第15章免疫学检测方法及其原理课件

1、第15章 免疫学检测方法及其原理1解释血清学反应的概念和特点2叙述抗原抗体检测方法及用途3简述免疫标记技术的原理和方法4简述T细胞功能检测的方法 学习目标第15章免疫学检测方法及其原理第15章 免疫学检测方法及其原理1解释血清学反应的概念和特第1节 抗原和抗体的检测 一、原理利用抗原抗体在体外特异性结合后出现的各种现象，可对样品中的抗原或抗体进行定性、定位和定量的检测 未知抗体抗原已知抗原抗体检测检测第15章免疫学检测方法及其原理第1节 抗原和抗体的检测 一、原理利用抗原抗体在体外特异性二、特点3可见性是抗原抗体检测的基本原理 是抗原抗体亲和度大小的体现是形成可见复合物的关键1特异性2可逆性第

2、15章免疫学检测方法及其原理二、特点3可见性是抗原抗体检测的基本原理 三、常见的抗原抗体反应种类1凝集反应（agglutination） 颗粒性抗原（细菌或细胞）与相应抗体结合后，在一定条件下，出现肉眼可见的凝集物，称凝集反应 直接凝集反应间接凝集反应玻片法试管法定性试验，如血型鉴定 半定量试验，如肥达反应 将可溶性抗原吸附于一种与免疫无关的颗粒状载体表面，成为致敏颗粒（免疫微球），再与相应抗体结合出现凝集现象称为间接凝集反应。 第15章免疫学检测方法及其原理三、常见的抗原抗体反应种类1凝集反应（agglutinat第15章免疫学检测方法及其原理第15章免疫学检测方法及其原理2沉淀反应（pre

3、cipitation） 可溶性抗原（血清蛋白、外毒素、组织浸出液、细菌滤液等）与相应抗体结合，在一定条件下，形成肉眼可见的沉淀物，称沉淀反应。 第15章免疫学检测方法及其原理2沉淀反应（precipitation） 可溶性（1）单向琼脂扩散试验第15章免疫学检测方法及其原理（1）单向琼脂扩散试验第15章免疫学检测方法及其原理（2）双向琼脂扩散试验（3）对流免疫电泳3补体参与的反应（complement mediated reactions）第15章免疫学检测方法及其原理（2）双向琼脂扩散试验第15章免疫学检测方法及其原理4免疫标记技术（immunolabelling technique）（1）

4、免疫荧光法（immunofluorescence technique） 第15章免疫学检测方法及其原理4免疫标记技术（immunolabelling techn（2）免疫酶技术（immunoenzymatic techinques， EIA） 图15-5 ELASA操作原理示意图（3）放射免疫测定法（radioimmunoassay，RIA） 第15章免疫学检测方法及其原理（2）免疫酶技术（immunoenzymatic techi第2节 免疫细胞及其功能的检测一、免疫细胞数量的检测流式细胞术第15章免疫学检测方法及其原理第2节 免疫细胞及其功能的检测一、免疫细胞数量的检测流式细二、免疫细胞功

5、能的检测1T细胞功能的检测 （1）淋巴细胞转化试验 （2）细胞毒试验 2B细胞功能检测 B细胞增殖试验抗体形成细胞测定第15章免疫学检测方法及其原理二、免疫细胞功能的检测1T细胞功能的检测 （1）淋巴细胞3检测细胞免疫功能的皮肤试验 正常机体对特定抗原产生细胞免疫应答后，再用相同抗原做皮肤试验，即出现以局部红肿为特征的迟发性超敏反应，细胞免疫正常者呈阳性反应，而细胞免疫低下者则呈阴性反应。 第15章免疫学检测方法及其原理3检测细胞免疫功能的皮肤试验 正常机体对特定抗原产生细胞免第3节 细胞因子的检测1生物活性检测2免疫学检测法3生物学检测 第15章免疫学检测方法及其原理第3节 细胞因子的检测1生物活性检测第15章免疫学检测方第4节 HLA分型技术 一、血清学分型技术1HLA-类抗原的检测 HLA-A、B、C抗原型别鉴定常规使用微量补体依赖淋巴细胞毒试验（CDC试验）。 2HLA-DR、DQ抗原检测 第15章免疫学检测方法及其原理第4节 HLA分型技术 一、血清学分型技术1HLA-类二、细胞学分型技术LA-Dw和HLA-DP抗原的特异性可用混合淋巴细胞反应（MLR）检测。 三、分子生物学分型技术 1聚合酶链反应与SSP分型法 2PCR-SSO分型法 3SBT分型法 第15章免疫学检测方法及其原理二、细胞学分型技术LA-Dw和