细菌负荷定量检测的临床意义课件

1、细菌负荷定量检测的临床意义细菌负荷定量检测的临床意义（优选）细菌负荷定量检测的临床意义（优选）细菌负荷定量检测的临床意义PCR检测技术简介聚合酶链反应(PCR)已经成为现代分子生物学实验中最重要的工具，PCR的出现为分离基因、DNA测序等提供了一种快捷、高效的方法PCR的原理和细胞内发生的DNA复制过程十分相像，可以使DNA分子在数小时(24小时)内扩增230倍以上，使之达到可以检测的水平在临床实验中，PCR已用于病原体的检测和流行病学研究，本法对于传统培养等检测方法繁复，灵敏度低，特异性差，或尚未建立可靠检测方法的微生物尤为适用3PCR检测技术简介聚合酶链反应(PCR)已经成为现代分子生物1

2、.Waterer G et al. Current Opinion in Infectious Diseases 2011;24:137141MI: 1.5627治疗社区获得性肺炎(CAP)时为何应检测细菌负荷量?41.Waterer G et al. Current Opi细菌负荷量的检测可预测患者预后既往研究提示，伴脓毒症风险的CAP患者，其治疗方案不同于其他患者最近研究表明细菌负荷量高的CAP患者愈后较差，这些发现改变了脓毒症的治疗模式，细菌负荷量与患者是否应进行脓毒症相关治疗、是否转入ICU、是否需要进行更多的侵入性操作等密切相关PCR检测技术可准确检测血液中的细菌负荷量以及部分特殊病

3、原体的负荷量细菌负荷量不仅能预示患者的预后，而且这些数据对重度脓毒症的发病机理及临床最佳抗生素的选择具有重要的意义1.Waterer G et al. Current Opinion in Infectious Diseases 2011;24:1371415细菌负荷量的检测可预测患者预后既往研究提示，伴脓毒症风险的C肺炎链球菌肺炎疾病严重程度与细菌负荷量相关MI: 6.03632.Rello J et al. CHEST 2009; 136:8328406肺炎链球菌肺炎疾病严重程度与细菌负荷量相关MI: 6.036研究简介研究目的评估社区获得性肺炎(CAP)患者细菌负荷量与患者脓毒性休克及预

4、后的相关性研究方法一项前瞻性研究，患者均为住院的CAP患者细菌负荷量检测采用rtPCR技术测定血标本中肺炎链球菌的细菌负荷量主要研究终点脓毒性休克的发生率及需行机械通气的患者比例次要研究终点急性肾功能衰竭(AKI)、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的发生率及院内死亡率2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:8328407研究简介研究目的2.Rello J et al. CHEST患者细菌负荷量分布肺炎链球菌肺炎患者细菌负荷量分布患者百分比(%)(log10拷贝/mL)2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:8328408患者细菌负荷量分布肺炎链

5、球菌肺炎患者细菌负荷量分布患者百分比细菌负荷量影响患者脓毒性休克的发生率随着肺炎链球菌细菌负荷量的增加，患者脓毒性休克的发生率明显上升脓毒性休克的发生率(%)P0.05(log10拷贝/mL)2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:8328409细菌负荷量影响患者脓毒性休克的发生率随着肺炎链球菌细菌负荷量细菌负荷量影响需机械通气的患者比例高细菌负荷量的患者需要机械通气的比例明显高于低负荷患者需机械通气的患者比例(%)P=0.001数据显示，细菌负荷量每增加1log10拷贝/mL，需机械通气的患者比例则增加2倍log10拷贝/mL可能需机械通气的患者比例3/66 9/2

6、72.Rello J et al. CHEST 2009; 136:83284010细菌负荷量影响需机械通气的患者比例高细菌负荷量的患者需要机械细菌负荷量影响患者死亡率提示可能存在的“ 接种物效应”高细菌负荷量的患者死亡率明显高于低负荷患者Rello J et al.CHEST 2009; 136:832840正因为如此，导致实验室药敏结果与体内药物敏感性不完全一致，出现病原体虽然对抗菌药物敏感，但治疗失败率高的现象。研究显示，细菌负荷量可预示患者的预后内酰胺类/内酰胺酶抑制剂：哌拉西林/他唑巴坦高细菌负荷量的患者需要机械通气的比例明显高于低负荷患者是 否 是 否 是 否实验室测定药物敏感性时

