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文档简介

1、微生物处理机油污染废水研究摘要:近年来,国内外对石油及兵产品的微生物降解研究常见报道,却鲜见机油废水微生物降解方面的研究。本试验目的是通过常规微生物驯化方法,以市售机油为唯一碳源,从油污土壤中别离挑选出机油高效降解菌株,并对其生长条件及降解特性进展研究,以期进一步应用于含油污水的治理。关键词:微生物机油污染废水微生物降解AnExperientalStudynirbilgialTreatentfLubriatingil-ntainatedaterAbstrat:Tstrainsfhigh-effetive,lubriatingildegradingbateria,ZL1andZL2,eresre

2、enedutfril-ntainatedsil,hiherepreliinarilyidentifiedasflavbateriunandtnirus.Theeffetsfteperature,ilntentandpHvaluenthEiril-degradingapaitieseredleterinedbyrthgnalexperientfgrthnditins.Adegradingapaityexperientasarriedutithaninitialasteaterilntentf270g/L.Theexperientalresultsshedthattheilrevalratesby

3、thestrainsZL1andZL2frthein-uluinabut2daysereupt67.9%and76.2%respetivelyandtheadaptatinrangefstrainZL2tilntentandpHvalueasiderthanthatfZL1.Keyrds:lubriatingil;il-ntainingasteater;asteatertreatent;irrganis;flavbateri-un;irus近年来,国内外对石油及兵产品的微生物降解研究常见报道,却鲜见机油废水微生物降解方面的研究。本试验目的是通过常规微生物驯化方法,以市售机油为唯一碳源,从油污土

4、壤中别离挑选出机油高效降解菌株,并对其生长条件及降解特性进展研究,以期进一步应用于含油污水的治理。1材料与方法11土壤样品某石油库贮油罐附近的石油污染土壤,取样3份,按含油量由多至少编为1,2,3。12培养根本试验选取两种无机根底培养基,用蒸馏水配制并高压蒸气灭菌,编号分别为1,2,组成如下:1根底培养基:pKH2P40.5gL,K2HP40.5gL,PgS47H2=0.2gL,Nal=0.2gL,pal20.1gL,NH4N31.0gL,nS4痕量,Fel3痕量。2根底培养基:pNaN3=2.0gL,KH2402gL,gS4.7H20.2gL,酵母浸膏1.0gL含油培养基是向上述无机根底培养

5、基中参加适量机油。固体培养基中参加质量分数为02的琼脂。13优势菌筛分试验131选择富集培养称取土样各10g,参加到500L1含油培养基含机油4L中,调pH值7.0,通气恒温30培养48h后,分别移取上述培养液5L于45L1,2含油培养基含机油2L中,恒温30振荡培养。1.3.2平板别离制作1,2固体含油培养基平板苦干,用接种环蘸取振荡培养较好的菌液在相应平板划线,恒温30培养48h后平板划线别离,重复数次。选择生长状况良好的菌株进展平板扩大培养。14生长条件正交试验在保证供氧和氮、磷营养前提下,选择温度。油的质量浓度以gL计和pH值作为本次实验的三个因素进展三程度实验,方案见表1、表2。将平

6、板培养48h的菌体刮下,5000rin离心5in,别离得到湿菌体。向方案中每个样品参加0.5g湿菌体,培养60h后测定样品中油的质量浓度。表1ZL1菌株正交试验方案及试验结果分组号因素测定结果油/g.L-1)降解测量油/g.L-1)温度/油/g.L-1)pH值1254245.01922322256807.04162643258249.06301944304247.02202045306809.05071736308245.06541707354249.02971278356805.05691119358247.075569K1690563513K2547548537K3307433494K12

7、30188171K2182183179K3102144165R1284414表2ZL2菌株正交试验方案及试验结果分组号因素测定结果油/g.L-1)降解测量油/g.L-1)温度/油/g.L-1)pH值1253684.0692992255746.02673073257678.04792884303686.03543145305748.02962786307674.04623057353688.01422268355744.03422329357676.0548219K1824769766K2897817840K3677812792K1275256255K2299272280K3226271264R

8、7316251.5降解才能试验配制机油质量浓度为270gL的含油培养基1L,投入小型间歇反响器中,参加离心别离得到的湿菌体5g,通气恒温30培养,间隔12h取样测定其含油量。16测试方法用紫外介光光度法测定。2结果分析21优势菌筛分试验富集培养过程中,1土样的培养液出现的泡沫较多,乳化现象明显,菌液也较为粘稠,别离出较多的菌株,说明土壤中的石油烃能刺激石油降解菌的生长。经过选择富集培养、平板别离出4株以机油为唯一碳源的菌株,编号为ZL1,ZL2,ZL3,ZL4,性状见表3。进一步培养后挑选出降解性能较好的ZL11培养基和ZL22培养基进展正交试验和连续培养试验。表34株机油降解菌形态特征形态特

9、征ZL1ZL2ZL3ZL4菌落颜色粉红淡黄淡黄粉红菌落形态不透明,微隆起,全缘,半透明,圆形半透明,圆形,隆起,不透明,米粒状突起,光滑,有光泽光滑,较枯燥光滑,有光泽较潮湿菌体形态短杆球形杆状丝状菌体大小/0.3-0.8)(0.6-1.00.30.5-0.8)(1.3-5.0)0.2(6-60)革兰氏染色GGGG初步鉴定黄杆菌属微球菌属假单胞菌属酵母菌属22生长条件正交试验ZL1,ZL2菌株按设定的正交试验方案进展试验,测定其剩余含油量,以降解油量作为考察指标,计算结果见表2、表3。分析极差值R可以看出:ZL1菌的R温度为128,ZL2菌的R温度为73,均为最大极差值,说明温度是影响降解效果

10、的主要因素。25ZL1菌降解机油才能较强;油质量浓度越低降解效果越好;pH值为7时,降解效果最好,说明ZL1菌适于在中性条件下生长。30ZL2菌降解机油才能较强;机油的质量浓度在368-767gL范围内对降解效果影响不大,以油=574gL时降解效果最明显,还应进一步扩大试验的油含量范围以确定油含量对ZL2菌降解才能的影响;pH值在48范围内对降解效果的影响也不显著,其中PH值为6时降解效果最好,说明ZL2菌较适于在中性偏酸条件下生长。2.3降解才能试验向1L油质量浓度为270gL培养液中投加5g湿菌体进展间歇培养,考察ZLI,ZLZ菌的降解才能,结果见图1。由含油量与培养时间关系曲线可以看出:ZL1,ZL2菌被加人含油培养基后很快适应环境,随着培养时间的增长,含油量不断下降。ZL1菌在30h左右去除率到达最大,后含油量下降缓慢,到60h左右曲线趋于平直;ZL2菌在20h左右去除率达最大,48h左右曲线趋于平直。曲线说明ZL1,ZL2菌适应才能较强,ZL1菌在060h内生长旺盛对机油的去除率可达679,ZL2菌在048h内生长旺盛,对机油的去除率高达76.2,试验后期降解曲线趋于平直,含油量根本不再变化,可能是由于机油中的一些重组分难于降解的原因。3结论石油污染土壤较适于做高效石油降解菌驯化菌源。挑选到两株高效机油降解菌ZL1,ZL2。通过正交试验得出ZL1黄杆菌属适于在25,油的

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