PCR实验室程序性文件

1、XX 市第二人民医院基因扩增实验室质量体系文件WEY-JYK-PCR-CXWJ程 序 文 件编制： 审核： 批准：受控状态： 编号：在控WEY-JYK-PCR-CXWJ公布日期：2020.07.28实施日期：2020.07.28XX 市第二人民医院试验科修订页修订 修订的章序号条款简要修订内容批准人批准日期目录TOC o 1-1 h z u HYPERLINK l _TOC_250014 基因扩增实验室设置与管理程序1 HYPERLINK l _TOC_250013 实验室医疗废弃物物管理程序3 HYPERLINK l _TOC_250012 实验室记录管理程序5 HYPERLINK l _T

2、OC_250011 实验室生物防护程序7 HYPERLINK l _TOC_250010 仪器设备管理程序10 HYPERLINK l _TOC_250009 仪器设备校准程序13 HYPERLINK l _TOC_250008 实验室防污染程序15 HYPERLINK l _TOC_250007 试剂耗材管理程序19 HYPERLINK l _TOC_250006 标本的管理程序22 HYPERLINK l _TOC_250005 实验室检测结果报告程序24 HYPERLINK l _TOC_250004 实验室质量控制管理程序26 HYPERLINK l _TOC_250003 实验室检测

3、结果报告程序28 HYPERLINK l _TOC_250002 报怨处理程序30 HYPERLINK l _TOC_250001 试验进程中发生故障时的应急处理程序31 HYPERLINK l _TOC_250000 实验室清洁消毒程序33文件编号：版本公布日期：文件编号：版本公布日期：实施日期：XX市第二人民医院试验科WEY-JYK-PCR-CXWJA/0 2020.07.28PCR 实验室程序文件 PAGE PAGE 12基因扩增实验室设置与管理程序目的PCR 实验室管理制度。适用范围：PCR 实验室布局设置、仪器设备、日常操作。具体内容：个区，各区实验物品应有鲜明的标示，严禁混用。培训

4、上岗证方能进行基因扩增检测工作。行。及离心管、吸头等一次性用品的高压灭菌处理。工作人员应遵循单项走动的原则：试剂准备区标本制备区 扩增分析区。阳性关于照，必要时绘制质控图。实验结束后若关于照品结果出现异常时应立即暂扣本次结果，即时寻找原因并且加以纠正后，才能发出报告。人员在工作时也不能随意进出，以免造成不应有的污染。实验结束后应用 2000mg/L 以紫外线照射实验室。试验中使用过的吸头、离心管等应置于2000mg/L含氯消毒液中浸泡消毒后集中焚毁。实验室工作人员必需严格遵守本室一切制度。实验室医疗废弃物物管理程序目的：为防止实验室废弃物关于环境造成污染。适用范围：主要适用于实验室扩增前、扩增

5、后的废弃物处理。具体内容：收集实验室工作人员关于试验进程中产生的医疗废弃物应采取安全、有效、经济的隔离和处理方法，集中保存，统一处理。标识废弃物应装入黄色垃圾袋，一切收集传染性废物的容器都应物危害”标志。一切运输未经处理的废弃物的容器上都应有“生物危害”标志。包装一切的废弃物都必需进行包装，并且应依据废物的性质及数量选用适合的包装材料。应使用黄色聚乙烯或聚丙烯包装袋，并且应处治传染性废物的处治即减少或限制其潜在致病性的进程，灭菌和焚烧是最常用的处治方法。处治的主要目的是去除污染，使病源体数量减少到致病水平以下。产生的废液用化学消毒灭菌（0.55%含氯消毒剂处理121 进行（被处理物中心温度不低

6、于115），6090 分钟（不少于 20 分钟转运试验进程中产生的医疗废弃物必需在高压灭菌后才能离开实验 装卸。长途运输应请专业人员进行操作。实验室记录管理程序目的化管理。适用范围作记录、仪器使用和仪器维修保养记录、各区温度和湿度、各区人员流动记录、冰箱温度、室内清洁、报怨处理、加样器校准、温度计校准、仪器校准、室内质控等纪录。具体内容：PCR 仪运行结束，运行和结果文件应保存在专门的数据文件夹中。文件名应保持唯一性。记录要与实际相符。内容上划双红线，填上新内容，说明更改原因并且签名。实验室生物防护程序目的成环境污染。适用范围：临床基因扩增试验实验室全体人员。具体内容：操作程序操作。每天更换废

7、液缸的 5500mg/L 有效氯含量消毒液，并且保证5500mg/L 1/5 右。正确配置使用消毒液。实验台面日常清洁时使用 75的酒精擦拭。每区每天实验前3060 3060 min，并且作好记录。或地面一旦有标本污染时，应即时用含氯消毒液清洁，再用75%的酒精清洁桌面。质关于待，应严格依照实验室废弃物处理制度处理。2000mg/L 有效氯含量消毒液。在基因扩增试验实验室门上需贴上生物危害标志，非工作需 途径和预防方法。接触感染性物质的实验室人员必需作好个人防护，戴好手套、实验人员进入PCR离开时脱下该区的工作服，并且挂在指定的地方。工作结束后， 立即洗手才可离开。实验结束后必需立即关于工作区

