分析方法验证培训

1、关于分析方法验证培训第1页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2 . 1概念 1 ：分析方法ICHQ2定义：分析方法是指进行分析的方式，应详细描述每一个分析试验所必需的步骤它包括，但不局限于：样品，参照对照品，试剂的配制，仪器的使用，标准曲线的绘制，计算公式的运用等第2页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2 . 1概念2 分析方法验证 化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则定义：为使测试结果准确，可靠，必须对所采用的分析方法的科学性，准确性和可行性进行验证，以充分表明分析方法符合测试项目的目的和要求，这就是通常所说的对方法进行验证第3页，共142

2、页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2 . 2分析方法形成过程第4页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2 . 3什么情况分析方法需要验证？刚开发的分析方法修正或建立分析方法用于新的问题分析方法变更分析方法在不同实验室，分析人员使用不同仪器证明两个分析方法的等效性第5页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2.4验证需要考虑的因素确认并校验的仪器文件化的方法可靠地参数标准品合格的分析人员样品完整性第6页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2.5验证基本假设 前提）专属性得到证明方法己经是最佳条件用统计学方法处理数据第7

3、页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2.6 现有验证指南缺陷仅仅提出了要求验证的项目没有给出具体的验证方法没有给出判断标准一些验证中的实际问题没有指导原则第8页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2.7 分析方法验证方案内容阐明目的和范围责任书面的分析方法使用的物料与仪器目录每一参数的实验程序统计方法每一参数的验证标准第9页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2 . 8 仪器的确认构造，型号和制造商手册改造安装确认和运行确认校准程序维护保养养计划第10页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3 . 0 不同

4、验证具体要求验证的范围新方法验证步骤方法转移验证方法重新验证第11页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3 . 1 验证的范围新方法要求进行完整的验证药典的方法要求部分进行验证（确证）重大要的变化需要进行部分再验证第12页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3 . 2 新方法验证步骤开发新方法或从相关实验室获得新方法制定验证方案，验证规程或验证主计划确定方法（验证）适用的目标，范围确定实验参数及可接受的标准确定验证实验过程确认验证使用的仪器相关性能第13页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3.2-新方法验证步骤（续1）确认验证

5、所需的人员，试剂及标准运行预验证试验如果需要调整方法或接受标准运行完整的验证试验建立该方法的SOP用于日常分析工作确定需要重新验证方法的标准第14页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3.2-新方法验证步骤（续2）确定日常工作中系统适应性测试及/或分析质量控制检查的类型及频率将验证过程，结果及结论总结形成完整的验证报告第15页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3.2.1概念3：替代分析方法FDA定义： 目的在于替代法规分析方法的分析方法第16页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3 . 2 . 2基本内容专属性检测限定量限精密

6、度线性与范围准确度耐用性第17页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3 . 2 . 3分析方法按特性分类第一类主成分定量第二类杂质或降解产物测定第三类性能特点测定第四类鉴别试验第18页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四USPICHWHO选择性选择性选择性线性度及范围线性度线性度及范围范围准确度准确度准确度精密度精密度重复性精密度 中间精密度重现性检测限检测限检测限定量限定量限定量限耐用性耐用性耐受性第19页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3 . 2 . 4ICH,USP及WHO验证要求3.2.4.1FDA要求验证项目鉴别杂

7、质限度杂志定量含量及溶出度 特性准确度-+ +重复性-+中间精密度-+专属性+检测限-+- - -定量限-+- -线性-+ -范围-+ -耐用性-+第20页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3.2.4.2ICH要求验证项目鉴别杂质限度杂志定量含量及溶出度准确度-+ +重复性-+中间精密度-+专属性+检测限-+- -定量限-+-线性-+范围-+耐用性第21页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3.2.4.3WHO要求验证项目鉴别杂质定量杂质限度含量特性准确度-+ -+ + 精密度-+ -+ + 耐用性+ + + + + 线性和范围-+ -+ + 专属

