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1、PAGE PAGE 182国内外SOD市场分析及猜测报告北京企业管理询问有限公司贰零零肆年贰月前言本报告是关于国内外SOD产品市场供需状况及发展前景的分析及猜测报告。本报告全面系统地对国内外SOD产品的市场供需状况、提高潜力和发展趋势以及SOD产品德业发展的现状与前景,包括生产企业的设计生产力量、产量与经营现状、产业竞争态势、产业发展面临的机遇与挑战等,进行了全面的分析及猜测。在此基础上,本报告对国际上主要的SOD产品生产厂商的产品、生产规模与市场等进行了系统介绍。对国内SOD产品产业的发展与生产企业的经营策略提出了策略性建议。可作为国内SOD产品生产企业(包括目前拟建或在建的SOD产品生产项

2、目)制定发展战略规划和市场营销策略规划等经营管理决策的客观依据。报告的国外内容分述:国外SOD产品的主要供应商介绍具体内容包括:国外发达国家SOD产品主要生产企业、生产规模、产量、原料、产品系列、价格、市场概况、联络方法;报告的国内内容分述:(1)国内SOD产品市场分析及猜测具体内容包括:国内SOD产品的市场规模、市场容量、提高潜力与发展趋势分析及猜测;(2)国内SOD产品的主要供应商(生产商、销售商)介绍具体内容包括:国内SOD产品的主要生产企业、设计生产规模、产量、原料、产品价格、销售方向(包括联络方法),产品的国际贸易发展趋势分析及猜测;(3)国内SOD产品产业投资动向分析及猜测具体内容

3、包括:国内SOD产品新建项目(包括在建和拟建项目)的投资动向与投资规模;(4)国内SOD产品现状与发展趋势分析。具体内容包括:国内SOD产品的主要应用产业领域及主要用户。本报告的数据资料和信息资料的收集,接受了第一手资料与第二手资料相结合的方法进行收集。第一手资料收集:包括对国内SOD产品生产企业和用户的调查,也包括对政府主管机构、有关行业管理机构(协会、学会)、专家、学者等进行的深度访谈,以及商品的个案调查。第二手资料的收集:主要是通过对国内外SOD产品公开文献资料进行系统的检索、收集,其内容涉及了SOD产品、技术与市场等广泛领域。本报告接受的分析方法,包括对收集的数据资料与信息资料进行定性

4、和定量分析、相关分析和专家论证,在此基础上撰成国内外SOD产品市场分析及猜测报告。本报告由北京企业管理询问有限公司第一产业探究部负责,项目组长由北京企业管理询问有限公司管理询问顾问李红担当。本公司已经连续五年对国内外谷物产品、市场、专利技术等进行跟踪调查和探究,并建立了动态数据库。数据库的主要内容包括:国内外相关产品的行业及企业动态,产业投资动态,产品的市场供需动态,产品及技术探究开发动态,专利技术动态,企业经营管理与市场营销等。同时对数据库和已经发表的探究报告数据和内容随时进行更新,可为用户供应精确、准时、全面的信息询问服务。北京企业管理询问有限责任公司贰零零肆年贰月目 录第一章 超氧化物歧

5、化酶(SOD)概述第一节 超氧化物歧化酶(SOD)简介111 人体抗年轻物质SOD的发觉112 第三代保健食品SOD第二节 百病之源自由基第三节 SOD基本特性第四节 SOD的生理功能141 SOD对人体的养分保健作用142 SOD作为保健食品功能因子的可行性第五节SOD活力测定第六节 SOD来源及制备第七节 SOD的应用第二章 SOD的来源第一节 畜禽血液生产SOD211 牦牛血提取SOD212 蚯蚓SOD第二节 植物提取SOD221 玉米提取SOD第三节 富含SOD植物的开发和利用231 SOD鲜桃232 SOD草莓233 SOD西红柿234 SOD枸杞235 大蒜SOD236 螺旋藻SO

