细胞工程植物组织培养技术植物体细胞杂交技术植物细胞工程的实际应用动物细胞培养动物体细胞核移植技术动物细胞融合单克隆抗体2-细胞工程植物细胞工程动物细胞工程植物组织培养技术植物体细胞杂离体的植物器官、组织或细胞(外植体)愈伤组织根、芽植物体脱分化再分化无菌营养:一定的外界条件植物激素:细胞分裂素 生长素有机物 无机盐 水分遮光一定的光照芽发育成叶,叶肉细胞中叶绿素的合成
2、需要光照排列疏松而无规则,高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞如:胡萝卜的形成层、菊花幼茎段、月季的花药植物组织培养技术返回3-离体的植物器官、组织或细胞(外植体)愈伤组织根、芽植物体脱分 (1)愈伤组织: 排列疏松、高度液泡化而无定形状的薄壁细胞。无叶绿体,蔗糖供能,代谢类型为异养需氧型,进行有丝分裂。返回4- (1)愈伤组织: 排列疏松、高度液泡化而无定形状的 (2)植物细胞的脱分化: (3)植物细胞的再分化: 就是让已分化的细胞,经过诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程,又称去分化。实质是提高细胞的全能性过程,结果是形成愈伤组织 脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化形
3、成胚状体或丛芽的过程。(避光) (需光,自养需氧型) 5- (2)植物细胞的脱分化: (3)植物细胞的再分化: (4)决定植物脱分化、再分化的关键因素是什么?植物激素的种类和比例。生长素用量细胞分裂素用量适中:诱导愈伤组织高:利于根的分化、抑制芽的形成(胚状体)低:利于芽的分化、抑制根的形成(丛芽)返回6-(4)决定植物脱分化、再分化的关键因素是什么?植物激素的种类融合的原生质体原生质体B原生质体A去壁去壁植物A细胞植物B细胞诱导融合再生出细胞壁杂种细胞脱分化 (细胞分裂)愈伤组织再分化杂种植株植物组织培养植物细胞融合植物体细胞杂交返回7-融合的原生质体原生质体B原生质体A去壁去壁植物A细1.
4、微型繁殖植物繁殖的新途径2.作物脱毒3.神奇的人工种子作物新品种的培育1.单倍体育种2.突变体的利用3.转基因植物的培育4.植物体细胞杂交细胞产物的工厂化生产返回8-1.微型繁殖植物繁殖的新途径2.作物脱毒3.神奇的人工种子作过程:阅读课本P44-45取动物组织块剪碎组织用胰蛋白酶处理分散成单个细胞转入培养液,制成细胞悬液进行原代培养贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶处理分散成单个细胞,制成细胞悬液转入培养液中进行传代培养放入二氧化碳培养箱中培养冷冻保存9-过程:阅读课本P44-45取动物组织块剪碎组织用胰蛋白酶处理动物胚胎或幼龄动物器官组织剪碎胰蛋白酶细胞悬液10代细胞原代培养50代细胞贴壁生长接触抑
5、制传代培养无限传代细胞株细胞系培养液适宜环境对于目前使用或冷冻保存的细胞有什么要求?遗传物质未改变遗传物质已改变目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内,以保持细胞正常的二倍体核型.二倍体核型:二倍体生物体细胞染色体组在有丝分裂中期的表现,是染色体数目、大小、形态特征的总和。返回10-动物胚胎或幼龄动物器官组织剪碎胰蛋白酶细胞悬液10代细胞原代M中期卵母细胞母绵羊母绵羊乳腺细胞细胞质细胞核细胞核移植早期胚胎卵裂C母绵羊子宫胚胎移植多莉羊分娩妊娠多莉羊的培育过程融合后的卵细胞体细胞核移植过程动物细胞培养返回11-M中期卵母细胞母绵羊母绵羊乳腺细胞细胞质细胞核细胞核移灭活的病毒颗粒黏附于细胞
6、表面细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜连接细胞融合,形成杂种细胞(细胞膜具有一定的流动性)生物法:灭活的病毒(丧失感染性、保留抗原结构)返回12-灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜连接细B淋巴细胞注射特定抗原蛋白骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞融合(只考虑两两融合)培养液中细胞有几种类型?融合细胞几种类型?骨髓瘤细胞-骨髓瘤细胞B淋巴细胞- B淋巴细胞B淋巴细胞-骨髓瘤细胞多种杂交细胞在具有筛选作用的培养基上培养专一抗体检验阳性克隆上述杂交细胞分开不同杂交细胞,克隆专一抗体,检验阳性细胞单克隆抗体注射到小鼠体内体外培养单克隆抗体的制备过程第1次筛选目的:得到杂交瘤细胞(多种)。第2次筛选目的:在杂交瘤细
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