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文档简介
1、大豆小分子肽抗氧化效应的开端研究【摘要】目的通过动物实行来开端探究大豆小分子肽分子量300700Da的抗氧化作用。要领接纳昆明种小鼠,实行组小鼠分低、中、高3.0g/kgd、6.0g/kgd、9.0g/kgd三个剂量组灌胃大豆小分子肽25天,测定小鼠耐缺氧本领的影响。老年雄性istar大鼠20只,随机分为老年比拟组10只,老年实行组10只,老年实行组灌服大豆小分子肽,按6.0g/kgd剂量,老年比拟组灌服同体积的生理盐水。第60天末取样测定血红细胞和肝脏中丙二醛含量和超氧化物歧化酶(superxidediutase,SD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathineperxidase,GSH-P
2、x)活性。效果大豆小分子肽实行组中的高剂量组与比拟组生理盐水组比拟小白鼠殒命只数,耐低压缺氧本领加强,老年实行组与老年比拟组比力,血红细胞SD酶活性升高(P0.05),肝脏构造SD酶活性有升高的趋势,但无统计学意义(P0.05)。血红细胞与肝脏构造丙二醛含量有减低趋势,但无统计学意义(P0.05);GSH-Px酶活性升高(P0.05)。结论大豆小分子肽分子量300700Da具有必然的进步老龄大鼠体内抗氧化酶活性、按捺脂质过氧化的作用。【关键词】大豆小分子肽;抗氧化;耐缺氧本领;SD丙二醛;GSH-PxPreliinarystudynanti-xidativeapabilityfsybeanin
3、rpeptides【Abstrat】bjetiveTstudyanddisusstheanti-xidatineffetsandtheantiagingeffetfsybeaninrpeptides300-700DainldratsethdsSybeaninrpeptidesasadinisteredtieintreatedgrupfr25daysby3.0g/(kgd,6.0g/kgd,9.0g/kgdrespetively,andthehangesfthebearanxiaabilityereeasured.Tentyisterldratsererandlydividedint2grups
4、:ldntrlgrupandtestingldgrupith10ratsineahgrupTestingldgrupereperfusedithsybeaninrpeptides6.0g/(kgdfr60daysTheratsldntrlgruperefedithaterinthesaevlueAttheendfthe60thdaysbiheialindexereeasured:theativitiesfsuperxidedisutase(SD)andglutathineperxidase(GSHPx)andthenentratinfalndialdehyde(DA)inHbandliver.
5、Resultsparedithntrlgrup,thebearanxiaabilityftheadinisteredieintreatedgruperelnger,parediththseintheldntrlgrupTheativitiesfS0DinHberedereased(P0.05),theativityfSDinliverhadainreasetendeny,butithutanysignifiantdifferene(P005),andthenentratinsfDAinHbandliverhadalsainreasetendeny,butithutanysignifiantdi
6、fferene(P0.05).AsparediththseinntrlthetheativitiesfGSHpxhadainreasetendeny,(P0.05).nlusinSybeaninrpeptides300700Dahavethetendenyininreasingtheativityfantixidantenzyesanddereasinglipidperxidatin【Keyrds】sybean;inrpeptides;anti-xidatin;bearanxiaability;SD,GSH-Px;DA在20世纪4年代,一些西方学者用酶法改性卵白质来增补极其缺乏的动物卵白质,其
7、时由于技能程度的限定,大豆肽的研究无多大希望。到6年代末,随着生物技能的进步和生命科学的生长,生理活性肽的生理成效渐渐被人们创造,并受到越来越多的器重,尤其是一些活性肽的布局和生理成效渐渐明白,鞭策了活性肽的研究,也促进了大豆肽的研究与开拓1。大豆多肽是大豆卵白质的水解产物,能有用刺激甲状腺激素排泄,促使胆固醇代谢天生胆汁酸。胆汁酸又被食品纤维所吸附,排挤体外从而拦阻对胆固醇的汲取,起到低落胆固醇作用。我国于20世纪80年代中后期开始了大豆多肽的研究。如今在大豆多肽的研究与开拓中存在的重要题目是大豆多肽与生理成效的干系2。大豆小分子肽的抗氧化以及抗朽迈作用仅见体外实行报道,而动物体内实行尚少见
