PCR实验室工作制度(精选五篇)修改版

1、第一 实验室工作篇：度PCR 实验室工作制度1. 2. 禁止与实3. . 严格遵守人员及物品按单向流动，不得交叉混流。5. 严格依照基因检测操作规程进行实验和使用仪器设备，定期检测、校准并且做好记录工作。6. 每次基因检测中应设立阴阳关于照。实验室工作人员必需严格依照PCR 消毒，离心管、吸头等一次性用品需高压灭菌处理。10过的吸头，离心管等应送到指定的地点进行处理。30北京海乐思医学试验所第二 实验室管理篇：度PCR 实验室管理制度本实验室进行临床基因扩增检测及相关试验工作，不得进行其他实验操作。本实验室采用实时荧光定量PCR 和准备区（第一区、标本处理区（第二区、扩增区（第三区()。每一工

2、作区配4. 从试剂储存和准备区标本处理区扩增区扩增产物分析区的单一流向制度，不得逆向进入前一工作区。）需首先熟悉本程序的各项规则并且严格遵守执行，在本实验室人员监督指导下进行。7. 试剂储存和准备区只能进行试剂的贮存及配置等相关操作。标本处理区只能进行临床标本的保存RNA时cNA的合成。扩增产物分析区只能进行NA 或cNA PCR 10. 进行实验时严格执行本实验室的各项操作规程，即时做好清洁、消毒、整理及分析统计等工作。室内仪器由专人负责，未经许可，不得随意使用或挪用；爱护使用仪器，定期进行保养与维修。北京海乐思医学试验所第三实篇：室简介PcrPCR(PolymeraseChain的简称。是

3、一种分子生物学技术，用于放大特定的NA 片段，可看作生物体外的特殊NA 复制。经过NA 基因追踪系统， 抗病毒药物、判断药物疗效如何、给临床治疗提供了可靠的试验依据1、必需拥有标准的的PCR; 实时荧光定量PCR1996年由美国ApplieBiosystems公PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR解决PCR 作一介绍2、检测设备必需契合标准PCR 荧光实验室设置要求; 荧光定量PCR 仪+实时荧光定量试剂+通用电脑+自动分析软件，构成PCR-NA/RNA 实时荧光定量检测系统。;4; PCR 实验室内工作人员必需参加由国家卫PCR 应有两个以上持有临床基因检测上岗证。PCRO确保实验室卫

4、生安全，确保实验室长期稳定运行5、必需在无菌无尘环境下进行操作功能HBV与T细胞免疫来打破免疫耐受，阻断肝e抗原、维化、肝硬化进程。建立方法1、建立样本准备区CR 带有要扩增序列的NA 理，以根据应用的需要提取NA 或RNA。用于样本处理的工具不能被用作普通分子克隆的工具，也不能2、样本准备和RNA-PCR RNA-PCR的额外步骤需要额外的样本操作，这样增加了样本之间污染的机会。RNA-PCR 中应用UNG 以防止污染的方法也有报道。3、建立前PCR 区。PCR PCR 区的正压活塞式移液管。4、PCR 实验室试剂的操作。ase 和RasCR 0.22 m 贮存0.025%的叠氮钠不克制扩

5、PCR 区所使用的移液管在不使用时都应该小心保存。5、在前PCR 区建立PCR 混合物。可以把即刻可用的主混合物溶液配好、分装并且保存在 PCR成分。作为一个规则，应该保存一套阴性、弱阳性和强阳性关于照样本来分析样本配制和PCR 前进程的效率和洁净程度。而且，你也希望经过使用一个已知PCR 产物的污染点应该予以考虑。6、控制污染的方法。已设计出很有力的酶学方法用来消除一种形式的污染UNG，这一技术能有效地消除由PCR 产物 几个数量级。7PCR 区PCR 后PCR 的试剂或仪器用于任何前PCR 活动第四实篇：室高端PCR 实验室控制设计说明PCR 用各有区别，在具体设计时也有不同之处，就医疗机

