川芎嗪对癫痫的作用及其与神经递质关系的研究

1、川芎嗪对癫痫的作用及其与神经递质干系的研究【摘要】目的研究川芎嗪(tetraethylpyrazine,TP)对癫痫的作用及其与神经递质谷氨酸glutaate,Glu、-氨基丁酸(-ainbutyri,GABA)的干系。要领接纳腹腔注射戊四氮(pentylenetetrazl,PTZ)诱发大鼠癫痫模子。将SD大鼠随机分为3组，即：生理盐水比较组；戊四氮致痫组；川芎嗪+戊四氮致痫组。接纳免疫构造化学要领检测各组大鼠大脑皮层、海马谷氨酸、-氨基丁酸阳性神经元的表达变革。效果戊四氮致痫组与比较组比，大脑皮层、海马Glu阳性神经元显着增多，大脑皮层、海马GABA阳性神经元显着淘汰，差异均有明显性意义(

2、P0.05)。川芎嗪干预后，大脑皮层、海马Glu阳性神经元显着淘汰，大脑皮层、海马GABA阳性神经元显着增多，差异均有明显性意义(P0.05)。结论川芎嗪能上调GABA阳性神经元数量,下调Glu阳性神经元数量。川芎嗪大概通过按捺脑内Glu的产生，促进脑内GABA的产生，从而使神经元的快乐性低落，按捺了癫痫的产生。【关键词】川芎嗪癫痫谷氨酸-氨基丁酸免疫构造化学StudyntheEffetsfTetraethylpyrazineinTreatingEpilepsyanditsRelatintNeurtransitterKeyrds:Tetraethylpyrazine(TP)；Epilepsy;

3、Glutaate(Glu)；-ainbutyri(GABA)；Iunsuppressant癫痫epilepsy是以神经元非常重复过分同步放电为特性的中枢神经体系临床综合征。谷氨酸glutaate，Glu和-氨基丁酸-ainbutyri，GABA别离是脑内最重要的快乐性和按捺性神经递质，二者配合维持着脑神经元快乐与按捺的平衡，其平衡失调被以为是癫痫的始发因素之一。前期研究事情表白1,2：IL-1，IL-6可诱发大鼠的癫痫爆发举动，并通过升高Glu含量低落GABA的含量，使神经元快乐性升高而促进癫痫产生。川芎嗪为中药川芎的有用身分，化学布局为四甲基比嗪Tetraethylpyrazine，TP，在

4、体内汲取后，能有用地透过血脑屏蔽,并普及漫衍大脑皮层、脑干、纹状体、海马、小脑和中脑等部位3,4，对脑成效具有普及调治作用，涉及了举动、学习、影象和基因表达等多方面5。同时，笔者以往的研究证明68：川芎嗪能显着按捺大鼠癫痫模子的痫样放电，对大鼠癫痫模子神经细胞的损伤具有庇护作用。本研究旨在通过癫痫动物模子检测川芎嗪预处置惩罚后对大鼠脑内谷氨酸glutaate，Glu和-氨基丁酸-ainbutyri，GABA含量的影响，以探究川芎嗪按捺癫痫的机制，从而为临床治疗癫痫提供充实的理论根据。1质料和要领1.1实行动物分组及模子制备选用SD雄性大鼠(广州医学院实行动物中央提供)24只,体重160200g

5、,实行室条件下喂养,随机分为3组,每组8只，A组：生理盐水比较组,腹腔注射生理盐水，B组：戊四氮致痫组，腹腔注射戊四氮4g/kg,诱发癫痫爆发举动,组：川芎嗪+戊四氮致痫组，腹腔注射川芎嗪40g/kg6，预处置惩罚10in后，再腹腔注射戊四氮4g/kg川芎嗪注射液40g/2l，北京第四制药消费，戊四氮，Siga公司消费。各组注射完毕后别离不雅察动物举动学表示2h。再断头取脑。1.2构造制备每只动物均在戊巴比妥钠(40g/kg)麻醉下行升主动脉灌流,先快注入生理盐水150l,然后滴注含4%多聚甲醛的磷酸缓冲液400l(pH7.4),立即取脑,后结实6h,入20%蔗糖液中留宿。越日，行恒冷箱切片(

6、-20),留取含大脑颞、顶叶皮质及背侧海马最大断面的切片30。1.4图像阐发及统计处置惩罚接纳HIAS-2000高清楚度彩色病理图文阐发体系对图片举行图像阐发。每例动物测两张切片,每组共16张切片,每张切片在注射侧海马A3区、齿状回及大脑皮质别离随机拔取两个100倍视野举行丈量。阐发指标:均匀光密度(D)及细胞计数。以上数据由阐发体系主动盘算。统计学处置惩罚接纳配对t查验。2效果2.1动物举动学表示按照Diehl9的评估尺度，将大鼠的癫痫爆发程度由轻到重分为0级。A组在注射生理盐水后动物无癫痫爆发；B组在注射戊四氮2in后,阵发性竖毛,髯毛发抖,前肢略微震颤,连续23in,重复爆发约4050i

