高效液相色谱法测定青蒿不同部位山柰素含量

1、高效液相色谱法测定青蒿差异部位山柰素含量【关键词】高效液相色谱法；青蒿；山柰素Keyrds：HPL;Qingha;Kaepferl青蒿为传统清热解暑要药，泉源于菊科蒿属植物黄花蒿ArteisiaannuaL.的枯燥地上部门1，性味苦寒，归肝、胆、肾经，具清热、祛暑、除蒸、截疟等成果，临床上重要用于治疗阴虚发热、暑热外感、疟疾、湿热黄疸诸证。青蒿药用汗青久长，天下各地均有漫衍。古代本草纪录中除有青蒿地上部门供药用外，另有青蒿根的药用纪录2；民间验方中亦有利用青蒿根治疗多种疾病的环境。因此，青蒿这味因青蒿素而备受人们存眷的药急迫必要我们的深化研究，拓展其药用代价。青蒿的化学身分种类较多，重要含有挥

2、发油、倍半萜内酯类、黄酮类、香豆素类等。如今，青蒿中的挥发油、青蒿素和香豆素类身分如东莨菪内酯等3均有其身分阐发和含量测定的报道，但是，黄酮类身分的相干报道却未曾见过。山柰素为青蒿中黄酮类化合物之一，具有抗癌4、抗炎等药理活性，能反响青蒿的部门成果，因此，可作为一个指标身分举行阐发。本文初次创立了青蒿中山柰素的高效液相色谱HPL含量测定要领，并对青蒿差异部位叶、花、根、茎的山柰素含量举行阐发和比力，为青蒿药材和制剂的质量操纵提供参考。1仪器与试药岛津SPD-10A，L-10AT高效液相色谱仪；UV1100紫外可见分光光度计。山柰素比较品中国药品生物成品检定所，供含量测定用；乙腈、甲醇为色谱纯，

3、水为纯洁水，别的试剂均为阐发纯。青蒿药材采自四川省安岳县青蒿基地，经笔者断定为菊科植物黄花蒿ArteisiaannuaL.的枯燥全株。2要领与结果2.1色谱条件色谱柱：岛津VP-DS1504.6，5；活动相为乙腈0.2%磷酸溶液35:65；测定波长367n；流速0.8l/in；柱温30；进样量：20l。在该条件下，山柰素色谱峰与相邻色谱峰到达基线分散，分散度大于1.5，理论塔板数N按山柰素峰盘算为4000以上。比较品和样品色谱图见图1。2.2线性范畴的观察细密称取山柰素比较品适量，加甲醇制成每毫升含山柰素0.02g的溶液，即得。将上述比较品溶液制成一系列差异浓度的比较品溶液，别离进样20l，按

4、上述色谱条件测定其峰面积。以山柰素进样量X为横坐标、峰面积Y为纵坐标，求得尺度曲线的回归方程为：Y5000000X98335，R0.9999。结果表白，山柰素在0.02180.436g范畴内呈精良线性干系。2.4细密度实行细密汲取比较品溶液20l，一连进样6次，依法测定，纪录峰面积，RSD为0.80%。2.5重复性实行取同批药材6份，细密称定，按“2.3项下供试品溶液制备要领制备，依法测定，纪录峰面积，盘算山柰素的含量，均匀含量为0.6751g/g，RSD为1.14%。a-山柰素比较品b-青蒿样品图1HPL色谱图2.6不变性实行2.7加样接纳率实行取含量的青蒿全株样品粉末9份，每份约0.5g，

5、细密称定，别离参加山柰素比较品21.8g/l10，15，20l，按“2.3项下供试品溶液制备要领制备，并依法测定。盘算接纳率，结果山柰素的均匀接纳率为98.70%，RSD为1.20%。3种程度9次实行的加样接纳率测得结果均在95%105%之间，说明山柰素的提取和检测要领可行。2.8样品测定别离汲取比较品溶液和青蒿差异部位叶、花、根、茎的供试品溶液各20l，注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件测定，并盘算山柰素的含量。结果见表1。3讨论通过紫外分光光度计对山柰素比较品的甲醇溶液，在200400n波长范畴内举行扫描。结果创造，山柰素在215，268及367n处均有汲取峰，由于215n靠近溶剂末了汲取

6、，滋扰较大，268n波长下滋扰峰较多，分散度较差，而在367n处敏捷度高，杂质滋扰小，末了选择367n为含量测定的检测波长。实行中参考相干文献58，观察了供试品溶液制备要领，比力了差异提取要领、差异提取溶剂、差异提取时间、差异溶剂体积，末了确定以甲醇回流提取结果较好。青蒿中的黄酮类化合物以苷元及苷的情势存在，因此，本实行接纳酸水解后，再测定苷元的含量。表1青蒿的叶、花、根、茎含量测定结果色谱条件观察时，比力了差异比例的甲醇0.2%磷酸溶液，结果样品峰分散度均较差。颠末屡次试验探究，终极确定以乙腈0.2%磷酸溶液3565作为含量测定的活动相，在该条件下得到的色谱峰峰形锋利，分散度高。本文初次创立

7、了青蒿中山柰素的HPL含量测定要领，而且举行了要领学观察，结果表现该要领正确度高、专属性强、敏捷度及不变性均较好，测定要领可靠，测定结果能客不雅反响青蒿药材中山柰素的含量。由该要领下测定的结果可见，青蒿叶中山柰素含量最高，花次之，根较少，茎最低。山柰素为青蒿中黄酮类身分之一，对其含量测定要领的研究，富厚了青蒿除青蒿素外别的有用身分研究的内容，为青蒿药材的开拓利用提供了科学根据。本文仅对青蒿中的一种黄酮类身分举行了研究，以后还应进一步对其化学身分、药理作用等举行全面的研究，为青蒿的体系开拓奠基基矗【参考文献】1国度药典委员会中国药典，部S.北京：化学产业出书社，2022：1372国度中医药办理局?中华本草?中华本草.上海：上海科技出书社，1999：6583杨岚，王满元，张东，等青蒿药材中东莨菪内酯的含量测定J.中药实行方剂学杂志，2022，1210：104刘彦芳，魏品康山柰素对裸鼠原位移植人胃癌细胞凋亡及转移影响的实行研究J.中华有用中西医杂志，2022，1815：5915雷鹏，刘韶，李新中，等HPL测定地锦草中槲皮素、山柰素的含量J.中药材，2022，288：6666孔聪明，崔青娟，伊