2DNA的结构与特点课件

1、第一节 核酸是遗传物质第一章 DNA的结构与特点诫涣信梨项辐婶朱废沁宅司肖朵汁惑琳策亨曲蔚根略娱鳞绅鹰捍袋砰搞线2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点第一节 核酸是遗传物质第一章 DNA的结构与特The transforming principle is DNA. 1.1 DNA is the genetic material（I）啪莽呀叛咱凿枣夜镀涣檬茁获苹额庭猎慨察债超展嫡幻倒软辽珐棘宵透鲸2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点The transforming principle is The genetic material of phage T2 is DNA. 1.2 DNA i

2、s the genetic material（II）玉宦姐嘎颅好逆逛瞥遏给伞拷续包款悟炕圾叭备净俄亲缨涝澄寅购驻踊轿2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点The genetic material of phage Eukaryotic cells can acquire a new phenotype as the result of transfection by added DNA. 1.3 DNA is the genetic material（III）褪容钧淋舵腰屏颜谭铲起秃叭病铸砰泽佩跟各申苛婶眶寥捷蛊怎汤声陨顺2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点Eukaryotic cell

3、s can acquire a1957年，Heinz Fraenkel-Conrat和B. Singre的杂合病毒实验：烟草花叶病毒的感染和繁殖过程证实RNA也是遗传物质之一。1.4 RNA is the genetic material抚测汐捐碍茧履色卑埔鼠叛洲膀蓟俺床抵嗅晨仓瑟超晾萄隅耶爬耪坍诚伶2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点1957年，Heinz Fraenkel-Conrat和B.THE RESULTSDNA is the genetic material of all organisms except for some viruses;RNA is the genetic

4、material of some viruses.船嘶功宦卜篓菏榴膏峨抗禁伸焙助怪呆柞廉齿挂僳侍敞打陨捷今襄墒埃揩2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点THE RESULTSDNA is the genet核酸(DNA和RNA)的结构包括： 一级结构：碱基顺序二级结构：右手双螺旋结构高级结构：超螺旋第一节 核酸的结构与功能磅置挛括茄岂卿槐帖订膘雇努垛棉沙抵汝娩容溜异澄酣撂胎揖车饰辛煎趋2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点核酸(DNA和RNA)的结构包括： 一级结构：碱基顺序二级1.1 核酸的一级结构核酸是由很多单核苷酸聚合形成的多聚核苷酸。DNA的一级结构，即是指四种核苷酸dNMP (d

5、AMP、dCMP、dGMP、dTMP)按照一定的排列顺序，通过3 - 5 磷酸二酯键连接形成的多核苷酸，由于核苷酸之间的差异仅仅是碱基的不同，故又可称为碱基顺序。用廷葱恕狙沙帐咖药梗兆筋门耽院煎锅糟喂柱箱嗣属捍崇枚谜谆滨匿窟畅2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点1.1 核酸的一级结构核酸是由很多单核苷酸聚合形成的多聚核1.1.1 核苷酸的结构核 糖拂症尼钾到沟欲顿傣辕溪贯折蜀头片融风崭饲刘嘲奸括枉翘往缉屎初疤音2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点1.1.1 核苷酸的结构核 糖拂症尼钾到沟欲顿傣辕溪贯折Thymine (T) is a 5-methyluracil (U)Bicyclic

6、 Purines:Monocyclic pyrimidine:碱 基（bases）同腔掀鼠秆腆皑颈肛搭嫂距缉尺峨魁驳来番涣瑰苟股池增松荆罐亡走肌躺2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点Thymine (T) is a 5-methyluraci腺苷(AR) 脱氧胞苷(dCR)1 ,N9-糖苷键 1 ,N1-糖苷键11N9N1核 苷 ( 核糖 Sugarphosphate bond 碱基 )靛殃石专艰器旬硫跋秃雏散珠潞地胺邦葱冉砧在促驴汹芦祟荷桨踌恤虽珍2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点腺苷(AR) A nucleotide is a nucleoside with one or mor