8、进行清洁消毒。桌面在工作结束后，必需立即用消毒液（2000mg/L 75%酒精等）擦拭，并且将可移动紫外灯调至距实验台60-90cm 30-60min。保证实验室所用的实验消耗品均经过高压灭菌处理。制定防火、防盗措施：即时检查电线是否老化，发现隐PCR 作人员为安全员，负责工作完毕后检查门窗。要严格执行以上各项措施，并且定期由室负责人关于以上措施并且限期整改。6 3 6 12 个月各采血检查一次。实验中若发生标本破裂或外泄时，应立即停滞工作，将破5500mg/L 次氯酸钠溶液消毒污染75%1 仪器设备管理程序目的仪器设备的使用寿命。适用范围购置、验收、使用、校正和维持管理。具体内容：仪器购买原

9、则：根据医院有关规则本着“质优价廉”进行，所（并且能与基因诊断实验室的工作条件相符仪器的购买程序仪器厂家的确定：先由实验操作人员提出初步意见，提2 2 家以上（1 家亦可）器信息，提交医院招标审核讨论。仪器的购买：由药械科负责与供货商联系供货。作人员共通验收，在厂家的供货清单上签字。区的要求安放仪器。文件编号：版本公布日期：文件编号：版本公布日期：实施日期：XX市第二人民医院试验科WEY-JYK-PCR-CXWJA/0 2020.07.28PCR 实验室程序文件11启用日期、目前放置地点、设备责任人，并且应有仪器的标准操作 SOP 或其它技术资料复印件。常规仪器设备的操作使用程序仪器设备的使用

10、授权备。的操作使用程序并且经实验室负责人考核认可。PCR 完成实验室检测系统的建立，管理文件的撰写工作。仪器设备的使用仪器设备的使用严格遵守分区使用管理。规程。仪器设备的维持保养序”。进行处理，并且填写维修记录。文件编号：版本公布日期：文件编号：版本公布日期：实施日期：XX市第二人民医院试验科WEY-JYK-PCR-CXWJA/0 2020.07.28PCR 实验室程序文件 PAGE PAGE 22有相应的标签（绿色）下次校准或检定日期的记录。本实验室一切仪器、设备均为专用不外借。仪器设备校准程序目的：确保实验室仪器设备得到妥善的管理，确保检测质量。适用范围：本程序适用于适用于实验室一切的仪器

11、设备。具体内容：校准方法：依据。移液器校准外送专业机构专业人员进行校准。干式恒温器使用经质量检定的温度计进行自行校准。移动紫外线消毒车由实验室工作人员季度关于紫外灯管的紫外线进行测试。新灯管要求紫外线强度大于或等于90UW/cm2, 70 UW/cm2并且将此作为校准依据。校准计划启用校准：设备在投入使用时实施启用校准。周期校准：设备在投入使用后，每年实施一次校准。EQA，IQC 存在结果漂移或偏差及其它可疑情况时，经过分析关于可疑设备即时实施校准。PCR 再取下一个区的移液器进行校准。校准安排在不进行样本检测的日期完成。实验室防污染程序目的,性结果的干扰，保证检测质量。适用范围染的控制。具体

12、内容：污染的定义：PCR PCR 试剂污染，PCR 扩增产物的污染，实验中克隆质粒的污染。预防污染即从样本采集到样本检测各阶段及实验室环境各方面进行控制以防止污染的发生。污染的预防实验室的基本设置临床基因扩增试验实验室分三个区，（1）试剂准备区，（2）标本处理区，（3）扩增分析区。各区相应隔离，有独力缓冲间，并且遵循从123 区的单方向工作。各区有完备的清洁及消毒措施，并且定期清洁和消毒。各区物品严格分开，不能串用。微量移液器应定区使用，定期校准，定时灭菌（半年灭菌一次，或浸泡或高压，周期与校准相契合）。标本的采集和保存PCR 三个工作区以外，根据不同的实验项目要求采集标本根据相应要求进行保存

13、。试剂选择 优先选用使用 UNG/UTP 剂。技术人员 技术人员进行岗前培训及定期考核，以确保PCR 操作避免气溶胶的污染。质量保证染的发生。照。结果的精确。2000mg/L 消毒清洁工作台，长时间紫外照射消毒实验室空气及工作台面和其他实验设备。污染源的查找试剂污染:设立阴阳性关于照,有利于监测反映体系各 且反复性好的样本，因强阳性关于照可产生大量不必 要的扩增序列，反而可能成为潜在的污染源。每次 扩增阴性关于照除囊括一般阴性关于照（阴性血清）均应囊括 PCR 体系中各试剂的试剂关于照，即囊括PCR 反映所需的全部成分，而不加模板NA，这关于PCR 产物残留污染是非常有益的。如果扩增结果中试剂