6、D237 北冬虫夏草SOD第三章 近期国内外对超氧化物歧化酶的探究第一节 超氧化物歧化酶探究综述第二节国内外超氧化物歧化酶最新探究动向第三节 超氧化物歧化酶化学探究进展第四节 超氧化物歧化酶稳定性的探究第五节 从动物血液提取SOD的工艺流程及技术第六节 动物血块中CuZn-SOD的提取探究第七节 牛血超氧化物歧化酶的纯化第八节 羊血铜锌超氧化物歧化酶的提取第九节 猪血红细胞中超氧化物歧化酶和血红素同步提取纯化的探究 第十节 胰蛋白酶切修饰SOD的可行性探究第十一节发酵法生产SOD工艺技术探究第四章 SOD产品市场分析及猜测第一节 SOD产品主要生产厂家状况分析第二节 SOD产品价格分析第三节

7、产量分析及猜测第四节 SOD应用比例分析第五节 SOD在医药上的应用第六节 SOD在日用品化学工业上的应用第七节 SOD在食品工业的应用第八节 SOD应用方面存在的问题第九节 国外SOD产品应用探究第十节 动物血中综合利用第五章 SOD新产品开发第六章 SOD生产企业简介第七章 SOD产品拟建、在建项目简介第八章 SOD产品用户简介第九章 国外SOD生产企业简介第五节 Eukarion,Inc.第六节 Bio-Technology General Corp.第七节 Yeda第八节 NutraStar第九节 锰型SOD的产品详述第一章 超氧化物歧化酶概述第一节 超氧化物歧化酶简介超氧化物歧化酶(

8、SOD),是英文Superoxide Dismutase的缩写,是体内对抗自由基的第一道防线。当我们身体吸入氧气进行新陈代谢,就会产生超氧阴离子自由基,若不予以消退,会在体内产生连锁反应,破坏我们的细胞,是人体老化及疾病的元凶。正常状况下,体内自由基的产生和清除处于动态平衡。机体在自由基清除不足和抗氧化力量下降的状况下,生物膜的氧化作用提高,体内氧化物增多。而SOD对清除体内致病因子超氧自由基有特效。SOD复合酶是唯一能清除细胞中自由基的酶,自由基是带有不成对电子、原子或离子,其化学性质活泼,有极高的氧化性能,以夺取核酸、氨基酸等生物分子的电子,使这些物质性质演化成毒性更强的羟自由基,可导致机

9、体的多种疾病。探究表明,机体的年轻、病变及辐射损害都同自由基的形式有关,故SOD有抗年轻、抗辐射、消炎、抑制肿瘤和癌症的功能。探究还表明,SOD对胃病、气管炎、皮肤病、烧伤、脚气等都有独特疗效,对醒酒、亢奋精神、抗疲惫、复原体力、减肥也有很好的效果,目前在化装品、食品、保健品、医药、酒类、饮料等行业也已开头用法SOD,其发展前景特别宽敞。SOD对放疗、化疗患者白细胞有明显的爱护作用,SOD能够特别有效地维持白细胞的数量,从而可以加速治疗进程。SOD不同于其他细胞因子(如CSF类),后者不能在化疗中协作用法。由于体内的SOD随着年龄的提高而渐减,再加上环境的恶化,大量的自由基超过身体所能应付的程

10、度,健康就会亮起红灯,皮肤会变得粗糙、松驰、满是斑点,人就显得没有元气,因此借助外来的补充是必需的。当今,以SOD为主要成份的产品风靡世界,引发了美容化装品的革命,国外很多饮料、糖果、糕点都添加SOD。人们为求永葆青春、衰弱、延年益寿,特别乐于用法昂贵的SOD针剂。111 人体抗年轻物质SOD的发觉1938年,英国Mann等人首次从小牛血液中分别出一种含铜的蓝绿色蛋白质。1953年又有科学家从马肝中分别出相像的蛋白质,但当时他们并未发觉这种蛋白质的生理活性。至1968年,美国人Mccord在Fridovich指导下,从牛红细胞中提取出一种定名为超氧化物歧化酶,简称SOD。经过科学家几十年的探究