8、性+ + + + + 检测限-+ -定量限-+ -第22页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3 . 3方法转移验证证明经过其它实验室的验证，并可以正式运行的分析测试过程，是否可以在本实验室运行，并适应实际的使用情况： 满足相应的测试要求 真实反映被测物相应的特性， 浓度，质量，纯度及效价情况第23页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3 . 3 . 1概念 4 ：法规分析方法FOA 定义：是用于评佑原料药或制剂某一个规定特性的分析方法第24页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3.3.2概念5 :交叉验证FDA定义：在同一个研

9、究或不同交叉研究中，用两种或多种分析方法进行分析，对验证参数进行比较第25页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3 . 3 . 3转移验证方法来源官方认可的标准 USP/NFEPBPChPJPAOAC客户提供的，经过验证后的方法相关实验室经验证后正在使用的方法第26页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3 . 3 . 4转移验证的要求系统适应性及方法专属性必须验证方法耐用性可以不验证杂质测试方法检测限与定量限必须验证其它验证项目根据实际情况决定，对于项目的选择与取舍应有详细的讨论第27页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3 .

10、 3 . 5分析方法转移验证分析方法转移方案及程序精密度准确度耐用性编写并批准的具体测试方法熟练程度核实新实验室正式验收第28页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3 . 4方法再验证概念需运行方法再验证的变更情况方法再验证要求第29页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3 . 4 . 1概念 6 ：方法再验证 化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则定义：在某些情况下，如原料药合成工艺改变，制剂处方改变，分析方法发生改变等，均有必要对分析方法再次进行全面或部分指标的验证，以保证分析方法可靠，这一过程称为方法再验证第30页，共142页，2022年，5

11、月20日，11点23分，星期四3 . 4 . 2需运行方法再验证的变更情况改变药物合成工艺改变制剂组成改变分析过程操作过程的更改改变仪器，色谱柱等硬件测试条件持续改变以适应系统适应性要求，且改变程度超出药典规定的方法耐用性验证范围第31页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3 . 4 . 3方法再验证要求证实相应的变更发生后，原使用的分析测试过程：能够继续保持其特有的性质（如专属性）能够继续真正反映被测物的相应特性（检测限与定量限）依靠变更情况确定重新验证的内容与程度第32页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四4 . 0其它概念参考文献第33页，共1

12、42页，2022年，5月20日，11点23分，星期四4 . 1概念 7 ：系统适应性在一个系统（主要是色谱分离系统）被使用前，检查其系统性能指标是否满足分析要求的过程它是确保色谱系统质量性能的要素第34页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四4 . 1概念8：接受标准FDA定义：用于验收分析结果的数字限度，范围，或其他适当的计量第35页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四4 . 2 一参考文献ICH 一 QZA Text on Validatlon of Analytical Procedure : ( 1994 ) ICH 一 QZB Validat

13、ion on AnaIytical Procedures : Methodology： ( 1995 ) CDER Reviewer Guidance : Validation of ChromatographicMethod ( 1994 ) CDER Submitting Samples and Analytical Data for MethodValidations （1987 ) CDER Draft Analytical Procedures and Method Validation ( 2000 )CDER Bioanalytical Method Validation for

14、 Human Studles ( 1999 ) USP Vaildation of Compendial Methods ( current revlsion ) 中国药典：药品质量标准分析方法验证第36页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四Validation of Analytical Procedure分析方法验证 第一部分：基本要求第37页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四Validation of Analytical Procedure分析方法验证 第二部分：实验设计与操作第38页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期

15、四1.0讲座目的 掌握验证试验设计 掌握验证试验操作 了解确定接受标准原则第39页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四第一部分:基本要求Validation of Analytical Procedure 分析方法验证第40页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四第二部分:实验设计与操作1.0讲座目的 掌握验证试验设计 掌握验证试验操作 了解确定接受标准原则第41页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2 . 0 一精密度概念容易混淆的精密度中术语重复性中间精密度推荐重复性接受标准 AOAC 浓度与精密度关系重现性第42页，共142

16、页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2 . 1 一概念 1 ：精密度lCH-Q2 定义：分析方法的精密度指在规定条件下，对均质样品，多次取样进行一系列检测结果的接近程度（离散程度）第43页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2 . 2 一容易混淆的精密度中术语仪器重复性相同人员，仪器，日期，标准液方法重复性相同人员，仪器，日期，重新配制标准液中间精密度不同日期，不同分析人员，不同仪器第44页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2 . 3 一重复性概念推荐重复性测定方法第45页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2 .