14、关于照为阳性结果，就是某一种或数 种试剂被污染了。此时，要全部更换一批新的试剂 进行扩增，扩增时设立不同的反映管，每一管含有 较严密，则考虑可能为环境污染。环境污染中常见的污染源主要有：模板提取时真空抽干装置；离心机；冰箱门把手，冷冻架，门把手或实验台面等。可用擦拭实验来查找可疑污染源。用无菌水浸 去离子水浸5ml PCR 实验。气溶胶污染:如果经过上述追踪实验，仍不能查找到确切污染源，则污染可能是由空气中PCR 产物的气溶胶造成的，此时就应该更换实验场所，若条件不 允许，则重新设计新的引物（与原引物无相关性）1mol/L NA 法：紫外波长254/300nm1 :丢弃已污染的反映液。试剂耗材

15、管理程序目的：规则试剂购买原则、验收的程序和试剂的正确贮存。适用范围：本程序适用于实验室所购的诊断试剂盒、实验耗材。具体内容：试剂的购买和管理试剂购买原则：PCR 与实验室所使用仪器配套，所购试剂必需三证齐全。试剂购买程序2 2家以上（1 家亦可）试剂信息，将申请提交药械科，药械科与经销商议价。1 请单，交由药械科与供货商联系供货。试剂验收：药械科工作人员与实验室工作人员负责核关于试剂品名、数量和价格，并且在供货清单上签字。实验室操作人员负责试剂质量验收（收）：外包装要求：包装完整无损、标识清楚齐全（厂家、批准文号、生产日期、效期）、所购试剂需 保证至少仍有三个月以上效期；试剂验收后登记存储。

16、PCR 检测试剂分区保存：扩增反映体系试剂保存于试剂储存区； 其知情同意下，联系经销商办理退换货手续。实验耗材的购买和管理科购买。查验外包装是否破损，如发生破损或其它质量问题，给 予退回。由实验室工作人员负责进行质量验收。用记录表，不使用过期试剂，并且杜绝浪费现象。文件编号：版本公布日期：文件编号：版本公布日期：实施日期：XX市第二人民医院试验科WEY-JYK-PCR-CXWJA/0 2020.07.28PCR 实验室程序文件22标本的管理程序目的准确性与有效性。适用范围：本程序适用于各类临床标本的管理。具体内容：标本的唯一性标识：标识构成病人姓名、标本采集日期、2000mg/L文件编号：版本

17、公布日期：文件编号：版本公布日期：实施日期：XX市第二人民医院试验科WEY-JYK-PCR-CXWJA/0 2020.07.28PCR 实验室程序文件 PAGE PAGE 32保持并且随时检查容器的完整和无标本外泄发生。实验室检测结果报告程序目的理受控，特制订本程序。适用范围：本程序适用于本基因扩增试验实验室一切临床检测的PCR 和签发报告单。具体内容：报告。PCR PCR 扩增的有/阴性报告，根据扩增曲线判读试验结果。病人档案及测定结果及病人档案一并且登记到实验结果记录表 2年以上。报告单应即时发出。2年以上告知关于方，实验的最终结果以检测报告单为准。实验室质量控制管理程序目的能否报告。适用

18、范围工作。具体内容：室内质控由于核酸扩增的高敏感性，为避免假阳性和假阴性，必需NARNA 定结果的准确性和反复性。室内质控囊括标本制备、逆转录、扩增和产物分析中的每一步。方法。/与待测临床标本等同处理提取核酸及扩增，以判断逆转录及扩增检测的效果。混合液。每一个 PCR 反映都必需设外加阴性质控（控）。测定结果的评判：PCR 应先关于扩增的荧光信号作出定性判断，然后再进行定量分析，避免一些非特异性荧光信号关于结果分析的干扰。检测报告。每次实验的质控数据均要作记录，如有失控现象应即时分析失控原因并且采取措施，并且做记录。程。止日期前上报。环节。实验室检测结果报告程序目的理受控，特制订本程序。适用范

19、围：本程序适用于本基因扩增试验实验室一切临床检测的PCR 和签发报告单。具体内容：报告。PCR PCR 扩增的有2 年以上。(12h 内)（愿检尽检人员（24h之内当在规则时间内（6h）出具报告单。告知关于方，实验的最终结果以检测报告单为准。报怨处理程序目的订本程序。适用范围：本程序适用于来自于患者，临床医护人员或实验室工每个实验室工作人员均有责任接待申诉者，实验室负责人关于报怨进行处理，如超出室负责人职权范围，上报医院有关部门处理。具体内容：接到报怨记录报怨提出针关于具体报怨的处理方法关于患者提出的合理要求即时进行处理。调查事情原委，根据调查结果关于相关责任人进行处罚。客户解除疑虑。征求报怨方关于处理方法的意见执行解决方案记录最后的处理结果试验进程中发生故障时的应急处理程序目的到临床检测报告的即时性和准确性，特制定本程序。适用范围室负责人有责任组织并且直接监督本程序的实施。具体内容：误使用。取下电源插头。用相应防尘罩遮蔽仪器，报药械科处理。有满足要求的替用设备时，启用替用设备。随身携带备用设备到达现场。仪器维修后取下红色故障标示，换上未校准标示牌。维修的仪器必需经验收合格并且供需双方签名后才