7、n,为癫痫爆发级；组在注射完后,动物表示与A组相似，未见显着癫痫爆发。2.2免疫组化效果各组大鼠Glu免疫反响阳性细胞均匀光密度D值(见表1)，各组大鼠GABA免疫反响阳性细胞数(见表2)，戊四氮组与正常比较组比，在大脑皮质、海马A3区及齿状回Glu免疫反响阳性细胞均匀光密度值D值显着升高，GABA免疫反响阳性阳细胞数显着淘汰，不同均有明显性意义(P0.05)，川芎嗪+戊四氮致痫组与戊四氮组比，在大脑皮质、海马A3区及齿状回Glu免疫反响阳性细胞均匀光密度值D值显着低落，GABA免疫反响阳性阳细胞数显着增多，不同均有明显性意义(P0.05)，川芎嗪+戊四氮致痫组与正常比较组比力，不同无明显性意

8、义(P0.05)。表1各组大鼠Glu免疫反响阳性神经元均匀光密度D值(略)表2各组大鼠GABA免疫反响阳性神经元数量(略)3讨论Glu和GABA别离是脑内最重要的快乐性和按捺性神经递质，它们普及地漫衍于各脑区10，11，二者不但在成效上和谐同等，配合维持着脑神经元快乐与按捺的平衡，并且在代谢上严密相干，并可循环转换。癫痫的产生与它们的成效失衡有严密干系，因此，本实行侧重研究川芎嗪预处置惩罚后，对大脑皮质和海马地区Glu及GABA免疫细胞化学反响的变革。效果创造，川芎嗪预处置惩罚后，大鼠大脑皮质顶叶、颞叶区、海马锥体细胞层、齿状回颗粒细胞层和多形细胞层Glu免疫反响显着削弱，而GABA免疫反响在

9、大脑皮质顶叶、颞叶、海马分子细胞层显着加强，图像阐发表现差异具有统计学意义，此效果提示：川芎嗪按捺癫痫大概是通过调治Glu和GABA的代谢平衡，或调治二者的基因转录程度，而使快乐性神经递质Glu含量和按捺性神经递质GABA的含量重新规复平衡状态，使脑神经元快乐性规复正常，而按捺癫痫的产生。戊四氮是一种传统的致痫剂，有研究资料提示，戊四氮致痫的机制与GABAA受体体系有关。戊四氮可按捺GABAA受体导致l-内流淘汰，膜电位升高，神经元快乐性加强，作者以往的研究也创造戊四氮可使Glu含量升高，Glu含量升高，可直接使神经元快乐，导致癫痫的爆发。本实行不雅察到川芎嗪预处置惩罚后，海马内GABA阳性神

10、经元增多重要产生在其分子细胞层，按照海马的细胞构筑特点，在分子层内存在着一些中央神经元，它们是按捺性神经元，其成效是制止快乐扩散到海马的投射神经元，对投射神经元发放冲动起闸门操纵作用12。结合本实行GABA免疫反响神经元在分子层的阳性表达变革，笔者推测本实行中增多的海马A3区GABA能神经元大概就是这种按捺性中央神经元。而本实行Glu阳性神经元的淘汰在海马重要显如今锥体细胞层，后者正是海马的投射神经元。因此海马细胞构筑特性对本实行效果提供了形态学根据。海马地区神经元具有自觉放电、快乐阈值低的特性，因此与癫痫的产生有严密干系。川芎嗪也由于和谐了海马内Glu和GABA神经元的成效平衡，从而按捺了癫

11、痫的产生。本实行从形态学上直接证明了川芎嗪与Glu，GABA的严密干系,是在我们前期事情底子上的进一步深化,使我们对川芎嗪调治神经快乐性机制有了新的熟悉，同时也为中药的开拓使用提供了新的线索。【参考文献】1ZHUXiaxin,LIZhengli,ZHUhanggen,etal.hangesinBehavirandAinAidNeurtransittersintheBrainfRatsithSEizureInduedbyIL-1rIL-6J.JurnalfHuazhngUniversityfSieneandTehnlgyedialSienes,2022,25(3):236.2朱晓琴，李正莉，朱长

12、庚，等.IL-1或IL-6对大脑皮质星形胶质细胞细胞周期的影响J.神经剖解学杂志，2022，213：313.3TsalTH,Liang.PharaketisftetraethylpyrazineinratbldandbrainusingirdialysisJ.IntJPhara,2000,216(1-2):61.4Liang,HngY,henF,etal.easureentandPharakinetisstudyftetraethylpyrazineinratbldanditsreginalbraintissuebyhigh-perfrneliquilhatgraphyJ.hratgrBied

13、SiAppi,1999,724(2):303.5姚国恩,王景周,陈曼峨.川芎嗪对脑缺血后学习影象停滞的疗效不雅察J.脑与神经疾病杂志,2022,11(2):83.6朱晓琴,胡祁生，张端莲，等.川芎嗪对大鼠癫痫放电的影响J.青海医药杂志，2002,32(9):1.7朱晓琴,张端莲，胡祁生，等.川芎嗪对青霉素致痫大鼠神经元内-fs表达的影响J.武汉大学学报医学版，2002,23(4):125.8朱晓琴,张端莲,胡祁生,等.川芎嗪对青霉素致痫大鼠神经细胞的影响J.数理医药学杂志，2002，156：303.9DiehlRG,SialskiA,GtT.DevelpentandpersistenefkindledseizuresafterrepeatedinjetinsfpentylenetetrazlinratsandguineapigsJ.Epilepsia,1984,25(4):506.10FaingldL.RlefGABAabnralitiesintheinferirlliuluspathphysilgaudigeniseizu