动物细胞工程-完整版获奖课件

1、动物细胞工程动物细胞工程常用的技术手段：动物细胞培养、 动物细胞核移植、动物细胞融合、 单克隆抗体动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。提问：植物细胞工程常用的技术手段有哪些？植物组织培养, 植物体细胞杂交阅读思考：为什么要进行动物细胞培养？什么是动物细胞培养？一 动物细胞培养动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。思考：动物细胞培养的过程是怎样的呢？阅读思考：为什么细胞培养要分散成单个细胞培养？ 怎样分散？用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要 成分是什么？用胃蛋白酶行吗？3 什么是细胞贴壁和细胞接触抑制？什么

2、是原代培养和传代培养？传代培养的细胞 具有 什么特点？为什么细胞培养要分散成单个细胞培养？怎样分散？1.成块的组织中细胞与细胞靠在一起，彼此限制了细胞的生长和增值。2.从健康动物体内取出组织块，剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要成分是什么？用胃蛋白酶行吗？1.在进行动物细胞培养时，用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。2.动物细胞培养适宜的PH为7.27.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。动物细胞生长特性：细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。要求： 培养瓶或培养皿的内表面光

3、滑、无毒、易于贴附。细胞的接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 什么是原代培养和传代培养？传代培养的细胞具有什么特点？原代培养：将动物组织用胰蛋白酶处理成单个细胞，配制成一定浓度的悬浮液，放入培养瓶中在培养箱中培养的过程传代培养：培养瓶中的细胞越来越多，用胰蛋白酶处理使细胞从瓶壁上脱离下来，配制成悬浮液，分瓶培养的过程动物细胞培养过程胚胎或幼龄动物的组织器官细胞悬液10代细胞50代细胞剪碎胰蛋白酶洗涤、稀释、分离原代培养用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.27.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）

4、没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。比老龄动物的组织细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛。分化程度越低，增殖能力越强，越容易培养。动物细胞培养不能最终培养成生物体细胞增殖缓慢，核型可能变化动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。贴壁生长接触抑制10代以内，保持正常二倍体核型传代培养细胞系细胞贴壁表面光滑、无毒，易于贴壁。5%CO2。维持培养液的pH 讨论：多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的内环境知识，思考并讨论以下问题：1.体外培养细胞时需要提供哪些物资？2.体外培养的细胞需要什么样的环境件？充足的营养(葡萄糖、

5、氨基酸、无机盐、维生素、促生长因子和动物血清等。) 气体无菌、无毒的环境 适宜的温度和PH动物细胞培养条件：1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液）2、营养（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）3、温度和PH 36.5+（-）0.5度, 7.2-7.44、气体环境： O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）保证细胞顺利的生长增殖动物细胞培养液的主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。与植物培养基相比其特点是：（1）液体培养基（2）含有动物血清动物体细胞大都生活在液体的环境植物细胞和动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原 理细胞的全能性

6、细胞增殖培养基类型固体培养基液体培养基培养基特有成分蔗糖、植物激素葡萄糖、动物血清促生长因子培养结果新的个体或细胞产品细胞或细胞产品培养目的快速繁殖、培育无病毒植株等获得细胞或细胞产物动物细胞培养应用大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体）获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据1.在动物细胞培养过程中，下列哪种现象是不可能的（ ）A细胞一直在细胞悬液中分裂生长B有少部分细胞可能在培养条件下无限地传代下去C有部分细胞核型会发生变化 D. 个别细胞会发生基因突变2.下列过程与细胞培养无关的是-（ ）

7、 A.检测有毒物质 B.生产单克隆抗体 C.筛选抗癌药物 D.杂交育种AD练习： 我们能否用植物组织培养的方法使动物细胞发育成动物个体？ 根据动物细胞核仍具有全能性的特点,怎样将动物细胞的全能性表达；把两种动物的优良性状集合在一块儿?思考：二 动物体细胞核移植技术 和克隆动物动物体细胞核移植技术: 将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉 细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新 的胚胎， 这个新的胚胎最终发育成动物个体。 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物核移植胚胎细胞核移植体细胞核移植（难度高）体细胞核移植的过程：思考：1.核移植的受体细胞是什么？处在什么时期？2.通过什么手段激活受

8、体细胞，构建重组胚胎？ M中期卵母细胞诱导方法：物理或化学方法激活受体细胞，完成细胞分裂和发育进程。过程供体细胞（供核）细胞培养体细胞卵母细胞（减中期：供质）去核无核卵母细胞注入电刺激重组细胞重组胚胎胚胎移植代孕母体新个体(与母体相同的个体)讨论1.在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？为使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞，在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前，必须将受体细胞的遗传物质去掉或将其破坏。培养的动物细胞一般当传代至1050代左右时，部分细胞核型可能会发生变化，其细胞遗传物质可能会发生突变，而10代以内的细胞一般能

9、保持正常的二倍体核型。因此，在体细胞核移植中，为了保证供体细胞正常的遗传基础，通常采用传代10代以内的细胞。2.用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，想一想，这是为什么？3.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？绝大部分DNA来自于供体细胞核，但其核外还有少量的DNA，即线粒体DNA是来自于受体卵母细胞。此外，即便动物的遗传基础完全相同，但动物的一些行为、习性的形成与所处环境有很大关系，核供体动物生活的环境与克隆动物所生活的环境不会完全相同，其形成的行为、习性也不可能和核供体动物完全相同，从这一角度看，克隆动物不会是核供体动

10、物100%的复制。应用前景1.加快家畜遗传改良进程2.保护频危物种3.器官移植供体4.利用生物反应器生产生物蛋白前景应用前景1、加快家畜遗传改良进程2、保护频危物种3、器官移植供体4、利用生物反应器生产生物蛋白存在问题成功率低存在健康问题克隆动物食品的安全问题许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大，异常肥胖，发育困难，脏器缺陷，免疫失调等。中国自主完成的首批成年体细胞克隆牛在山东曹县陆续降生。克隆牛有3个母亲,A牛提供细胞核即供体细胞,B牛提供去除细胞核的卵细胞即受体细胞,两种细胞在电脉冲的刺激下融合之后,通过细胞分裂形成早期胚胎,再将这个胚胎植入C牛子宫内。请回答下列问题:(1)培育出的克隆牛几乎就是 牛复制品,这是因为控制牛性状遗传的物质主要存在于_中。(2)克隆牛的培育成功说明了_。 A(供核牛) 细胞核 体细胞的细胞核几乎具有发育为新个体的全部遗传信息 练习