401专一基础班2013讲义版1-62第31讲

1、药学专业知识（一）药物分析第十七章 抗生素类药物的分析主讲:朱敬杰常用药物的分析1.抗生素类药物分（1）检查项目析的特点（2）含量和效价测定的方法（九）维生素类药物的分析2.青霉素钠和青霉素钾青霉素钠和青霉素钾的鉴别方法、检查项目和方法、含量测定方法注射用青霉素钠、注射用青霉素钾的鉴别方法、检查项目和含量测定方法3.阿莫西（1）阿莫西林的鉴别方法、检查项目和方法、含量测定方法林（2）阿莫西林制剂的鉴别方法、检查项目和含量测定方法4.头孢羟（1）头孢羟氨苄的鉴别方法、检查项目和方法、含量测定方法氨苄（2）头孢羟氨苄制剂的鉴别方法、检查项目和含量测定方法考试大纲要求常用药物的分析（1）硫酸庆大霉素

2、的鉴别方法、检查项目和方法、含量测定方5.硫酸庆法大霉素（2）硫酸庆大霉素制剂的鉴别方法、检查项目、含量测定方法（九）（3)体内样品中庆大霉素的测定维生素类药物的分析6.盐酸四环素盐酸四环素的鉴别方法、检查项目和方法、含量测定方法盐酸四环素制剂的鉴别方法、检查项目和含量测定方法7.阿奇霉（1）阿奇霉素的鉴别方法、检查项目和方法、含量测定方法素（2）阿奇霉素制剂的鉴别方法、检查项目和含量测定方法（3）体内样品中阿奇霉素的测定考试大纲要求第十七章抗生素类药物的分析抗生素：是一类在低微浓度下即可对某些生物（病原微生物）的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称。抗生素多数通过微生物发酵生产，部分由化学

3、合成或半合成方法制备。特点：结构复杂，有些不稳定，可能降解或产生聚合物。不仅降低疗效，还可能引起过敏等毒性反应，需严格控制质量。1.抗生素的检查生产过程中可能引入的杂质：有关物质、聚合物、残留溶剂与安全性有关的项目：异常毒性、降压物质、热源、细菌内毒素、无菌等。2.抗生素的含量测定方法化学或物理化学方法：容量法、紫外-可见分光光度法、HPLC法生物学方法：根据抗生素对细菌作用的强度来测定其效价。中国药典收载的“抗生素微生物检定法属于此种方法。管碟法：比较抑菌圈的大小。浊度法：比较细菌浊度值。第一节 青霉素钠和青霉素钾及其制剂的分析重点：1.青霉素类杂质检查项目和方法第一节 青霉素钠和青霉素钾及

4、其制剂的分析青霉素钠和青霉素钾属于-内酰胺类抗生素。母核：6-氨基青霉素烷酸母核上有羧基：显酸性 与碱金属成盐，易溶于水与有机碱成盐，难溶于水。-内酰胺：不稳定易水解开环。 侧链：苄基，有苯环，有紫外吸收。高效液相色谱法：测定青霉素钠和青霉素钾的含量，同时鉴别。 2.红外分光光度法焰色反应：照钠盐和钾盐的焰色反应试验。取铂丝，用盐酸润湿后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧现象：青霉素钠的火焰显鲜黄色青霉素钾的火焰显紫色。一、鉴别吸光度测定264nm处吸收度控制青霉素钠、钾含量。测定280nm、325nm处吸收度控制降解产物杂质的量。 2、有关物质高效液相色谱法3、青霉素聚合物：方法依据主药与杂质的

5、分子量不同。性质：引起过敏性休克反应检查方法：分子排阻色谱法：葡聚糖凝胶G-10 为固定相，以青霉素作为对照品，检查波长为254nm，按外标法计算。其他：干燥失重，细菌内毒素、无菌。二、检查干燥失重：控制水分的量细菌内毒素：鲎试剂法无菌：薄膜过滤法其他检查项目：结晶性、酸碱度、溶液澄清度与颜色、可见异物、不溶性微粒。中国药典用HPLC法ODS为填充剂，青霉素对照品 ，按外标法计算。三、含量测定由于青霉素不稳定中国药典规定贮藏条件为：严封，在凉暗干燥处保存。四、贮藏1.注射用青霉素钠：鉴别：同原料药检查：溶液澄清度与颜色、青霉素聚合物、水分、酸碱度、细菌内毒素、无菌含量测定：同原料药2.注射用青