17、 3 . 1 一概念 2 ：重复性ICH -Q2 定义：重复性是指在同样的操作条件下，较短时间间隔的精密度第46页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2 . 3 . 2 一推荐重复性测定方法在方法规定的线性范围内重复测定如 3 个浓度，每个浓度 3 次或 100 的测试浓度，测定六次记录每次测定各组分响应计算各响应值与平均值之间相对标准偏差第47页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2.3.2.1-概念3：系统重复性相同条件下，同一分析人员对同一样品溶液多次测试结果的接近程度第48页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2 . 3

18、 . 2 . 2 系统重复性实验 取同一均匀标准样品溶液连续重复测定六次记录每次测定各组分响应计算各响应值与平均值之间相对标准偏差第49页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2.3.2.3-概念4：方法重复性相同条件下，同一个分析人员对同一个均匀样品，多次取样测定所得结果的接近程度第50页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2 . 3 . 2 . 4 一方法重复性实验取同一批号均匀样品按照分析方法规定至少称量出六份按含量测定方法测定每一份样品含量计算每一次测定的含量与平均含量之间的相对标准偏差第51页，共142页，2022年，5月20日，11点23分

19、，星期四2.4-中间精密度概念推荐中间精密度测定方法第52页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2 . 4 . 1 一概念 5 ：中间精密度ICH-Q2 定义中间精密度指的是试验室内部条件改变，如：不同日，不同分析者，不同仪器等情况下的精密度第53页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2 . 4 . 2 推荐中间精密度测定方法应确定随机事件对分析方法精密度的影响，如不同日期，不同分析人员，不同仪器等等没有必要一一考察用均匀设计，或正交设计方法第54页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2 . 5 一推荐重复性接受标准系统重复性

20、S/N1000,RSD S/N100,RSD2% S/N10,RSD4% S/N10,RSD8%方法重复性 测定结果的相对偏差 仪器分析小于2% 容量分析小于0.3%第55页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2 . 6 AOAC 浓度与精密度关系浓度（%）比率单位RSD（%）1001100%1.31010-110%2.7110-21%2.80.110-30.1%3.70.0110-4100ppm5.30.00110-510ppm7.30.000110-61ppm110.0000110-7100ppb150.00000110-810ppb210.000000110-91p

21、pb30第56页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2.7-重现性 概念 什么时候需要作重现性第57页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2 . 7 . 1 一概念 6 ：重现性ICH Q2定义：重现性指不同试验室之间的精密度第58页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2.7.2-什么时候需要作重现性？是比较实验室间的差异当一个方法要升级到法规方法时，需要做这个工作第59页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3 . 0 准确度概念原料药准确度测定制剂产品准确度测定杂质准确度测定推荐准确度测定方法推荐准确度测

22、定接受标准AOAC 浓度与回收率关系第60页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3 . 1 概念 7 ：准确度ICHQ2 定义分析方法的准确性指的是真实值或认可的参考值与测量值之间相近程度第61页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3 . 2 原料药准确度测定用该方法分析已知纯度的分析物该方法的分析结果与成熟的分析方法相比较，该成熟方法准确度是已知的在精密度，线性，专属性建立后，进行推论第62页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3 . 3 制剂准确度测定用该方法去测按处方量制成的混合物（加入已知量被测物）在制剂中加入已知量主药

23、或与另一成熟方法比较在精密度，线性和专属性建立后得出第63页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3 . 4 杂质准确度测定在样品（原料浩挤）中加入已知量的杂质无法得到杂质降解物的，与采用其他方法测得的结果比较，可以使用原料的响应值第64页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3 . 5 推荐准确度测定方法在六个空白样品中，分别加入已知浓度的样品（浓度范围为含量测定浓度的 80120 % ) 计算该方法的百分回收率第65页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3.6推荐准确度测定接受标准测定得到的主品的百分回收率与理论回收率100%间