7、，标准接种菌量为5105CFU/ml。是 否 是 否 是 否Darton T et al.ANTIMICROBIAL AGENTS AND CHEMOTHERAPY.实验室测定药物敏感性时，标准接种菌量为5105CFU/ml。Darton T et al.细菌负荷量影响患者预后高细菌负荷量的患者出现AKI和ARDS的比例明显高于低负荷患者患者百分比(%)P0.00110/66 15/27 1/66 5/27P=0.0072.Rello J et al. CHEST 2009; 136:83284011细菌负荷量影响患者死亡率细菌负荷量影响患者预后高细菌负荷量的细菌负荷量影响患者死亡率患者死亡率

8、(%)P=0.0124/66 7/27高细菌负荷量的患者死亡率明显高于低负荷患者2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:83284012细菌负荷量影响患者死亡率患者死亡率(%)P=0.0124/6研究结论随着细菌负荷量的增加，感染患者出现脓毒性休克的比例及需机械通气的比例明显上升感染患者细菌负荷量影响患者预后：高细菌负荷量的患者出现AKI、ARDS的比例及死亡率明显高于低负荷患者2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:83284013研究结论随着细菌负荷量的增加，感染患者出现脓毒性休克的比例及脑膜炎球菌感染疾病严重程度与细菌负荷量相关3.Da

9、rton T et al. Clinical Infectious Diseases 2009; 48:58794MI: 5.83514脑膜炎球菌感染疾病严重程度与细菌负荷量相关3.Darton 研究简介研究目的评估脑膜炎奈瑟菌细菌负荷量与感染患者住院时间的相关性以及影响患者死亡风险的高危因素研究方法一项为期3年的临床研究，患者均为脑膜炎奈瑟菌感染的住院患者细菌负荷量检测采用rtPCR技术测定血标本中脑膜炎奈瑟菌的细菌负荷量评估宿主因素(如年龄、细菌负荷量等)对患者死亡率的影响3.Darton T et al. Clinical Infectious Diseases 2009; 48:587

10、9415研究简介研究目的3.Darton T et al. Clin细菌负荷量影响患者预后研究显示细菌负荷量与患者住院时间、肾透析以及肢体缺失或皮肤移植密切相关细菌负荷量(log10拷贝/mL)是 否 是 否 是 否P0.001P0.001P=0.0013.Darton T et al. Clinical Infectious Diseases 2009; 48:58794N=50416细菌负荷量影响患者预后研究显示细菌负荷量与患者住院时间、肾透PATERSON DL et al.Darton T et al.感染患者细菌负荷量影响患者预后：高细菌负荷量的患者出现AKI、ARDS的比例及死亡率

11、明显高于低负荷患者Current Opinion in Infectious Diseases 2011;24:137141内酰胺类/内酰胺酶抑制剂：哌拉西林/他唑巴坦Clinical Infectious Diseases 2009; 48:58794细菌负荷定量检测的临床意义Darton T et al.显示接种效应的菌株比例PCR的原理和细胞内发生的DNA复制过程十分相像，可以使DNA分子在数小时(24小时)内扩增230倍以上，使之达到可以检测的水平高细菌负荷量的患者需要机械通气的比例明显高于低负荷患者Clinical Infectious Diseases 2009; 48:58794