6、霉素钾鉴别：同原料药检查：同注射用青霉素钠含量测定：同原料药。五、注射用青霉素钠和注射用青霉素钾的分析第二节 阿莫西林及其制剂的分析重点：1.阿莫西林杂质检查项目和方法、含量测定方法。第二节 阿莫西林及其制剂的分析阿莫西林属青霉素类药物，母核与青霉素钠相同。侧链为：2-氨基-2-（4-羟基苯基）乙酰基。（一）鉴别高效液相色谱法：薄层色谱法红外分光光度法一、阿莫西林的分析（二）检查有关物质：主要检查其降解产物，采用高效液相色谱法阿莫西林聚合物：分子排阻色谱法，葡聚糖凝胶G-10为填充剂，检测波长为254nm，青霉素为对照品，按外标法计算。水分：水分测定法（费休氏水分测定法）其他检查项目：酸度、溶

7、液澄清度、炽灼残渣。（三）含量测定方法：高效液相色谱法条件：ODS柱，阿莫西林为对照品，外标法定量。（四）贮藏条件中国药典规定贮藏条件为：避光、密封保存。阿莫西林的制剂有：阿莫西林片、阿莫西林胶囊、阿莫西林颗粒和阿莫西林混悬剂，均为口服制剂。鉴别：四种制剂均采用HPLC法和TLC法（二选一）检查：片剂、胶囊均检查有关物质、测定溶出度；颗粒需进行溶化性的检查。3.含量测定：四种制剂含量测定方法均与阿莫西林原料相同。HPLC法二、阿莫西林制剂的分析第三节 头孢羟氨苄及其制剂的分析重点：1.头孢羟氨苄的杂质检查项目和方法、含量测定方法第三节 头孢羟氨苄及其制剂的分析头孢羟氨苄属-内酰胺类中头孢菌素类

8、抗生素。母核：7-氨基头孢烷酸。侧链：有苯环，有紫外吸收。（一）鉴别化学显色法：加FeCl3试液，显棕黄色 2.高效液相色谱法3.红外分光光度法一、头孢羟氨苄的分析（二）检查主要检查：结晶性、酸度、有关物质和水分 1.有关物质：主要有降解产物-对羟基苯甘氨酸、7 - 氨基去乙酰氧基头孢烷酸及其他有关物质。方法：HPLC外标法+不加校正因子的主成分自身对照法水分：费休氏水分测定法。（三）含量测定中国药典采用高效液相色谱法测定头孢羟氨苄原料的含量。色谱条件：ODS柱，按外标法以峰面积计算。头孢羟氨苄的制剂有：头孢羟氨苄片、头孢羟氨苄胶囊、头孢羟氨苄颗粒，均为口服制剂。1.鉴别化学显色法：片和胶囊加

9、三氯化铁试液，即显棕黄色。颗粒加碱性酒石酸铜试液，即显墨绿色。高效液相色谱法二、头孢羟氨苄制剂的分析2.检查：有关物质：三种制剂均采用HPLC法溶出度：片剂、胶囊检查，采用紫外-可见分光光度法检测。其他检查水分：胶囊剂检查干燥失重、酸度：颗粒剂检查含量测定三种制剂的含量测定均与原料相同。HPLC法。第四节 硫酸庆大霉素及其制剂的分析重点：1.硫酸庆大霉素的杂质检查，含量测定方法第四节 硫酸庆大霉素及其制剂的分析硫酸庆大霉素属于氨基糖苷类抗生素。1.分子结构中有5个碱性中心，为碱性化合物。 2.无共轭体系：无紫外吸收。3.庆大霉素是C组分的复合物，C1，C2，C1a， C2a等。（一）鉴别 1.