24、的相对标准偏差不得大于方法重复性相对标准偏差的4倍第66页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3.7AOAC浓度与回收率关系浓度（%）比率单位平均回收率（%）1001100%98-1021010-110%98-102110-21%97-1030.110-30.1%95-1050.0110-4100ppm90-1070.00110-510ppm80-1100.000110-61ppm80-1100.0000110-7100ppb80-1100.00000110-810ppb60-1150.000000110-91ppb40-120第67页，共142页，2022年，5月20日

25、，11点23分，星期四4 . 0 检测限概念直观法信噪比法标准偏差和斜率法推荐检测限测定方法第68页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四4 . 1概念 8 ：检测限ICH Q2 定义检测限度指的是样品中的被分析物质能够被检测到的最低量，但不一定要准确定量第69页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四4 . 2 直观法直观评价可以用于非仪器分析方法，也可用于仪器分析方法检测限的测定是通过对一系列已知浓度被分析物的样品进行分析，并以能准确（或被可靠）地检测被测物的最小量或最低浓度来建立第70页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四4 .

26、 3 信噪比法用于能显示基线噪音的分析方法把已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信号进行比较算出能被可靠地测出的最低浓度或量一般以信噪比为3：1或2：1时相应的浓度或注入仪器的量确定检测限第71页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四4 . 4 标准偏差和斜率法根据响应值的标准偏差和斜率检测限度（DL）=3 . 3 / s：响应值的标准偏差（通过空白样品测背景响应值或Y轴截距） s ：校正曲线的斜率（通过被测物的校正曲线求得）第72页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四4 . 5 推荐检测限测定方法在最灵敏的仪器状态下测定至少四个空白样品洗脱时间需

27、要覆盖整个样品中所有组分的样品溶液每个样品进样三次计算该组分的最小检测限第73页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四5.0定量限概念推荐定量限测定方法第74页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四5 . 1 概念 9 ：定量限ICH Q2 定义：某种分析方法的定量限度是指具有合适准确性和精密度的条件下，能够定量测定分析组分的最低限量。它是样品中含量低的化合物定量分析的参数，特别适用于杂质和（或）降解产物的测定第75页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四5 . 2 推荐定量限测定方法按检测限方法测定仪器的平均噪声然后按信噪比等于10

28、.00.5配置样品溶液连续进样三次计算组分的最小定量限第76页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四6 . 0 耐用性概念变动因素色谱分析中耐用性项目第77页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四6 . 1 概念10:耐用性ICHQ2 定义分析方法的耐用性是指试验参数适当地发生细小改变时，测量能力保持不受影响，可用于说明正常使用时的可靠性第78页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四6 . 2 变动因素流动相的组成pH值不同厂牌或不同批号的同类型色谱柱柱温流速等第79页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四6 .

29、2 变动因素典型气相色谱法变动因素载气流速不同厂牌或批号的色谱柱固定相担体柱温进样口检测器温度第80页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四6.3色谱分析中耐用性项目分析方法变量所有分析样品制备操作提取时间HPLC浓度项组成不同的柱温度浓度GC不同的柱温度流量第81页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四7 . 0 线性度概念线性范围推荐线性度测定方法推荐线性度测定接受标准第82页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四7 . 1 概念11 ：线性度ICHQ2 定义分析方法的线性是指在给定的范围内检测结果与样品中被分析物的浓度（含量）成

30、比例关系的能力第83页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四7 . 3 推荐线性度测定方法在含量测定浓度的70%-130%或50%-150%均匀选择至少六个不同的浓度点每一个尝试至少需要测定四次记录各对应浓度下的响应值第84页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四7 . 2 推荐线性度测定接受标准相关系数应当在0 . 999与1 . 000 之间经线性回归处理其截距不应明显地偏离零点第85页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四8 . 0 专属性概念推荐专属性测定方法降解研究内容第86页，共142页，2022年，5月20日，11点23