6、构的应用而言，主要使用三区或四区设计，即试剂准PCR 分析设备，及扩增与分析进程在设备内一次完成。而四区设计在三区的基础上讲扩增分析区拆分为扩增区与分析区适用于其他类型的pcr 设备及手工处理。在PCRPCR实验中所产生的NA 与RNA 计高效净化系统，但是为了提高实验环境水平及保护实验室内的敖贵设备方面，如果在具备条件的情况下可考虑追加高效空气净化系统；建议净化级别万级。在PCR实验中所产生的NA与RNA片段污染是一直以来PCR实验的重点问题。此类污染主要至上次试验中所产生的基因片段关于下次试验产生的污染，而且一PCRPCR统。在控制设备方面也有很多区分如压力无关型控制系统、压力有关型控制系

7、统。根据业主要求，本PCR 可根据实验室内使用节点调节送风量及排风量来控制各房间状态，系统说明见下图接到启动信号时设备运行，运中根据管道压力反馈决定变频器大小，房间内送排风量由压力无关型风量调节阀控制。当有多个房间 开启或关闭时，设备越发管道压力反馈，调节设备变频器增加或减少送排风量来稳定管道压力。各房间内压力又房间内的压力无关型定风量阀进行控制。当BSC（生物安全柜，B2 全排）开启时BSC 专用供风机组运行，BSC-供风机-排风机连锁运转。当BSC 做变风量调节时，根据房间内压力变化，BSC 专用供风机组前安装的压力无关型变风量调节阀根据压力变化增减送风量，确保房间压力执行在可控范围内。当

8、房间不适用时，房间与缓冲间均关闭电动密闭阀，确保房间处在密闭状态避免布朗运动造成的可能污染风险。一定时间的换气处理后，污染题可以基本解决。本系统如果业主需要，可在室内送风口末端加装高效过滤设备，房间可升级为净化型实验室。在一定管道压力区间内能够自行调节阀体阻力，来稳定送风量，是高端实验室必备的关键部件，目前此类 阀体技术均有国外生产厂家控制，目前国内主用使用的产品有妥思、文丘里、西门子等品牌。第五实验室篇：明PCR 实验室设计PCR 实验室分为四个区域，（例如不同的颜色试剂配制区n 2.样本处理区n 核酸扩增区n 4.产物分析区n ,三四区可合并且为扩增产物分析。1.1.1 1.1.2 样本处

9、理区：样本登记、1.1.3 1.2 扩1.3 使用商品化试剂盒1.4 1.4.1 1.4.2 每个实验人员、实验组诀别使用各自的试剂及1.4.3 1.4.4 PCR 现要主要是以组合形式为主流。完成一组PCR 实验， 碎进程。PCR 实验室 所谓分散形式PCR 呈分散部署形式。关于于这种部署形式的PCR 实验室，由于各个实验之间不易相互干扰，因此无需特殊条件要求。二、组合形式PCR 实验室 所谓组合形式PCR实验室, 是指完成PCR 四个实验进程的实验用房相邻部署， 组成独力实验区域的形式。关于于组合形式PCR 实验室，由于各个实验间集中部署，容易造成相互干扰，因此，关于总体布局以及屏障系统具

10、有一定的要求。各室在入口处设缓冲间，以减少室内外空气交换。试剂配制室及样本处理室宜呈微正压，以防外界含核酸气溶胶的空气进入，造成污,可以经过控制进风风量大于排风风量达到正压效果。核酸扩增室及产物分析室应呈微负压，以防含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样本，可以经过控制排风风量大于进风风量达到负压效果。在理想情况下，PCR 实验室缓冲间内，可设置正压，使室内空气不流向室外，室外空气不流向室内。PCR 2600mm 处。如果使用荧光PCR 仪，扩增室和产物分析室可以合并且。若房间进深允许，可设PCR内部专用走廊。需要指出的是在减少室内外空气交换方面，缓冲间比专用地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐

11、侵蚀的要求。如果使用荧光PCR 仪，扩增室和产物分析室可以合并且。若房间进深允许，可设PCR内部专用走廊。需要指出的是在减少室内外空气交换方面，缓冲间比专用行校准。并且配备UPS 洁净实验区的缓冲间部分面积不能超过主实验室的八分之一,这是有规则的.150 解决容易污染、积尘、不易清扫等问题。结构牢固，线条简明，美观大方，密封性好。2PCR PCR 扩增，产物分析四个独力的实验区。整个区域有一个整体缓冲走廊。每个独力实验区设置有缓冲区，同时各区经过气压调节，使整个PCR缓冲区PCR 气经过回风口向室内换气。34（不建议使用电子连锁方式）试剂和标本在传递进程中不受污染（人物分流。5、 地面 地面建