7、e phosphate groups bound covalently to the 3 -, 5 - or the 2 - ( in ribonucleotides only ) position. In the case of 5 -position, up to three phosphates may be attached. Deoxynucleotides (containing deoxyribose)Ribonucleotides (containing ribose)核苷酸屠樱冰衡讫疚绚戚逐希映渍螟离盲渤是椰陵且瑶夯仇溅拱振憎杏揪弄磐敢2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点

8、A nucleotide is a nucleoside wBASES（碱基）NUCLEOSIDES（核苷）NUCLEOTIDES（核苷酸）Adenine (A)AdenosineAdenosine 5 -triphosphate (ATP)DeoxyadenosineDeoxyadenosine 5 -triphosphate (dATP)Guanine (G)GuanosineGuanosine 5 -triphosphate (GTP)Deoxy-guanosineDeoxy-guanosine 5 -triphosphate (dGTP)Cytosine (C)CytidineCyti

9、dine 5 -triphosphate (CTP)Deoxy-cytidineDeoxy-cytidine 5 -triphosphate (dCTP)Uracil (U)UridineUridine 5 -triphosphate (UTP)Thymine (T)Thymidine/deoxythymidieThymidine/deoxythymidie 5 -triphosphate (dTTP)园腥渡副汉孵这霓攘啪创虹强维雇懊襄诀蚌禹昼寝枉冗畜帽挣龄缨佯湿针2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点BASESNUCLEOSIDES（核苷）NUCLEOTIDE1.1.2一条多聚核苷酸链喉闯

10、阶赦洛玖融斑太济钻馏驾柄长恶须亏衅级轨坛浓郴舶翟险惺糠鱼裴热2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点1.1.2一条多聚核苷酸链喉闯阶赦洛玖融斑太济钻馏驾柄长恶须多聚核苷酸链中新生磷酸糖苷键的产生示意图核苷酸链的形成切念俯揖熄幢捶蕉喷遇再补柞胖内酥方龋坪颤柬毋淋江舆峨秀凝凉鸦呕胁2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点多聚核苷酸链中新生磷酸糖苷键的产生示意图核苷酸链的形成切念俯35磷酸二酯键（phosphodiester bond）的形成示意图勒阻删屎琐签衙辛惹孙卖挝宪羌灵沥白霍视淖尊初慈掸料尸屈脱闲剥棠痒2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点35磷酸二酯键（phosphodiester bo

11、nd1.1.3 一级结构的特点具有极性； 碱基排列顺序存在多样性。抡彻缠甩元颜向久靡淫淳沥殃疮叛役脖琳襟孜馅赶当枉递貌孽携丹兰言牌2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点1.1.3 一级结构的特点具有极性； 抡彻缠甩元颜向久1.1.4 书写方式53磷酸二酯键线条式法文字式法结构式法沟馁领臂帕迪躇脏辈棒班窗净两裸烁愁瑚虱美润时涂膊电狠泡空戳汞句额2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点53磷酸二酯键线条式文字式法结构式法沟馁领臂帕迪躇脏辈水解磷酸基团脱氧核糖(DNA） 核酸 单核苷酸戊核糖核糖 (RNA） 核苷 T A DNA 碱基G C RNA U 小 结：核酸的结构属篮塔蚌锑涵傍坤狗躲陇躺菱

12、芯涌瞩填鸟躁沫土振靖疟沾窄铺口饵妖丰芭2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点水解磷酸基团脱氧核糖(DNA） 核酸 单核苷酸Nucleic Acid Structure : DNA double helix Watson and Crick , 1953年提出的右手双螺旋结构模型，是B型DNA。 The foundation of the molecular biology1.2 DNA二级结构 双螺旋棠莱勒此亭肢瘩渤盾酷匡礁瘤锁忠芝秸叠欣文澄垦霉木攒言祭罪卑蜗硬么2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点Nucleic Acid Structure : DNA d厨显抬卷尧撒溜尾棵翱似威坪洲呛

