病原微生物肠杆菌科

1、复 习 题1在化脓性感染中，能促感染局限化的细菌产物是 A血浆凝固酶 B链道酶 C透明质酸酶 D链激酶 E以上都不是A.金黄色葡萄球菌 B.甲型溶血型链球菌 C乙型溶血型链球菌 D M蛋白 1可引起风湿热的是2可引起食物中毒的是3.常引起感染性心内膜炎的致病菌是4.与肾小球肾炎有关的抗原蛋白是携带NDM-1的大肠杆菌感染，会导致许多病人出现尿路感染和血液中毒。在已发现的NDM-1细菌感染病例中，至少有一例已经对所有已知的抗生素具有抗药性。 超 级 细 菌NDM-1的大肠埃希菌第十章 肠杆菌科知 识 要 点1.掌握：（1）大肠埃希菌的生物学性状、致病性。（2）志贺菌的生物学性状、致病性、微生物学

2、检查法。（3）沙门菌的生物学性状、致病性、微生物学检查法；血清学诊断和肥达试验。2. 熟悉：（1）大肠埃希菌的微生物学检查法及防治原则。（2）志贺菌和沙门菌感染的防治原则；3.了解：（1）大肠埃希菌在卫生细菌学检查中的意义。（2）志贺菌感染的免疫性；（3）沙门菌的分类及其感染的免疫性；（4）其他菌属的致病性。概 述大多数为正常菌群少数是致病菌，如：致病性大肠埃希菌、伤寒沙门菌、痢疾志贺菌、 肠杆菌科细菌是一大群寄居在人类和动物肠道中生物学性状近似的革兰阴性杆菌。形态结构 形态相似。中等大小的革兰阴性杆菌。多有鞭毛，少数有荚膜或包膜，致病菌多有菌毛。从形态上无法区别。共同特性生 化 反 应 活

3、泼致病菌株多不能分解乳糖。乳糖发酵试验可初步鉴别肠道致病菌和非致菌能分解多种糖类和蛋白质，形成不同的代谢产物，常以此作为鉴别手段。共同特性大肠埃希菌和痢疾志贺菌，你能区分吗？用鉴别培养基，不就行了？SSA指示剂为中性红，分解乳糖产酸的细菌呈红色菌落（大肠），不分解乳糖的细菌呈无色菌落。抗原结构：复杂（1）O抗原（菌体抗原）：LPS的最外层核心多糖（2）H抗原（鞭毛抗原）（3）荚膜抗原：如Vi抗原、K抗原共同特性 对一般消毒剂敏感。 胆盐、煌绿等染料对大肠埃希菌等非致病菌有选择性的抑制作用。借选择培养基来分离致病性肠道菌。抵 抗 力 弱共同特性Escherichia Escherichia 的细

4、菌一般不致病，是人类和动物肠道中的正常菌群。其中以大肠埃希菌（E.coli）最为重要（代表菌）。埃希菌属形态染色G-杆菌多有周鞭毛致病株有菌毛 兼性厌氧、营养要求不高普通平板：灰白色、光滑、湿 润、中等大小的菌 落。选择培养基中菌 落为红色液体培养基：均匀混浊生长培养特性： 生化反应能发酵葡萄糖等多种糖类，产酸产气。大部分菌株迅速发酵乳糖。在克氏双糖管中，斜面和底层均产酸产气同沙门菌、志贺菌区分 硫化氢阴性、动力阳性 IMViC 试验为+ + - -。抗原结构：复杂（1）O抗原（菌体抗原）：170种（2）H抗原（鞭毛抗原）：50种（3）K抗原：100种致病性致病物质所致疾病致病物质：黏 附 素

5、：黏附于泌尿道和肠道的细胞上。外 毒 素： 1、不耐热肠毒素和 2、耐热肠毒素a和b 3、志贺毒素和 4、溶血素AALT的结构和作用部位BBBBBA亚单位：毒素的活性部位B亚单位：与肠黏膜上皮细胞表面的GM1神经节苷脂结合后,使A亚单位穿过细胞膜与腺苷环化酶作用肠粘膜细胞上的腺苷环化酶A亚单位ATPcAMP活化小肠分泌过度，腹泻ST的作用：激活肠粘膜细胞上的鸟苷环化酶GTPcGMP液体平衡紊乱，腹泻所致疾病：1、肠道外感染化脓性感染：腹膜炎、阑尾炎、手术创口感染，体弱者可引起败血症。新生儿引起新生儿脑膜炎。泌尿道感染：为上行感染，尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎。表现为尿频、排尿困难、血尿和脓尿。肠出