10、薄层色谱法HPLC法红外分光光度法硫酸盐反应：显硫酸盐的鉴别反应一、硫酸庆大霉素的分析（二）检查 1.硫酸盐HPLC法，C组分项下的色谱条件 2.有关物质HPLC法，以西索米星、小诺霉素为标准品（C组分项下色谱条件） 3.水分：照水分测定法（费休氏水分测定法）庆大霉素C组分：硫酸庆大霉素为C组分的复合物，不同的C组分活性无明显差异，但是毒副作用不同，所以需控制C组分的含量。HPLC法： ODS为填充剂、蒸发光散射检测器(ELSD) 5.细菌内毒素（ 三 ）含量测定中国药典采用微生物法测定硫酸庆大霉素的含量。硫酸庆大霉素制剂有：片剂、注射液、缓释片、颗粒剂、滴眼液。 1.鉴别：均与原料药相同2.

11、检查：注射液：检查庆大霉素C组分（方法同原料药）、pH值、颜色、无菌和细菌内毒素缓释片：要求检查释放度颗粒：干燥失重滴眼液：检查pH、颜色、渗透压摩尔浓度等。3.含量测定：同原料药，均采用抗生素微生物检定法二、硫酸庆大霉素制剂的分析硫酸庆大霉素的疗效和毒性与血药浓度密切相关，且有效范围与潜在毒性浓度安全区间较小。需治疗药物监测样品处理：液-液萃取分析方法：微生物法、放射免疫测定法、荧光偏振免疫测定法以及柱前衍生化荧光或紫外检测HPLC法、间接光度检测HPLC法。三、硫酸庆大霉素体内样品的分析第五节 盐酸四环霉素及其制剂的分析重点：1.盐酸四环霉素的鉴别方法、杂质检查、含量测定方法第五节 盐酸四

12、环霉素及其制剂的分析盐酸四环霉素属于四并苯的衍生物。长共轭体系：紫外吸收。有酚羟基：酸性二甲氨基：碱性C4：手性碳原子，在弱酸性条件下能发生差向异构化。一、盐酸四环霉素的分析（一）鉴别三氯化铁反应：酚羟基、烯醇基的特征盐酸四环霉素可以和铁离子反应形成红色配位化合物方法：取本品，加硫酸即显深紫色，再加三氯化铁试液，变为红棕色。 2.高效液相色谱法红外分光光度法氯化物反应（二）检查 1.有关物质主要是土霉素、差向四环素、脱水四环素、差向脱水四环素、金霉素方法：采用HPLC法检查，加校正因子的主成分自身对照法 2.杂质吸光度：主要为了控制差向异构体、脱水四环素、差向脱水四环素以及一些中性降解产物的量

13、，此类杂质颜色深。方法在530nm波长处测定吸光度。此外还需检查酸度、溶液澄清度、干燥失重、热原和无菌。（三）含量测定：HPLC法，外标法以峰面积计算。盐酸四环霉素制剂有：盐酸四环霉素片、盐酸四环霉素胶囊和注射用盐酸四环霉素。1.盐酸四环霉素片和胶囊鉴别：均与原料药相同检查有关物质：与原料药相同溶出度：片和胶囊均需检查干燥失重：胶囊需检查含量测定：与原料药相同（HPLC法）二、盐酸四环霉素制剂的分析2.注射用盐酸四环霉素鉴别：与原料药相同检查：有关物质：检查方法同原料药相同其他：溶液澄清度、干燥失重、酸度、杂质吸光度、热原与无菌。 3）含量测定与原料药相同（HPLC法）第六节 阿奇霉素及其制剂

14、的分析重点：1.阿奇霉素的杂质检查一、阿奇霉素的分析（一）鉴别 1.薄层色谱法高效液相色谱法红外光谱法（二）检查 1.结晶性：碱度：本品分子结构中的内酯环上的叔氮原子及氨基糖上的二甲氨基具有碱性，因此要求检查碱度。测pH值有关物质主要指阿奇霉素B、阿奇霉素Cx和红霉素A偕亚胺醚等。HPLC法，加校正因子的主成分自身对照法 4.水分：费休氏水分测定法5.其他：炽灼残渣、重金属（三）含量测定：HPLC法（ODS柱，外标法以峰面积计算）二、阿奇霉素制剂的分析阿奇霉素制剂有：片剂、分散片、胶囊剂、干混悬剂和颗粒剂 1.鉴别：5种制剂均采用TLC法或HPLC法检查：有关物质：均需检查，方法与原料药相同，HPL