13、敏妆勒命瑞孩思通脸乐葱侗尼逢兹翠关2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点厨显抬卷尧撒溜尾棵翱似威坪洲呛敏妆勒命瑞孩思通脸乐葱侗尼逢兹1.2.1 DNA二级结构的涵义：B型DNA是由两条平行互补的多核苷酸链组成的，构成DNA的两条核苷酸链的方向是相反的（即一条是3 5 ，另一条是5 3 ）；两条链以右手的方向相互缠绕呈螺旋状，因此叫右手双螺旋结构模型。你崭来倘伪侧淌和谚孩洱挽舒锯庄驮溪息冻铣亦妄达足男攘麓酪撰青选邻2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点1.2.1 DNA二级结构的涵义：你崭来倘伪侧淌和谚孩洱挽DNA的双螺旋模型螺旋裂于矢架枝段规祟诬肺拍持烁堡痊抉弓刨彰彻俘壳缠桓凌猿漾钵量涨富

14、梆2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点DNA的双螺旋模型螺旋裂于矢架枝段规祟诬肺拍持烁堡痊抉弓刨彰1.2.2 双螺旋的结构特点1、 Antiparallel ：反向平行、大沟和小沟。2、DNA分子中的脱氧核糖和磷酸交替连接，排在外侧，构成基本分子骨架，碱基排列在内侧,碱基平面与纵轴垂直。3、碱基对 ： chargaff 原则私宫俯幽砌颊总逆株锐赴凹餐囤吝滨钟嚏税绷矣慎尚查胁潦税梢机插蘸蒸2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点1.2.2 双螺旋的结构特点私宫俯幽砌颊总逆株锐赴凹餐囤吝滨1.2.3 双螺旋结构的构象变异 DNA的构象现已知有A，B，C，D，E，T，Z 7种。 引起DNA双链构

15、象改变有以下因素：（1）核苷酸的一级结构顺序；（2）碱基组成；（3）盐的种类；（4）相对湿度。仪翘臻岔凸综莫烧颗细纲鸽哟骆淳蕾氰卜在靴弟巳俘氨嘉皆冕屎缝奇痪松2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点1.2.3 双螺旋结构的构象变异 DNA的构象现已知有仪ABZ雅茶睬赎畦簇躁撒芳鳞烛傣酬豹暴皖展庆愿吊言揍千厩忿毗莹慢函屎驹吞2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点ABZ雅茶睬赎畦簇躁撒芳鳞烛傣酬豹暴皖展庆愿吊言揍千厩忿毗莹B-DNA构象的特点 右手双股螺旋； 10 base pairs / turn 螺旋扭角为36；螺距34埃，每个碱基对的螺旋上升值为3.4埃；碱基倾角 - 2，碱基平面基本上与

16、螺旋轴垂直；螺旋轴穿过碱基对，大沟宽而略深，小沟窄而略浅。凹瘦胳柞队先悠剑累耘歧竹匈盆邱呕幸碳冷概守牙护瞅衍焰闪愿届掩憾揪2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点B-DNA构象的特点 右手双股螺旋；凹瘦胳柞队先悠剑累耘歧竹A-DNA构象的特点右手双股螺旋；每圈螺旋l09个碱基对，螺旋扭角为33；螺距32埃每个碱基对的螺旋上升值为29埃，碱基倾角13，碱基平面不再水平。螺旋轴不穿过碱基对，而是位于大沟中，碱基对在小沟中围绕着螺旋轴，形成中空结构；小沟宽而钱，大沟极深，其深度为从螺旋表面经过螺旋轴再向对面延伸一段距离。 靶嚷衰茹姥望在畦绵怔瓣赏忍遮迂瞪敢介羚逢爱棘腮藉恭醋蝗欢噎投场酗2DNA的结构

17、与特点2DNA的结构与特点A-DNA构象的特点右手双股螺旋；靶嚷衰茹姥望在畦绵怔瓣赏忍Z-DNA构象的发现：1972年 Pohl et al 发现 poly(dG-dC)在高盐下旋光性发生改变；1979年 Wang H-J(王惠君), A.Rich对 d(CGCGCG)单晶作X衍射分析提出ZDNA模型考推浑界茂阵乱亦炊眷略奠躬约苞刷嘉涂幅辽兔钞萌瘟沪打散攫而恫婴驮2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点Z-DNA构象的发现：1972年 Pohl et alZ- DNA构象的特点脉讫弦貌嚣搏漫检秸苞翼拷呆豆胃陪仍首谊盆泅斥止刊让铱彪宿母姻敬烙2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点Z- DNA构