12、主要研究终点脓毒性休克的发生率及需行机械通气的患者比例3/11 1/3 2/3 6/6Clinical Infectious Diseases 2009; 48:58794对32例产ESBL肠杆菌菌血症患者的调查分析，体外药敏试验显示，致病菌株对头孢菌素(头孢噻肟、头孢三嗪、头孢唑肟、头孢吡肟、头孢他定)敏感或中介碳青霉烯类：美罗培南；细菌负荷定量检测的临床意义4/66 7/27细菌负荷量影响患者死亡率死亡组患者的细菌负荷量明显高于存活组患者细菌负荷量(log10拷贝/mL)P0.001n=950 n=95多因素回归分析显示：随着细菌负荷量的增加，患者死亡风险明显上升变量优势比(95%CI)P

13、值年龄(每增加1岁)1.04 (1.021.06)0.001细菌负荷量(每增加1log10拷贝/mL)2.04 (1.532.71)1288644256PAB-CS7SHV-70.030.032561,02481281,0241,024264PAB-C43TEM-430.030.06641,0241321612824PAB-C12TEM-120.030.0632512412821628PAB-C10TEM-100.030.032561,024412812851222PAB-C-4TEM-40.030.03321284128326424PAB-C3TEM-30.030.0632256412816

14、3224研究显示，碳青霉烯类不存在接种物效应，三代和四代头孢菌素、单环内酰胺类及内酰胺类/内酰胺酶抑制剂均存在接种效应碳青霉烯类：美罗培南；三代头孢：头孢他啶；四代头孢：头孢吡肟；单环内酰胺类：氨曲南； 内酰胺类/内酰胺酶抑制剂：哌拉西林/他唑巴坦接种效应的定义：在高接种菌量时(5*107CFU/ml) MIC值比标准接种菌量时(5*105CFU/ml)升高8倍内酰胺类(除外碳青霉烯类) 存在接种物效应4.THOMSO头孢菌素对大多数产ESBL肠杆菌显示接种物效应5.吴娜等.中国感染与化疗杂志.2011;11(1):31-35内酰胺类/内酰胺酶抑制剂三代头孢四代头孢碳青霉烯测定不同抗菌药物对2

15、2株产ESBL大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌在标准接种菌量(5*105CFU/ml)及高接种菌量(5*107CFU/ml) 的MIC值，评估其接种效应碳青霉烯类：美罗培南；三代头孢：头孢他啶；四代头孢：头孢吡肟； 内酰胺类/内酰胺酶抑制剂：哌拉西林/他唑巴坦显示接种效应的菌株比例头孢菌素对40-87%产ESBL大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌显示接种效应头孢菌素对大多数产ESBL肠杆菌显示接种物效应5.吴娜等.中2001;39(6):22062212PCR的原理和细胞内发生的DNA复制过程十分相像，可以使DNA分子在数小时(24小时)内扩增230倍以上，使之达到可以检测的水平细菌负荷量不仅能预示患者的预后，

16、而且这些数据对重度脓毒症的发病机理及临床最佳抗生素的选择具有重要的意义感染患者细菌负荷量影响患者预后：高细菌负荷量的患者出现AKI、ARDS的比例及死亡率明显高于低负荷患者细菌负荷量不仅能预示患者的预后，而且这些数据对重度脓毒症的发病机理及临床最佳抗生素的选择具有重要的意义Darton T et al.Darton T et al.主要研究终点脓毒性休克的发生率及需行机械通气的患者比例显示接种效应的菌株比例CHEST 2009; 136:8328403/11 1/3 2/3 6/6CHEST 2009; 136:832840JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY.研究

17、显示，细菌负荷量可预示患者的预后Darton T et al.感染患者细菌负荷量影响患者预后：高细菌负荷量的患者出现AKI、ARDS的比例及死亡率明显高于低负荷患者细菌负荷量与感染患者住院时间以及后遗症的发生率密切相关4/66 7/27CHEST 2009; 136:832840CHEST 2009; 136:832840Rello J et al.存在接种物效应的抗菌药物治疗敏感或中介菌株感染时临床治疗失败率高治疗失败率(%)对32例产ESBL肠杆菌菌血症患者的调查分析，体外药敏试验显示，致病菌株对头孢菌素(头孢噻肟、头孢三嗪、头孢唑肟、头孢吡肟、头孢他定)敏感或中介6.PATERSON D