11、,最终发觉超氧化物歧化酶(SOD)的生理功能主要有:(1)清除体内过量的自由基,延缓年轻,如延缓皮肤年轻、推迟老年斑的消失等。(2)提高人体对烟雾、辐射、有毒化学品和有毒药品的反抗力,提高机体对外界的防备力量。(3)超氧化物歧化酶(SOD)治疗骨髓损伤很有效。(4)用SOD治疗自身免疫性疾病很有效。(5)消退疲惫,提高对超负荷大运动量的适应力。SOD在年轻人的血液中很多,人们过了30岁以后,人体内的“SOD”随着人体组织的老化而产生率渐渐降低,这样人体内的SOD剩余率过低就会产生各种疾病。112 第三代保健食品SOD纵观各国保健食品的发展,大体经受了三个阶段,也可称之为三代产品。第一代保健食品

12、包括各类强化食品,仅依据食品中的养分素成分或强化的养分素成分来推知各类食品的功能,而来经实践,是最原始的保健食品,我国在保健食品管理方法实的不允许这类食品以保健食品面目消失。第二代保健食品指经过动物和人体试验证明其具有某种生理调整功能的食品这代保健食品在市场上占绝大多数。第三代保健食品是在第二代保健食品的基础上,不定期需要确知具有该项功能的功能因子(有效成分)的化学结构,含量及其作用机理。目前,我国市场上该产品占极少数。而且功能因子多数从国外引进,正在研制开发第三代保证食品。含有SOD的保健食品就属于第三代保健食品。第二节 百病之源自由基1928年英国细菌学家亚历山大.弗莱明发觉了青霉素抗菌素

13、的诞生标记着人类因感染导致死亡的历史宣告结束。此后,人们的目完开头投向一个更本质的问题开头探询致使人类生病、年轻甚至死亡的根源。本世纪五十年月,美国著名的生化学家弗利多必在探究中发觉,致使人类生病、年轻、死亡的罪魁祸首是活性氧自由基。1969年,弗利多必的弟子阿拉巴高校生化系主任教授马可多在其老师探究成果的基础上,证明白自由基的存在,并从学术上论证了自由基是怎样影响着人类的。自由基是人体生存活动的一种自然产物(如呼吸、运动、饮食等一切人类活动均会产生自由基)。它与生俱来,象氧气一样参与人体的新陈代谢,简洁地说,自由基是人体细胞与外界氧气进行各种简单的新陈代谢时,所产生的一种带单一或奇数电子的原

14、子或分子,因此它是一种极不稳定的物质,极易与其它原子或分子发生反应,这就是我们常常说的“氧化”。从进化论的角度看,自由基在人体内存在的理由是,它能协同人体的淋巴细胞和T细胞毁灭、溶解侵入人体的细菌和异物,起杀菌、消炎的作用,但是,自由基并无辨别力量,当过量产生时,它攻击的不仅仅是细菌,还有健康的人体细胞,所以自由基有“双重性格”。依据测试,自由基对人体细胞的攻击每秒达到1000次左右,在这种强力攻击下,较弱的细胞开头生病、老化直至死亡,因此,自由基又有“自杀细胞”之称。最新的科研成果显示,正常人体内的自由基值为8001000个荧完强度,超过1500个荧完强度人体就会生病,超过2000个荧完强度

15、则有癌变倾向。换句话说,假如一个人的自由基值总能保持在正常范围内,就可以不生病,不被癌症侵袭。令人担忧的是,自由基在人体内总是过剩的,这就是我们每一个人都要经受生、老、病、死这一过程的根本缘由。科学家们探究发觉,在25-40岁的人群中,自由基攻击的是胶原系统,如造成人体皮肤的松弛、皱纹、老化;在35-50岁的人群中,自由基攻击的是内分泌系统,如造成人体性功能的衰退;在50岁以上的人群中,自由基攻击的是心血管系统,如造成各种心脑血管疾病,从根本上摧毁人体的健康。正是基于这样的生疏,尼州高校医学博士邓翰哈门认为:“老化是由于人体内含有过剩的自由基”;世界自由基和SOD理论权威日本的丹羽韧负指出:“

