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文档简介
1、关于原核生物与真核生物转录时候的区别第1页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四(一)什么是基因转录?遗传信息从基因转移到RNA的过程。RNA聚合酶通过与一系列组分构成动态复合体,并以基因序列为遗传信息模板,催化合成序列互补的RNA,包括转录起始、延伸、终止等过程。第2页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四1. 对一个基因组(genome),转录只发生在一部分基因。2. RNA的合成方向是: 5 33. RNA合成的起始不需要引物4. RNA合成遵循严格的碱基互补配对原则5. 新合成的RNA5端具有三磷酸结构,第一个常为嘌呤核苷酸(二)转录的基本特征Gener
2、al Features of Transcription第3页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四7.不对称转录: DNA双链中仅一股链可作为模板而转录,另一条链不转录;模板链并非永远在同一单链上。6.以NTP为底物;第4页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四(三)与转录有关的DNA结构 DNA Structures Related to Transcription1.转录单位与转录子 (Transcription unit and transcript)2.启动子(Promoter)3.转录终止信号 (Termination signals of tran
3、scription)4.转录因子(Transcription factors)5.增强子(Enhancer)第5页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四* 转录单位:DNA链上从启动子直到终止点之间的DNA序列称为一个转录单位。* 操纵子(operon):原核生物一个转录单位, 称为操纵子 ,由若干个结构基因及其上游的调控序列所组成。* 转录子:由2个或2个以上紧密连锁,并共同转录形成一种mRNA分子的结构基因组成的复合单位。1. 转录单位与转录子第6页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四 定义: DNA分子上可与RNA聚合酶特异结 合,而使转录开始的一段DN
4、A序 列。本身不被转录。2.启动子(Promoter)第7页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四3. 转录因子(Transcription Factors,TF)主要参与转录的起始第8页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四4.增强子(Enhancer)定义: 是指能使和它连锁的基因转录频 率明显增加的DNA序列。真核基因高效表达的一种远端调控 元件,一般跨度为100-200bp,具有 特征性的核苷酸序列组成。第9页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四5. 转录终止信号 Termination Signals of Transcription
5、原核生物(大肠杆菌): 1. 依赖因子的终止子( Rho-dependent terminators )2. 内在的终止子(intrinsic terminators,即不依赖因子的终止信号) 真核:poly(A)加尾信号AATAAA第10页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四 (四)基因转录的过程一、转录模板二、DNA指导的RNA聚合酶三、模板与酶的辨认结合四、基因转录的过程第11页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四53532. 方框内的DNA区段为结构基因3. 为模板链,也称有意义链或Watson链1. 箭头示转录产物及转录方向4. 为编码链,也称反义
6、链或Crick链一、转录模板第12页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四5G C A G T A C A T G T C33C G T C A T G T A C A G55G C A G U A C A U G U C3mRNAN Ala . Val . His . Val C多肽链转录翻译编码链模板链第13页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四二、RNA聚合酶(RNA pol)RNA pol又叫转录酶抄录酶DNA指导的RNA聚合酶DDRP(一).原核生物的RNA聚合酶(E.Coli)全 酶核心酶亚基2holoenzymecore enzymeMw:480
7、KDa五个亚基第14页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四(二)真核生物的RNA聚合酶表5-2 真核生物RNA pol的种类与功能 种类 转录产物 对鹅膏蕈碱的敏感性 RNA pol RNA pol RNA pol 45S是5.8S 、 18S和28S rRNA的前体hnRNA是mRNA的前体45S rRNA 耐受hnRNA和snRNA 极敏感tRNA和5S-rRNA 中度敏感第15页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四PS1S2S3启动子OPromoter调控序列结构基因 操纵子(operon) 结合RNA聚合酶表达功能蛋白?I三、模板与酶的辨认结合操纵子
8、(operon):原核生物的转录单位第16页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四RNA聚合酶 保护区结构基因终止点10-10TTGACATATAAT转录开始+1翻译开始Purine-35(Pribnow box)辨认结合区转录起始区 RNA pol能否才能知道RNA pol 的结合部位的DNA序列?第17页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四四、转录过程起始延长终止三阶段第18页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四2. DNA双链解开1. RNA聚合酶全酶(2)与模板结合 3. 在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应,形成转录起始复合物RN
9、Apol (2) - DNA - pppGpN- OH 3转录起始复合物:5-pppG -OH + NTP 5-pppGpN - OH 3 + ppi(一)转录起始过程:原核生物的转录过程第19页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四(二)转录延长1. 亚基脱落,RNApol聚合酶核心酶变构,与模板结合松弛,沿着DNA模板前移; 2. 在核心酶作用下,NTP不断聚合,RNA链不断延长。(NMP) n + NTP (NMP) n+1 + PPi第20页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四1.依赖Rho ()因子的转录终止2.非依赖Rho因子的转录终止(三)转录终
10、止指RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来不再前进,转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。 分类(一)原核生物的转录终止因子 (Pr)1. 识别结合富含C的RNA链功能:2. ATPase活性3. 解螺旋酶(helicase)活性第21页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四真核生物的转录过程(一)转录起始真核生物的转录起始上游区段比原核生物多样化,转录起始时,RNA-pol不直接结合模板,其起始过程比原核生物复杂。第22页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四 转录起始点上游多数有共同的5-TATA序列,称为Hogness盒或TATA盒。 不同物种、不同细胞、不
11、同的基因,可以有不同的上游DNA序列,但都可统称为顺式作用元件(cis-acting element)。第23页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四真正转录终止点GCGC-CAAT-TATA-ATGAATAAA修饰点外显子内含子翻译起始转录起始TATA盒(Hogness box)CAAT盒 GC盒增强子切离加尾顺式作用元件翻译终止OCT-1:ATTTGCAT八聚体增强子:远离受影响的基因而调控转录的DNA序列称之。OCT-1 转录起始前的上游区段 第24页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四(二)转录延长 真核生物转录延长过程与原核生物大致相似,但因有核膜相
12、隔,没有转录与翻译同步的现象。 RNA-pol前移处处都遇上核小体。 转录延长过程中可以观察到核小体移位和解聚现象。 第25页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四(三)真核生物的转录终止AAUAAAGUGUGUGAATAAA GTGTGT3processing (核酸内切酶)AAUAAAPoly(A)NucleaseHelicase hnRNA5Release转录终止修饰点第26页,共29页,2022年,5月20日,2点45分,星期四(五)原核生物与真核生物转录的区别原核 真核转录与翻译 几乎同时进行 转录在胞核;翻译在胞浆RNA聚合酶 1 种 I,II, III起始点识别 -35区,-10区 TATA盒等顺式作用元件转录终止 依赖或不依赖于因子 AATAAA修饰点转录产物 多顺反子 单顺反子转录后修饰 无或很少 复杂第27页,共29页,2022
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