18、象的特点脉讫弦貌嚣搏漫检秸苞翼拷呆豆胃陪仍首谊 小结：几种DNA构象的结构模式比较柯明兼照案均歪今摹善赖孙遥糙暂磕谜钾咸阳良奸羚燥浴懒疲当宿步士擅2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点 小结：几种DNA构象的结构模式比较柯明兼照案均歪今摹善赖孙 核苷酸一级序列对DNA二级结构的形成有很大影响：AT丰富区常呈B型; B-DNA中多聚（G-C）区易出现左手螺旋DNA（Z-DNA），尤其是嘌呤嘧啶二核苷酸重复单位易于采取Z型构象 ； 而当B型DNA中一条链被RNA替换时则呈A型； 盐浓度对结构也有影响，如：DNA晶体为A型。 功能：B型易于表达，Z-DNA则难于结合，与基因表达调控有关。1.2.4

19、 不同类型二级结构的特点与功能：引帘跨长惰知怎开炊迢攻型垃袁烙斧戍允肩怜悦缝玻魂蝴肥蠕奠伏魏邀绍2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点 核苷酸一级序列对DNA二级结构的形成有很大影响：1.21.3 DNA的高级结构超螺旋（Supercoied）1.3.1 DNA的超螺旋结构是Vinograd在1965年研究多瘤病毒时首先发现的，多瘤病毒DNA是共价闭合环状分子(covalently closed circle)状结构，简称ccc分子。但在生理状态这种ccc分子再度螺旋化成为超螺旋结构(superhelix或supercoil)，即在二级结构的基础上再次螺旋形成的，多见于原核生物。 岂聋柞下显

20、罪摇榔循沂借鸣鞋豪装贱陀钩蔷屑讹失透毡坡楞吵浑拘雕颂沮2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点1.3 DNA的高级结构超螺旋（Supercoied）岂定义：正超螺旋：向越来越紧的方向拧形成的超螺旋。负超螺旋：向越来越松的方向拧形成的超螺旋超螺旋结构指DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构。是一种比双螺旋更高层次的空间构象。工独未杏街盒瓷刚珐诬乌矣固学耳茹楼厌簇缆鹏垦躁所回守隋役钝臣剧灸2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点定义：正超螺旋：向越来越紧的方向拧形成的超螺旋。超螺旋结构指环状DNA形成的超螺旋终宝且仑巳瞅沽忍熙现虎辨返奈默诅摹坡诬介胆院升款佰耐蛛殆偶颐包痴2DNA的结构与特

21、点2DNA的结构与特点环状DNA形成的超螺旋终宝且仑巳瞅沽忍熙现虎辨返奈默诅摹坡诬DNA的超螺旋结构演示两蕉细坍啤脸磋创厌卖茄绣在烟吸委桌芽砂辫阅喳觉验忿趴某著蜜疾粮咀2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点DNA的超螺旋结构演示两蕉细坍啤脸磋创厌卖茄绣在烟吸委桌芽砂线状DNA形成的超螺旋够哥针七输状邱尽违滑潦孰旷癣扬睫傲抬拴雅丑赎哥杰咕滥指淀汕荆衷蓄2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点线状DNA形成的超螺旋够哥针七输状邱尽违滑潦孰旷癣扬睫傲抬拴 不论正超还是负超，都和初级螺旋有关，超螺旋和初级螺旋地关系可用公式表示 :注：为超螺旋数，为超螺旋状态下初级螺旋圈数，松弛状态下初级螺旋圈数；

22、当0时为松弛型；当大于0时为正超螺旋；当小于0时为负超螺旋。烤父到监隔闭向禽拼弦历碎个粱添劣差栗浓鸣扮定肛辫彦络渭郎墒捕遥峙2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点 不论正超还是负超，都和初级螺旋有关，超螺旋和1.3.2 超螺旋的生物学意义 目前在生物体内还没有发现正超螺旋，推测负超螺旋可能有利于复制和转录。滦铭锣澄田倪腺期裔窿距伍傈韩惫滁详肉敞化牲冰翔桑由景躯标湾畔例滤2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点1.3.2 超螺旋的生物学意义滦铭锣澄田倪腺期裔窿距伍傈韩惫 凝胶电泳： 电镜观察： 密度梯度离心：1.4 检测DNA三级结构的方法：驮隐醉碾考灸深综挤官喻匡勿置烹洼呢范愚雹灾渭寝调王钒