12、议使用PVC 卷材地面或自流坪地面，整体性好。便于进行清扫，耐侵蚀。6规矩的安装流程和全面的服务流程。安装前需要确定以下安装条件， 进水管和下水管的位置等，理想状态的空间尺寸样本处理区三、工作区域及设备要求（一） 试剂储存和准备区1、2-8C 和-15C 冰箱2、混匀器3、微量加样器（覆盖1-1000ul）4、移动紫外灯（近工作台面）5、消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头（带滤心）6、专用工作服和工作鞋7、专用办公用品（二） 标本制备区1、2-8C 冰箱、-20C 或-80C 冰箱2、高速台式冷冻离心机3、混允器4、水浴箱或加热模块5、微量加样器（覆盖1-1000

13、ul）7、生物安全柜8、消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头（带滤心）9、专用工作服和工作鞋10、专用办公用品 如需处理大分子NA，应具有超声波水浴仪。（三） 扩增反映混合物配制和扩增区1、 核酸扩增仪2（覆盖1-1000ul）3（近工作台面）4、 消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头（带滤心）5、 专用工作服和工作鞋6、 专用办公用品 (四)扩增产物分析区 视试验方法不同而定。基本仪器设备如下：1（覆盖1-1000ul）2（近工作台面）3、 消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、加样器吸头（带滤心）4、 专用工作服和工作鞋5、 专用办公用品

14、 5.人员和样本的安全是由生物安全柜和定向气流共通来保证。PCR 实验室设计规程中规则人员和样本必需单向流动。即从“试剂准备区到样本制备区，再从样本制备走向扩增区和产物分析区”，绝关于不能反向流动，以辟免交叉污染。气流方向只规则试剂准备区为微正压或常压，样本制备区为常压或负压，扩增区和产物分析区为负压，压力梯度是从试剂准备到产物分析区，是高到低的。规程并且没有规则要做成全新风系统，但是为降低交叉污染的风险，建议做成全新风系统。1 PCR病的一种检测手段。它可以经过将病毒体内所含的基因进行扩增的方法，测出一些病毒含量不高的感染者体内是否含有特定的病毒。由于该检测方法可以测出普通试验难以检测出的病

15、毒并且具有灵敏度高、特异性高、快捷、关于样本要求低等优点，因此被临床医生广为认可，已广泛应用于医院的临床诊断和各防疫检测2PCR扩增反映混合物配制和扩增区扩增产物分析区。各实验区之间的试剂及样本传递应经过传递窗进行。PCR 实验室平面部署示意图如图1 1 PCR 3 实验室空调通风系统设计及压PCR 实验室并且没有严格的净化要求，但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性，宜采用全送全3.1 试剂贮存和准备的材料应直接运送至该区，不得经过其他区域。试剂原材料必需贮存在本区内，并且在本区内制备成所需的3.2 (RNANA)RNA 时cNA 的合成。 本区的压 力梯度要求为：相关于于邻近区域为正压，

16、以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。另外，由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染，所以应避免在本区内不必要的走动。3.3 扩增反映混合物配制和扩增区该区域主要进行的操作为NA 或cNA NA 模板和合成的cNA()的(制备成反映混合液等也可在本区内进行。在巢式PCR 通常在第一轮扩增后必需打开反映管3.4 4 PCRNA的污染；试剂的污染以及标本间的污染。由于一旦4.1 （1）（2）各个实验区域要有鲜明的标4.2严格的气流压力控制， 4.3 （1）临床基因扩增试验实验室的技术人员必需进行上岗培训，经培训合格后才能从事临床基因扩增试验的工作；（2）在实验操作进程中，操作者必需戴34.4严格的管理严格控制进出实验室的人员。（3）尽快减少在实验区内不必要的走动以减少交叉污染的可能性。（4）扩增产物分析区扩增产物分析区可4.5 器，如超净