18、L et al. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY.2001;39(6):22062212头孢菌素治疗产ESBL菌株感染时，虽然药敏试验显示敏感但治疗失败率高2001;39(6):22062212存在接种物效应的抗菌随着MIC值的增加，头孢菌素治疗产ESBL肠杆菌感染的失败率逐渐上升治疗失败率(%)虽然药敏试验显示敏感(MIC8g/ml)，但随着MIC值的增加，头孢菌素治疗产ESBL肠杆菌感染的失败率逐渐上升6.PATERSON DL et al. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY.2001;39(6):22062212对32例产

19、ESBL肠杆菌菌血症患者的调查分析，体外药敏试验显示，致病菌株对头孢菌素(头孢噻肟、头孢三嗪、头孢唑肟、头孢吡肟、头孢他定)敏感或中介3/11 1/3 2/3 6/626随着MIC值的增加，头孢菌素治疗产ESBL肠杆菌感染的失败Rello J et al.Clinical Infectious Diseases 2009; 48:58794Clinical Infectious Diseases 2009; 48:58794实验室测定药物敏感性时，标准接种菌量为5105CFU/ml。随着细菌负荷量的增加，感染患者出现脓毒性休克的比例及需机械通气的比例明显上升内酰胺类(除外碳青霉烯类) 存在接种

20、物效应Current Opinion in Infectious Diseases 2011;24:137141随着MIC值的增加，头孢菌素治疗产ESBL肠杆菌感染的失败率逐渐上升碳青霉烯类：美罗培南；研究显示，碳青霉烯类不存在接种物效应，三代和四代头孢菌素、单环内酰胺类及内酰胺类/内酰胺酶抑制剂均存在接种效应3/11 1/3 2/3 6/6JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY.主要研究终点脓毒性休克的发生率及需行机械通气的患者比例脑膜炎奈瑟菌细菌负荷量与感染患者住院时间以及后遗症的发生率密切相关感染患者细菌负荷量影响患者预后：高细菌负荷量的患者出现AKI、ARDS

21、的比例及死亡率明显高于低负荷患者提示可能存在的“ 接种物效应”Darton T et al.在临床实验中，PCR已用于病原体的检测和流行病学研究，本法对于传统培养等检测方法繁复，灵敏度低，特异性差，或尚未建立可靠检测方法的微生物尤为适用JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY.Darton T et al.碳青霉烯类：美罗培南；2011;11(1):31-35研究显示细菌负荷量与患者住院时间、肾透析以及肢体缺失或皮肤移植密切相关Darton T et al.评估社区获得性肺炎(CAP)患者细菌负荷量与患者脓毒性休克及预后的相关性脑膜炎奈瑟菌细菌负荷量与感染患者住院时间以

22、及后遗症的发生率密切相关CHEST 2009; 136:8328403/11 1/3 2/3 6/6细菌负荷定量检测的临床意义测定不同抗菌药物对22株产ESBL大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌在标准接种菌量(5*105CFU/ml)及高接种菌量(5*107CFU/ml) 的MIC值，评估其接种效应头孢菌素对40-87%产ESBL大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌显示接种效应细菌负荷量影响患者预后聚合酶链反应(PCR)已经成为现代分子生物学实验中最重要的工具，PCR的出现为分离基因、DNA测序等提供了一种快捷、高效的方法细菌负荷量影响患者预后主要研究终点脓毒性休克的发生率及需行机械通气的患者比例对于细菌负荷量高的感染患者，是否应避免使用存在接种物效应的抗菌药物？而抗菌药物在高接种菌量时对细菌的MIC值比标准接种菌量时明显升高的现象称之为接种物效应。2001;39(6):22062212碳青霉烯类：美罗培南；脑膜炎球菌感染疾病严重程度与细菌负荷量相关头孢菌素治疗产ESBL菌株感染时，虽然药敏试验显示敏感但治疗失败率高高细菌负荷量的患者死亡率明显高于低负荷患者显示接种效应的菌株比例2001;39(6):