8、报道。本实行是用我们实行室本身研制的大豆小分子肽,通过动物实行模子来探究其抗氧化的作用,为更好地开拓大豆小分子肽提供开端的理论根据。1质料与要领1.1质料及处置惩罚大豆小分子肽的消费工艺:脱脂大豆饼水提鳃豆乳粗胰酶预酶解酶解乳中性卵白酶水解酶解液分散大豆多肽脱色脱盐超滤大豆小分子多肽液经浓缩喷雾枯燥大豆小分子肽粉用去离子水配成透明溶液以备灌胃用。该工艺制成大豆小分子肽接纳高效凝胶过滤色谱法HPGF测定:小分子多肽峰值分子量范畴为300700Da之间。1.2实行动物实行动物昆明种小白鼠由本学院实行动物中央提供。istar种老龄明白鼠由沈阳药检所提供。昆明种小白鼠80只,牝牡各半,体重182g,按
9、性别、体重随机分为1个比拟组和3个试验组。分组后豢养不雅察3天,剔除不及格个别后灌胃,空缺比拟组灌胃适量生理盐水,各实行组灌胃大豆小分子肽溶液,剂量别离为天天3.0g/kg、6.0g/kg、9.0g/kg。一连25天,实行期间,小鼠自由摄食及饮水3。取鼠龄为20个月,体重为381.7539.23g,istar老龄雄性明白鼠20只,按体重随机分为1个比拟组和1个实行组。分组后豢养不雅察3天后灌胃,比拟组灌胃生理盐水5l/d,试验组灌胃大豆小分子肽溶液6.0g/(kgd。豢养60天,实行期间,大鼠自由摄食及饮水4。1.3低压缺氧状态的影响组小鼠一连给样第25天后,于末次给样后2h将小白鼠放入减压至
10、负压80Hg,一连时间为5in,记载小白鼠殒命只数5。1.4对明白鼠各组SD、GSH-Px活性和脂质过氧化产物丙二醛(DA)含量的影响6大鼠一连给样60天后,别离剪断股动脉,血用肝素抗凝,取肝脏用冰生理盐水冲洗,滤纸吸干,准确称重,参加冰生理盐水,玻璃匀浆器制成10的构造匀浆,离心后汲取上清液备用。按微量邻苯三酚快速测定红细胞,肝脏的SD活性。而GSH-Px活性和脂质过氧化产物丙二醛(DA)含量测定接纳南京建成生物工程研究所消费的试剂盒。1.5统计学处置惩罚全部数据输入盘算机,用SPSS10.0Frinds统计软件举行单因素方差阐发,统计处置惩罚数据用xs表现。组间比力用t查验,明显性程度为P
11、0.05。2效果2.1大豆小分子肽对低压缺氧的影响大豆小分子肽实行组中的高剂量组与比拟组生理盐水组比拟小白鼠殒命只数,耐低压缺氧本领是否显着加强,差异有明显性P0.05。见表1。2.2大豆小分子肽对老年明白鼠SD活性的影响大豆小分子肽实行组与比拟组比拟,实行组的红细胞HbSD活性明显增长(P0.05),而肝脏的SD活性有增长趋势,但两组没有统计学意义(P0.05)。见表2。表1大豆小分子肽对低压缺氧的影响表2大豆小分子肽对的红细胞Hb肝脏的SD活性影响U/g2.3大豆小分子肽对老年明白鼠谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px活性的影响大豆小分子肽实行组与比拟组比拟,实行组的红细胞HbGSH-Px活性明
12、显增长(P0.05),而肝脏的GSH-Px活性有增长趋势,但两组没有统计学意义(P0.05)。见表3。表3大豆小分子肽对的红细胞Hb肝脏的GSH-Px活性影响U/g2.4大豆小分子肽对老年明白鼠的血红细胞与肝脏构造中丙二醛含量的影响大豆小分子肽实行组与比拟组比拟,实行组的红细胞Hb和肝脏中的DA含量虽有低落的趋势,但两组没有统计学意义(P0.05),见表4。表4大豆小分子肽对的红细胞Hb肝脏的丙二醛含量影响l/L3讨论如今一样平常以为,机体的朽迈与自由基有很大的干系。机体在正常代谢历程中可以产生多种活性氧,如超氧阴离子(.2-)、羟自由基(.H)、过氧化氢H22)等,此中.H与机体中的多不饱和
13、脂肪酸(LH)作用,可以产生LP。LP的终极代谢产物,如小分子的醛、酮等可以与生物大分子作用,使其失去生理成效,终极导致机体损伤。生物体内的抗氧化物酶,如SD、GSH-Px可以扫除活性氧,对生物体起庇护作用,因此SD、GSHPx活性巨细,LP浓度的凹凸可反响出机体被氧化损伤的程度7。丙二醛(DA)是脂质过氧化(脂褐素)LP代谢物,其含量凹凸可反响体内自由基的反响程度,脂质过氧化物可引起细胞代谢及成效停滞乃至殒命,故丙二醛(DA)的含量常可间接反响出机体受自由基打击程度8。实行表白:大豆小分子肽可显着增长血红细胞HbSD、GSHPx活性,而对肝构造中二酶的活性却不显着,对DA含量的按捺作用亦不显着。有关活性肽的抗氧化机制还不明晰,大概是通过增长SD、GSH-Px的活性,加速体内自由基的扫除,从而按捺肝脏内过氧化脂质的二级剖析产物DA的含量,有利于庇护细胞免受过氧化损伤,对自由基有关的疾病有必然的防治作用。但详细是哪种物质对抗氧化起重要作用,尚需进一步的研究9。本实行大豆小分子肽只能增长血红细胞HbSD、GSHPx活性,而对肝构造的活性却不
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