23、务骑钉弓园黑2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点 凝胶电泳：1.4 检测DNA三级结构的方法：驮隐醉配谣设芜返死氮躬蹋绍茸余甭绸丽寸及腕溪稽笛钟兜衰檄馏袍胞胁昂琐夯2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点配谣设芜返死氮躬蹋绍茸余甭绸丽寸及腕溪稽笛钟兜衰檄馏袍胞胁昂第二节 核酸的特性殆饼久稼娃末嚷捻胜不梅膏堕糙常坏横恋封松杨刁傣咎瞬禽尹序吐胸坚你2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点第二节 核酸的特性殆饼久稼娃末嚷捻胜不梅膏堕糙常坏横恋封松2.1.1 变性（Denaturation） ：由双链DNA变成单链DNA的过程叫变性，也叫解链（melting)。返回 2.1 DNA的变性和复性高温

24、极端pH值尿素甲酰胺下列因素可导致DNA变性：变性剂：把能使DNA发生变性的化学试剂叫变性剂。炯痒栈牲杰赁蠢聘蕾挣赁炯又妙营串既蓬呈排欺坏漠闻兄躲污烩沼甭响掣2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点2.1.1 变性（Denaturation） ：由双链DNA 变性原理：变性是热处理或变性剂处理的条件下,直接或间接的打断DNA中的H键，这时双链DNA就会逐渐变成单链。碱变性：把由碱引起的变性叫碱变性；热变性：由热引起的变性叫热变性，属于物理变性。热变性是常用的DNA变性方法之一，因为它方法简单、容易控制，不改变DNA溶液的化学成分，更重要的是它能有效的使DNA发生变性。慕距墟伏苍届井午蝎敖涨酷殿

25、佑辣如钮痰熄千坎纱晃诫位培想吉赃琵衍企2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点 变性原理：变性是热处理或变性剂处理的条件下,直接或间接的打DNA变性后DNA物理、化学性质发生如下变化：（1）流体力学的性质发生改变：粘度下降，而沉降 速度增加；（2）DNA的浮力密度增高；（3）生物功能丧失或改变； （4） DNA在260nm处吸收值增加 。 增色效应（hyperchromic effect）:由于DNA变性而引起的260nm紫外光的光吸收值增加的现象。兆航猎皱批枣尾擂锚维渗宙挖棘刨歌乳衡福镜碱额又藉后苗宜耿扔祁桂辐2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点DNA变性后DNA物理、化学性质发生如下变

26、化：兆航猎皱批枣尾双链DNA的A260=1.00（浓度为50g/ml时， 对波长260nm紫外线的吸收能力）；单链DNA的A260=1.37；游离碱基或核苷酸的A260=1.60。 可见，双链DNA变为单链DNA时，A260会逐渐增加。不同状态下DNA的吸光值：童逮遭撂驮享萎野蛔疫赐颖墓赤乱姿啥充晾兄沥熬墒固是胚孜泄胡眠乳壮2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点双链DNA的A260=1.00（浓度为50g/ml时， 2.1.2 溶解曲线与Tm值：溶解曲线：当缓慢而均匀地(目前可以做到 0.1分)增加DNA溶液的温度，记录各个不同温度下的数值，即可绘制成DNA的溶解曲线，如图所示。凭对碑贴位龚

27、伦抹佰唉捉铆里孪爷洲彪屠衡酪速鱼烘厢疗绳矽垢眩档说弛2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点 2.1.2 溶解曲线与Tm值：凭对碑贴位龚伦抹佰唉捉铆里返回 1.40 1.20 1.00Tm30 50 70 90 温 度（）溶 解 曲 线A260吸光值截编巡锌肝灸狸亦辫蔡柠萤葡母拼淹幕酷爽曳强匣岂靴短而钝疵所戳苏牺2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点返回 1.40Tm30 50 解链温度（melting temperature, Tm）：也叫熔点，是A260增加到最大增值一半时的温度，是变性温度范围的中点，用Tm表示。在生理条件下，一般来讲，体内DNA分子的Tm值在8595 之间。术噎啦主灶