16、现代有90%的疾病与自由基过剩有关”;而英国自由基理论权威古特雷基更证明:自由基是“百病之源”,并如下表所示,把与之有关的疾病明确列举出来。百病之源自由基皮肤病变过敏、皮肤炎、荨麻疹、牛皮癣皱纹、黑斑、老人斑、粗糙失去弹性、面部青春痘皮肤溃疡、伤口愈合不良消化系统胃溃疡、肠管溃疡、胃炎肝炎、肝硬化脂肪酸引起的胰脏炎、糖尿病非类固醇抗发炎物之副作用心血管系统高血压、心脏病血管硬化血栓、高胆固醇中风狭心症、心肌梗塞氧重灌损害呼吸系统鼻炎、哮喘病成人型呼吸窘迫症肺气肿、肺硬眼睛病变白内障眼球出血退化性眼底病变肾脏系统肾炎、肾衰竭、尿毒症重金属之肾毒肾脏移植排斥作用脑病变老化症(Alz-heimer)

17、老人痴呆症(Pakinson)巴金森氏症(DownSyndromc)唐氏症候群免疫力失常免疫力降低(如感冒)免疫力错乱(自体免疫疾病)如:SLE红斑性狼疮、类风湿关节炎、硬皮症、干燥症、神经系统障碍癌症各种癌症(恶性肿瘤)化学或放射线治疗的副作用其他怪病难治之症另外,某些缘由也会导致人体产生过多的活性氧,如:1.紧急、忧愁;2.吸烟;3.激烈运动;4.农药污染;5.紫外线照射;6.放射线照射;7.过度饮酒;8.食品添加剂;9.医药品;10.大气污染等。第三节 基本特性(1)分类和分布是一类金属酶,依据金属辅基的成分不同主要分成三类,第一类含铜和锌,称为、-,是最常见的一种,呈蓝绿色,主要存在于

18、真核细胞的细胞浆内。第二类含锰,称为-,呈粉红色,主要存在于原核细胞体、真核细胞的细胞浆和线粒体内。第三类含铁,称为-,呈黄褐色,主要存在于原核细胞中。另外,在牛肝中还发觉一种、-。(2)的结构依据所含金属的不同,可将其分为三种,分别为、-,-和-。后两者性质很相像,在蛋白质一级结构、空间结构、分子量、完谱性质及对不同抑制剂的敏感性等方面,与前者差别较大。现依据的探究进展,分别予以说明。、-的约为32000,由两个亚基构成,每个亚基含一个和一个,其中与四个组氨酸以及一个2配位,形成一个扭曲的四方平面构型,与三个组氨酸的咪唑氮及一个天冬氨酸的羧基氧原子配位,形成扭曲的四周体结构。-的约为4000

19、0,由两个亚基构成,每个亚基含一个,它与三个组氨酸、一个天冬氨酸及一个2配位,形成三角双锥结构,处于一个主要由疏水基构成的疏水壳子里,并由两个亚基共同形成一个供底物进出的通道。-的约为38000,由两个亚基构成,每个亚基含一个。其活性中心的由三个组氨酸、一个天冬氨酸及一个2配位。迄今为止,在一级结构的探究中发觉:各种不同来源的的氨基酸组成显示出明显的进化上的保守性和高度序列的同源性。多年来,尽管人们在确定的一级结构,猜测高级结构等方面做了大量工作,但其构象搞清晰的还不多。1982年,等获得了牛红细胞、-的0.2辨别率电子密度图,显示出亚基的结构核心是一个由八股反平行的折叠围成的圆桶状结构,称之