31、分，星期四8.1概念13：专属性ICH-Q2定义 专属性是指在一些可能存在的组分，如杂质，降解物，基质等存在时，对被分析物准确可靠测定的能力第87页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四8.1推荐专属性测定方法按照规定的标准或参考文献的色谱分析方法分别将原料药，中间体，可得到杂质，原料，中间体，前体及降解产物的样品分别进样记录各物质的相对保留时间确保各样品之间的峰可以分开至少确保其他物质的峰与主峰分开第88页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四8 . 2 概念 14 ：稳定性指示性分析方法FDA定义稳定性指示性分析方法是一种验证了的定量分析方法，其能够

32、测定原料药或药品在有关性质的变化一个稳定性指示性分析能在没有降解产物，工艺杂质，辅助材料或其他的杂质干扰下，准确地对活性成分进行测量第89页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四8 . 3 降解研究目的降解途径影响因素确定包装分析方法专属性第90页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四8 . 4 降解研究内容光酸碱氧化还原高热高湿第91页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四Validation of Analytical Procedure分析方法验证 第二部分：实验设计与操作第92页，共142页，2022年，5月20日，11点23

33、分，星期四Validation of Analytical Procedure分析方法验证 第三部分：盐酸氟西汀验证实例第93页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四1 . 1 目的掌握色谱方法验证所需要的项目掌握色谱验证基本实验方法了解稳定性指示性方法验证的要求了解析因分析在验证中应用第94页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四1 . 2 简介美国某公司生产10mg和20mg盐酸氟西汀两种相胶囊其重量与配方相同仅盐酸氟西汀与辅料比例不同所验证方法时公司内部对美国和欧盟市场产品放行和稳定性研究中使用的含量和杂质分析的方法该分析方法已经建立第95页，共1

34、42页，2022年，5月20日，11点23分，星期四1 . 3 验证项目清单1 精密度 2 线性 3 范围 4 准确性 5 低浓度盐酸氟西汀验证6 m -盐酸氟西汀验证 7 选择性 8 耐用性第96页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2 . 0 精密度项目： 系统重复性方法重复性中间精密度第97页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2 . 1 系统重复性方法按照分析方法要求，配制盐酸氟西汀标准溶液重复进样 5 次计算峰面积平均值与相对标准偏差第98页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2 . 2 方法重复性方法按照分析方法要求

35、，分别配制 20mg 盐酸氟西汀样品溶液 6 个分别进样计算含量相对标准偏差第99页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四2 . 3 中间精密度方法由另外一个分析员，在不同日期，另外的仪器上，按照分析方法 分别配制 20 mg 盐酸氟西汀样品溶液 6 个计算 含量及相对标准偏差第100页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四3 . 0 线性方法正常含量分析用标准溶液浓度的 50到 200% 范围内均匀选择 5个点并配制相应浓度的盐酸氟西汀含量标准溶液分别进样计算线性回归分析相关系数，斜率，Y轴截距第101页，共142页，2022年，5月20日，11点23

36、分，星期四4 . 0 范围方法正常20mg样品含量分析浓度50到200范围内均匀选5个点配制盐酸氟西汀样品溶液分别进样计算线性回归分析相关系数，斜率，Y轴截距第102页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四5 . 0 准确性项目 标准品准确性 样品准确性第103页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四5 . 1 标准品准确性方法按照分析方法要求，配制盐酸氟西汀标准溶液重复进样 5 次计算 准确性测定浓度值用峰面积按照回归方程进行计算第104页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四5 . 2 样品准确性方法按照产品标准量，在70到180

37、正常标示量选均匀选择 4 个点，混合辅料与及盐酸氟西汀每点3个样品，分别进样计算 回收率测定浓度值用峰面积按照回归方程进行计算第105页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四6 . 0低浓度盐酸氟西汀验证项目：线性准确性系统重复性定量限度检测限度第106页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四6 . 1 线性方法按照分析方法要求，均匀选择 6个点配制标示量的 0 . 02到 1 . 0 含量标准溶液分别进样计算线性回归分析相关系数，斜率，Y袖截距第107页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四6 . 2 准确性方法配制杂质浓度的标准溶