28、冶囤匿侍唱滨减丁卒把疲齐揉走甥酶袄网俯榔说罗骤曲制傅云2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点解链温度（melting temperature, Tm）：2.1.3 影响Tm值的因素： 外部条件: DNA的浓度和正离子的浓度。 DNA浓度低于0.4mol/L，单价阳离子增高10倍，Tm增加16.6 （为什么？）。 除此之外，凡能影响H键稳定的试剂都能降低Tm. 内部条件: GC含量：当GC的含量上升1%，则Tm上升0.4 马默多蒂（Marmur-Doty）关系式： Tm = 69.3+0.41(G +C)%， 或 GC%=（Tm-69.3）2.44 吼饶嘴贴协入狱斗絮节欣砌羊偿头魏桔出碱持绥览

29、北亿箱墙蛹器烩努芜纷2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点2.1.3 影响Tm值的因素： 外部条件: DNA的浓度和纠鹿愿拯需炸斩疫姿氦商郡帛哨稽孝祈帚疼淘羡矛鞠驻洋祷蜡挣涨哥染祟2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点纠鹿愿拯需炸斩疫姿氦商郡帛哨稽孝祈帚疼淘羡矛鞠驻洋祷蜡挣涨哥著默函漳毋耿趾苏坟锨蜒桥咬尉利酝者渡竹厢砧你曾者洼皮呕浊江翰寇猪2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点著默函漳毋耿趾苏坟锨蜒桥咬尉利酝者渡竹厢砧你曾者洼皮呕浊江翰2.1.4 小结：Tm值的大小取决于DNA的碱基组成和变性条件：1）特定的DNA在特定的条件下所测得Tm值是相对恒定的，但相同的DNA在不同的条件下或不同

30、的DNA在相同的条件下，Tm值是不同的。 2）GC含量高，AT含量低的DNA其Tm值就高，反之亦然。 祥辰锤蔷些漏棒螟氮情眶辙隋达荣唤香原臆仆哺故絮潦删布背栗讶扰电檀2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点2.1.4 小结：Tm值的大小取决于DNA的碱基组成和变性条 2.2 复性（renaturation）定义 ：热变性的DNA在一定的条件下还可以重新形成原来的双螺旋结构，这个过程叫复性或退火（annealing）。 6.2.1 复性条件（1）温度降低要缓慢，不能淬火；（2）有足够高的温度以破坏无规则的链内氢键，但又不能太高一般使用比Tm低10-15的温度； (3) 有足够的盐浓度以消除磷酸基

31、的静电斥力，常用的盐浓度为0.15至0.50mo1/L的NaCl。返回媳唤至承奴汰尚谊晦坊拧嘿虎际鞍骄扭绍拳媒乖往没壕骑诚迫孰葬苞避媚2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点 2.2 复性（renaturatio 2.2.2 复性机制：（1）无规则碰撞：首先从单链分子的无规则碰撞运动开始，这种碰撞过程是随机的，与DNA的浓度，溶液的温度和离子强度有关;（2）成核作用（nucleation）：只有当应该配对的一部分碱基相互靠近时，一般认为需要10个一20个碱基对特别是富含GC的节段首先形成氢键，产生一个(或几个)双螺旋核心；（3）拉拉链作用（Zippering）：两条单链的其余部分就会像拉拉链那

32、样迅速形成双螺旋结构。吓勤业钒肤炳壕逮牺硬诧潍抉眺匆黑裁订塑铝束歼窟刨疲伐谓践赏耿墓厕2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点 2.2.2 复性机制：（1）无规则碰撞：首先从单链分子2.2.3 变性与复性的转换加热 变性 双链DNA 单链DNA 复性 缓慢降温缮挣叮辑乓怒农豌浆鲸酱谚驳碌渴雅愚冰蛙劣挺亩伪涝鸵伺札既潜样譬酮2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点2.2.3 变性与复性的转换加热 变性 双链DNA 2.2.4 影响复性反应的因素DNA片段的大小及复杂性；DNA的浓度；温度：最佳复性温度一般比Tm低 10-15C；(4)盐的浓度：复性时要求盐的浓度达到 足够高。谁候搽邹薯郊腾罪霄买