6、血性大肠埃希菌 EHEC (enterohemorrhagic E.coli)肠产毒素性大肠埃希菌 ETEC (enterotoxigenic E.coli)肠侵袭性大肠埃希菌 EIEC (enteroinvasive E.coli)肠致病性大肠埃希菌 EPEC (enteropathogenic E.coli )肠集聚性大肠埃希菌EAEC (enteroaggregative E.coli)2、肠道感染：胃肠炎肠产毒素性大肠埃希菌(ETEC ) 疾病：5岁以下婴幼儿腹泻和旅行者腹泻症状： 从轻微的腹泻至水泻，有恶心、低热作用部位：小肠粘膜细胞致病物质：定植因子、 不耐热肠毒素(LT) 、耐热

7、肠毒素(ST)肠侵袭性大肠埃希菌 （ EIEC）疾病：较大儿童和成人腹泻。症状：发热、腹痛、腹泻、脓血便和有里急后重。 类似细菌性痢疾。作用部位：大肠致病物质：内毒素致病机理：不产生肠毒素，侵袭和破坏结肠粘膜上皮细胞，造成炎症和溃疡，产生黏液脓血便。肠致病性大肠埃希菌（ EPEC）疾病：婴幼儿腹泻。症状：发热、呕吐、腹泻、粘液便。作用部位：小肠致病物质：不产生毒素，粘附素破坏微绒毛刷状缘，绒毛萎缩、上皮细胞排列紊乱，功能受损。肠出血性大肠埃希菌(EHEC )疾病：出血性结肠炎，溶血性尿毒综合征 多见于5岁以下儿童。症状：剧烈腹痛、水泻、大量鲜血便。作用部位：小肠远端、结肠致病物质：菌毛、志贺毒

8、素等。致病机理：志贺毒素灭活核糖体，终止蛋白质合成。引起肠黏膜水肿、出血、液体蓄积、肠黏膜脱落、肠细胞水肿、坏死、引起血性便。细菌血清型：O157：H7视频疾病：婴儿腹泻。症状：持续性水泻、呕吐、脱水、低热、偶有血便。致病物质：毒素和黏附素致病机理：聚集性黏附肠道上皮细胞，导致微绒毛变短，单核细胞浸润和出血。肠集聚性大肠埃希菌（EAEC）微生物学检查病人标本中细菌的分离与鉴定 1、标本的采集：不同的病变采集不同的标本 2、分离培养与鉴定： 选择培养基，生化反应鉴定 致病性大肠埃希菌须用血清学试验定型 必要时鉴定肠毒素（ELISA、基因探针等）尿路感染：确定大肠埃希菌+计数， 尿菌量10万/mL

9、时才有诊断意义SpecimensIsolation cultivation: seletive or differential medium(SS,EMB,MAC)biochemical test KIA，IMViC antibiotic susceptibility testserological test微生物学检查卫生细菌学检查 大肠菌群数：每1000ml样品中的大肠菌群数。 微生物学检查标准：大肠菌群数饮水3个/ 1000ml 果汁、瓶装汽水 5个/100ml尿路感染：确定大肠埃希菌+计数， 尿菌量10万/mL时才有诊断意义防治原则预防：菌毛疫苗治疗： 磺胺药、庆大霉素等Shigell

10、a志贺菌属 志贺菌属是人类细菌性痢疾的病原菌，俗称痢疾杆菌（dysentery bacterium）。 主要致病特点是能侵袭结肠粘膜上皮细胞，引起自限性化脓性感染病灶。形态染色与培养特性 无鞭毛、有菌毛 生化反应不活跃 SS培养基上呈无色半透明菌落 克氏双糖管斜面不发酵底层产酸不产气 硫化氢阴性、动力阴性抗原构造与分类我国以福氏志贺菌引起的菌痢最常见。O抗原K抗原 阻抑抗O抗体与O抗原结合菌种群型亚型痢疾志贺菌 A110福氏志贺菌B16，X，Y变种鲍氏志贺菌C118宋内志贺菌D1分为4群44个血清型（包括亚型） 对理化因素的抵抗力较其他肠道杆菌为弱。 对氯霉素、链霉素、氟哌酸、四环素、痢特灵、