20、为桶(-)、其一侧尚有两个无代表性结构的环()。整个结构含螺旋较少。从牛红细胞、-的氨基酸序列看,与44、46、61和118位的组氨酸相连,与61、69、78位的组氨酸和81位的天冬氨酸相连。、之间通过组氨酸61形成“咪唑桥”结构。在“咪唑桥”结构中,咪唑环几乎与、金属离子在一个平面上,仅向侧倾斜了约0.03,全部的五个非配位的咪唑氮和非配位的天冬氨酸81羧基中的氧都是氢键相连,而组氨酸61的咪唑基的吡咯氢已被除去,允许同时和、相配位。此外,天冬氨酸122与组氨酸69和组氨酸44之间形成氢键,由此构成了、之间第二座间接的桥。这两座“桥”在酶的催化反应过程中对酶结构的稳定起着重要作用。半胱氨酸5

21、5和144的基之间形成的二硫键是、-中唯一的一对链内二硫键,对维持、-结构的稳定也起着重要作用。-晶体5和-晶体6的电子密度图辨别率分别为0.18和0.21,在活性中心以及金属-配体簇四周的结构上,两者很相像。每个亚基包含两个结构域。一个结构域由三个螺旋组成,另一个结构域由三个螺旋和一个折叠组成。金属结合位点就在这两个结构域之间。围绕活性中心的是几个保守的芳香族氨基酸,其中有三个酪氨酸,三个色氨酸和两个苯丙氨酸,都在距金属离子1的范围内。在-中,第90位氨基酸残基是酪氨酸,在-中则是苯丙氨酸,两者都围绕活性中心,作用相像。-和-尽管在一级结构和空间结构上显示了很大的相像性,但究竟还有区分。在一

22、级结构上,也有几个位置的氨基酸对,-分别是专一的,由此可以区分-和-7。-中83位的谷氨酰胺和-中160位的谷氨酰胺作用相同。在这两种中,83位和160位的氨基酸在空间结构上距离很近。为了适应这个结构,在-中与160位谷氨酰胺相邻的82,83位氨基酸是体积较小的甘氨酸,相应地在-中,82,83位分别是丙氨酸和谷氨酰胺,则在160位是体积较小的丙氨酸。色氨酸85对于-是专一的,正是由于这个色氨酸,-才对22敏感。161位在-里是天冬氨酸,在-里是甘氨酸。(4)的理化性质自从1969年McCord和Fridovich首次发觉超氧化物歧化酶(SOD)以来,国内外不少学者对SOD的分别纯化、理化性质及

23、其在生物学和临床医学等方面的探究已取得了很大进展。如将SOD用于类风湿、关节炎等疾病的治疗效果显著;在日用化学工业作牙膏、肤用霜类添加剂均已达到工业化生产规模;SOD作为特殊养分食品添加剂的探究和开发亦受到重视。目前,虽然对SOD添加于食品中的探究尚不多见,但SOD在食品中的养分保健作用却自不待言。自由基学说认为:自由基具有高度的化学活性,是人体生命活动中多种生化反应的中间代谢产物,自由基攻击生物大分子导致组织损伤是很多疾病发生发展的根源。SOD则作为自由基清除剂清除机体代谢过程中产生过多的自由基,因此,SOD是一种可增进人体健康的重要活性物质,也是一类重要的功能性食品基料。SOD是机体内超氧

24、阴离子自由基O2的清除剂,它在机体内催化超氧阴离子歧化生成过氧化氢和氧气:(SOD)2O2+2H+H2O2+O2其产物H2O2再由过氧化氢酶转化成H2O和O2或氧化产物,即(过氧化酶)(过氧化酶)2H2O22H2O+O2(过氧化酶)H2O2+RH22H2O+RSOD是一种含金属的酶,按金属辅基成分的不同可分成三种。最常见的一种含有铜锌金属辅基(Cu,ZnSOD),主要存在于真核细胞的细胞质中,也存在于高等植物的叶绿体基质、类囊体内以及线粒体膜间隙中。该酶纯品呈蓝绿色,由2条肽链组成,每条肽链含有铜锌原子各一个,活性中心的核心是铜;第二种含有锰原子(MnSOD),主要存在于真核细胞的线粒体及原核