38、液进样6次计算按峰面积用回归线性方程来计算测量浓度平均值，相对标准偏差第108页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四6 . 3 系统重复性方法配制工作浓度的 0 . 02和 0 . 05标准溶液分别进样6次计算峰面积的平均值与相对标准偏差第109页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四6 . 4 定量限度 用系统重复性实验中的标准偏和线性回归 方程中的斜率差计算第110页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四6 . 5 检测限度 用系统重复性实验中的标准偏和线性回归 方程中的斜率差计算第111页，共142页，2022年，5月20日，

39、11点23分，星期四7 . 0 m -盐酸氟西汀验证项目：线性检测限度定量限度准确性精密度方法重复性中间精密度 第112页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四7 . 1 m-盐酸氟西汀简介M -盐酸氟西汀是产品中的一个杂质m -盐酸氟西汀在0 . 05- 1 . 0区间呈线性相对响应因子（对盐酸氟西汀） F = 132 . 73952/74859534 = 1 . 8第113页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四7 . 2定量限度根据 盐酸氟西汀定量限相对响应值计算盐酸 m -氟西汀定量限度第114页，共142页，2022年，5月20日，11点23分

40、，星期四7 . 3 检测限度根据 盐酸氟西汀检测限度 相对响应值计算盐酸 m -氟西汀检测限度第115页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四7 . 4回收方法分别6个标空白中加0 . 05的 m -盐酸氟西汀进样计算 回收率实际检测值用峰面积按照回归线性方程计算第116页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四7 . 5准确性方法在已知 m -盐酸氟西汀含量的样品中分别在0 . 4 % , 0 . 5和 0 . 6 % 3 个水平加入 m -盐酸氟西汀标准品每组3个样品中计算回收率实际检测值用峰面积按照回归线性方程计算第117页，共142页，2022年，

41、5月20日，11点23分，星期四7 . 6 重复性项目方法重复性中间精密度第118页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四7. 61方法重复性方法按照要求配制溶液反复进样6次计算平均值标准偏差相对标准偏差第119页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四7 . 62 中间精密度方法另外一个分析员，在不同日期，另外的仪器上按照方法重复性方法配制溶液6次分别进样计算含量及相对标准偏差第120页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四8 . 0 选择性1.降解 2.系统适用性 1）原样 3.空白 2）酸降解 4）氧化降解 5）日光降解 6）溶液

42、加热降解 7）粉末加热降解第121页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四8 . 1 简介降解产物的选择性试验是分析方法稳定性指示性验证的一个重要部分主要目的是通过试验证明各种降解的产物与所要分析的物质库完全分开本试验中的主要设备是二极管矩阵检测器并通过计算：纯度角，匹配角，纯度阈值匹配阈值，含量来证明峰的纯度第122页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四8.2原样品方法20mg胶囊按照规定的方法进行分析标准品按照规定的方法进样分析第123页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四8 . 3 酸降解方法：样品：称量大约等量20mg的样

43、品，转移到 50ml 容量瓶中，加入20ml 稀释剂，并超声处理10分钟。加 lml的浓盐酸。放置18小时。用 10N 氢氧化钠中和到 pH 5 . 5。稀释到刻度。过滤。标准品：称量大约22mg 的标准品，转移到 50ml 容量瓶中，加入 20ml稀释剂，加2ml 的盐酸。放置18小时。用10N氢氧化钠中和到 pH5 . 5。稀释到刻度。第124页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四8 . 4碱降解方法：样品：称量大约等量20mg的样品，转移到50ml容量瓶中，加入20ml 稀释剂，并超声处理10分钟。加 lml 的5N氢氧化钠。放置18小时。用5N盐酸中和到 pH 5 . 5。稀释到刻度。过滤。标准品：称量大约22mg的标准品，转移到50ml容量瓶中，加入20ml 稀释剂，加2 ml的5N氢氧化钠。放置18小时。用5N盐酸中和到 p H5 . 5。稀释到刻度。第125页，共142页，2022年，5月20日，11点23分，星期四8 . 5氧化降解样品：称量大约等量20mg的样品，转移到50ml容量瓶中，加入20ml 稀释剂，并超声处理10分钟。加 lml 的30%过氧化氢。放置5小时。稀释到刻度。过滤。标准品：称量大约22mg的标准品，转移到50ml容量瓶中，加入20ml 稀释剂，2 ml的30%过氧化氢。放