11、黄连素、磺胺类等药物敏感，但容易出现耐药变异株。抵抗力 抗原结构、生化反应、毒力及对药物的敏感性易发生变异变异致病物质侵袭力：菌毛黏附回肠末端和结肠黏膜上皮细胞， 并侵入生长繁殖，产生炎症。毒素：外毒素内毒素派伊尔淋巴结的M细胞通过型分泌系统向上皮细胞和巨噬细胞分泌4种蛋白志贺菌IpaA IpaB黏附并侵入IpaCIpaD诱导细胞膜凹陷 导致细菌内吞志贺菌溶解吞噬小泡 进入细胞质内繁殖宿主细胞内肌动纤维的重排,推动细菌进入毗邻细胞细胞到细胞传播细菌逃避了免疫的清除作用而得到了自身保护通过诱导细胞程序性死亡从吞噬中得到了存活1.侵袭力 作用志贺菌派伊尔淋巴结的M细胞菌毛黏附并侵入1.侵袭力 繁殖

12、输送外源性Ag到其下方的巨噬细胞诱导细胞膜凹陷 导致细菌内吞细菌扩散并进入毗邻细胞淋巴组织细菌逃避了免疫的清除作用而得到了自身保护通过诱导细胞程序性死亡从吞噬中得到了存活引起白细胞介素-1的释放吸引多形核白细胞到 感染组织，肠壁完整性破坏细菌到达较深层的上皮细胞，加速了细菌的扩散2.内毒素内毒素肠黏膜通透性内毒素的吸收促进发 热神志障碍中毒性休克作用内毒素肠黏膜破坏炎症溃疡形成典型的脓血黏液便内毒素肠壁自主神经系统作用于肠功能紊乱肠蠕动失调和痉挛腹痛里急后重3.外毒素：志贺毒素由1个A亚单位和5个B亚单位组成。A亚单位：可裂解60S核糖体亚单位的28SrRNA，阻止与氨酰tRNA的结合，终止蛋

13、白质合成。B亚单位：与宿主细胞特异性糖脂受体结合(肠绒毛和肾上皮细胞均有高浓度的糖脂受体)毒素作用:引起上皮细胞微绒毛的破坏。个别病人志贺毒素可介导肾小球内皮细胞的损伤，导致溶血性尿毒综合征(HUS)所致疾病细菌性痢疾传染途径： 粪-口传染源： 病人和带菌者临床表现急性细菌性痢疾急性典型：发热、腹痛、里急后重,粘液脓血便急性中毒型：小儿中毒型慢性细菌性痢疾：病程迁移二月以上视频 中毒性痢疾病人免 疫 性 志贺菌感染局限于肠粘膜，一般不入血，消化道黏膜表面的分泌型IgA（SIgA）为主，病后免疫力短暂。及时送/暂用30%甘油缓冲水保存SS平板（无色透明小菌落）血清学反应（玻片凝集）最后诊断分离培

14、养新鲜脓血便/肛拭双糖培养基（生化反应）快速诊断荧光菌球试验协同凝集试验微生物学检查防治原则（1）控制传染源、切断传播途径、增进机体免疫力（2）口服减毒活疫苗。预防多种抗菌素可选择，但很易引起耐药性治疗Salmonella沙门菌属目的要求掌握：对人致病的沙门氏菌的种类、致病物质和所致疾病；肥达试验的原理、结果分析与判断。熟悉：沙门氏菌的主要生化反应、特异性预防。了解：沙门氏菌的形态、抵抗力及变异。概 述 是一大群寄生于人类和动物肠道中，生化反应和抗原构造相似的革兰氏阴性杆菌。 菌群菌型甚多，仅少数对人致病（伤寒沙门菌、副伤寒沙门氏菌等）。 有些沙门菌对动物致病，可传染人，引起食物中毒，如鼠伤寒