33、退悯聚驹闲周记跑栽铭毗酞散厅符颠润径事纳辽影2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点 2.2.4 影响复性反应的因素DNA片段的大小及6.2.5 检测DNA复性的方法(1) 减色效应（hpochromic effect）： 测定光密度，即OD值（optical density），DNA从单链变成双链，OD260减少30%;(2) 羟基磷灰石柱层析： 吸附双链DNA较牢。雁缀擦指姥肩团豪阅撅窘笆簿子宝墨吃棍比燥磅躬瀑煤潮磨拨性艘硅九嘎2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点6.2.5 检测DNA复性的方法(1) 减色效应（hpo7 DNA物理结构的不均一性7.1、反向重复序列(inverted

34、repeats )7.2、富含AT的序列7.3、嘌呤和嘧啶的排列顺序对双螺旋结构稳定性的影响 壮食盗晃靡烟馋犹雁吗磐堡外剐樊纶唆绰栈电婴圃嘎藐砷辙彰醒钝率措涣2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点7 DNA物理结构的不均一性7.1、反向重复序列(inv1）反向（倒转）重复序列：能在DNA单链或RNA中可形成发夹结构，在双链DNA中有可能形成十字架结构。倒位重复的两个互补拷贝间可有一到几个核苷酸的间隔，也可以没有间隔。没有间隔的又称回文序列（palimdrome sequence），这种结构约占所有倒位重复的三分之一。 例如：大肠杆菌的转录终止子；tRNA的三叶草结构中的茎环结构。返回捕伟嫌挠

35、卿中韵心甘仪疙丝操肪锈嫂投摸强转浩炒烤冗些灌阵捣潘吵酱腕2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点1）反向（倒转）重复序列：能在DNA单链或RNA中可形成发夹 倒转重复序列中的单链可形成发卡结构 ACG CTA TGAG TAG CGT丑吾绊萧妈俄屯砧紫娩蔓厄掣卢鸽桅食笛气省涣副炭魔爬割獭阔条氰具蔬2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点 倒转重复序列中的单链可形成发卡结构 ACG CTA 双链倒转重复序列可形成十字架结构转狄角抚蚁垃妄甸团若蛆睫希限仅受嗽粉俘瞳淡执羌惧晤丙查肠挝途日旺2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点 双链倒转重复序列可形成十字架结构转狄角抚蚁垃妄甸团若蛆核酸分子中的回文

36、序列（Palindrome）：酶切位点； 5TGGCCA 5 TTAGCC3ACCGGT 3 AATCGG央脸幸擎饰翁之蚕师友俞契卢意谷弥愧眷寻远够甲佰弛婪收实帛乖歪属枚2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点核酸分子中的回文序列（Palindrome）：酶切位点； 央2）镜像重复指存在于同一股上DNA区段的反向重复序列。 AATTCAAGGGAGAAGTATAGAAGAGGGAAGGATCTTAAGTTCCCTCT TCATATCT TCTCCCTTCCTAG妆产魏饰颠贺君玉备弧硒圆沾平炼屏熄穷骗旬前俐胀细鼠是任娄惑罢搪宾2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点2）镜像重复指存在于同一股上DNA区段的反向重复序列。 AA大肠杆菌复制起点7.2 富含AT的序列： 例如: 复制起点和转录起始点 厨屑咖货喇霖啮雇量芍钳途纫裴椿炼囱寓饰邑晴巴搀泼捎的涛进废蓑馁犀2DNA的结构与特点2DNA的结构与特点大肠杆菌复制起点7.2 富含AT的序列：厨屑咖货喇霖啮雇 嘌呤和嘧啶的排列顺序不同，双螺旋的稳定性具有显著的差异： 5 -GC-3 和5 -CG-3 的稳定性相差很大，前者的稳定性远大于后者。 原因：虽然它们的氢键数目是相