15、沙门菌、肠炎沙门菌、鸭沙门菌、猪霍乱沙门菌等。生物学性状大都周身鞭毛、有菌毛。 不分解乳糖在SS选择培养基上形成无色菌落。克氏双糖管中，斜面不发酵，底层产酸产气（伤寒沙门菌除外），硫化氢阳性或阴性、动力阳性常见沙门菌的主要生化特性抗原构造与分类O抗原：脂多糖，群特异性 O抗原刺激机体产生IgM型抗体H抗原：鞭毛蛋白 H抗原刺激机体产生IgG型抗体Vi抗原：多糖，与毒力有关。测定Vi抗体有助于检出伤寒及副伤寒带菌者。抵 抗 力 较差，对一般消毒剂敏感,但对胆盐、煌绿等的耐受性较其他肠道菌强，故胆盐、煌绿可用作沙门菌选择培养基，利于分离粪便中的沙门氏菌。致 病 物 质1、侵袭力：菌毛粘附作用2、内

16、毒素：发热、白细胞减少、中毒性休克3、肠毒素：类似ETEC产生的肠毒素、引起水样腹泻沙门菌派伊尔淋巴结的M细胞菌毛黏附并侵入1.侵袭力 具有耐酸应答基因氧化酶、超氧化物歧化酶Vi抗原繁殖输送外源性Ag到其下方的巨噬细胞诱导细胞膜凹陷 导致细菌内吞细菌扩散并进入毗邻细胞淋巴组织1、肠热症（伤寒和副伤寒）传染源：病人和带菌者、水源传播途径： 粪口典型病程：分四个阶段所 致 疾 病潜伏期伤寒沙门菌经口到小肠，侵入小肠末端的M细胞，被巨噬细胞吞噬后在细胞内繁殖。部分细菌通过淋巴液到达肠系膜淋巴结大量繁殖。初期细菌随淋巴液经胸导管进入血液（第一次菌血症），并扩散到肝、脾、肾、胆、骨髓等到部位。此阶段为临

17、床上的发病第一周，出现发热、不适、全身疼痛等前驱期症状。第一周取什么样品为标本？抗体的水平如何？极期在肝、脾、肾、胆、骨髓等部位繁殖。由巨噬细胞带入血液（第二次菌血症），胆囊中细菌通过胆汁进入肠道，部分随粪便排出，部分再次进入肠壁淋巴组织而激发超敏反应，导致局部坏死和溃疡，严重可造成肠出血及肠穿孔，肾中的细菌可随尿排出。此阶段为临床上的第2、3周，出现持续高热、相对缓脉、肝脾肿大、白细胞下降、皮肤玫瑰疹、全身中毒症状显著。第2、3周取什么样品为标本？抗体的水平如何？恢复期进入恢复阶段。病愈后部分患者可自粪便或尿液继续排菌3周至3个月，甚至1年，称恢复期带菌者。约有3%的伤寒患者成为慢性带菌者。

18、胆囊-肠道-粪排菌皮肤-玫瑰疹肾-尿排菌肝脾-肿大伤寒和副伤寒杆菌小肠黏膜肠系膜淋巴结 派伊尔淋巴结的M细胞进入血液再次进入血液第一次菌血症第二次菌血症肠热症（伤寒和副伤寒）的致病过程粪口途径伤 寒 玛 丽 2、肠炎型食物中毒临床表现：发热、恶心、呕吐、腹痛、腹泻。为摄入污染的食物，细菌在肠内繁殖所至。引起细菌：鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌。视频3、败血症引起细菌：猪霍乱沙门菌、丙型副伤寒沙门菌、鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门菌。临床表现：高热、寒战、厌食、贫血免 疫 性肠热症病后产生牢固免疫，细胞免疫为主。 特异性体液免疫也有辅助杀菌的作用。伤寒和副伤寒 食物中毒 败血症第1周取外周血 可疑食物 血液第1-3周取骨髓液 呕吐物第2周起粪便第3周取尿液 粪便微生物学检查：查病原标本SS平板生化反应血清学鉴定双糖发酵等凝集试验5020阳 性 率（%）12103040607080903456789凝集素粪便血尿伤寒病人不同病期血、粪、尿中病原菌和特异凝集素的检出阳性率1血2便3检尿，要检骨髓全知道发病后周数血清学检查：查抗体1、肥达试验（Widal test）原理：用已知伤寒沙门菌菌体O抗原、H抗原以及引起副伤寒的甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌和希氏沙门菌H抗原的诊断菌液与受检血清作试管或微孔板凝集试验，测定受检血清中有无中相应