25、细胞中,也存在于植物的叶绿体基质和类囊体膜上(纯品呈粉红色,由4条或2条肽链组成);第三种是FeSOD,主要存在于原核细胞中,FeSOD在高等植物中一般仅存在于叶绿体中。纯品呈黄色或黄褐色,由2条肽链组成,多数状况下每一个二聚体中含有一个Fe原子。SOD广泛存在于好氧微生物和动植物中,目前,在厌气生物体内也发觉了SOD的存在,SOD一般从动物血液、脏器或牛乳中提取,也可从植物如小白菜叶、大蒜中提取,还可以从鸡蛋中分别与提纯。是一种酸性蛋白,在酶分子上共价连结金属辅基,因此它对热,以及某些理化性质表现出异样的稳定性,的主要理化性质见表1。、-对热稳定,自然牛血、-在75下加热数分钟,其酶活性丢失

26、很少。在离子强度很低的状况下,加热至95,、-的活性损失亦很少,构象熔点温度的测定表明是迄今发觉热稳定性最高的球蛋白之一。而-对热比较敏感。在、-催化下歧化反应的速率常数大约为1.8109(/)-1-1,而且在5.3-10.5范围内几乎不变。在7.0时,-与、-催化速率常数一样,但在碱性条件下明显减小(7.8时,=1.8109(/)-1-1,=10.2时,=0.3(5)稳定性及影响因素、热、蛋白酶的影响在5 3-9 6间催化性能良好,在4 5-11间能稳定存在。3 6时,、-中95%的要脱落,在12.2时,的构象会发生不行逆的转变而使酶失活。对热的稳定性与溶液中离子强度有关。当离子强度很低时,

27、即使加热到95,其活性损失也很少。在模拟胃酸和模拟胃肠道蛋白酶、胰蛋白酶环境中的稳定性探究表明,在动物胃肠道中具确定的稳定性,在胃酸的环境中,37活性受饮料的色泽、成分、酸碱度、乙醇含量等多种因素的影响,只有在无色、近中性、无乙醇饮料中活性较稳定。另外还发觉有机溶剂和对的活性具抑制作用。(6)的平安性大量试验和临床应用表明,无论何种给药方式,除罕见的超敏反应外,对人体无毒性。虽然是在30000以上的蛋白质,但却未发觉具有抗原性,其缘由也正在进一步探究中。3、外源在动物体内的代谢临床试验表明4健康人体一次静脉注射牛,-,其消退半衰期为25,在给药后1.5,血浆中的含量降至相当于初始含量的1%,说

28、明静脉注射时药物在体内的分布与消退都是很快速的,肌肉注射均慢于静注。在人体内,-的降解主要在肾脏进行。小鼠口服试验证明,口服能明显提高血浆中水平,口服后血中4达到高峰值,与对比相比,活性提高率在30%40%。初步探究表明,在口服时,外源除完整大分子被动物体吸取外,还可能通过降解的外源诱发动物体产生内源,其诱发机制还需进一步探究。另外动物体外试验还表明,外敷可被兔皮和豚鼠皮吸取进入体内,但吸取机理还不明。第四节 的生理功能正常状况下,体内超氧阴离子自由基(-2.)的产生与清除是平衡的,当(-2.)产生过多时,会对机体产生毒害作用。是体内的一个抗氧化酶,特异性催化下列反应2-2.+2+22+2即将

29、超氧阴离子自由基歧化为过氧化氢和氧气,起到消退超氧阴离子自由基的作用。因而具抗年轻、提高机体对多种疾病的反抗力、提高机体对外界环境的适应力、减轻肿瘤患者在放疗、化疗过程中的严峻毒副作用等生理功能。141 SOD对人体的养分保健作用1、清除机体代谢过程中产生过量的超氧阴离子自由基,延缓由于自由基侵害而消失的年轻现象,即延缓皮肤年轻和脂褐素沉淀的消失。年轻自由基学说认为:年轻是来自机体正常代谢过程中产生的自由基随机而破坏性的作用结果,自由基引起机体年轻的主要机制可概括为以下三方面。(1)生物大分子的交联聚合和脂褐素的累积自由基作用于脂质产生过氧化反应,其氧化产物丙二醛等会引起蛋白质、核酸等生物大分

30、子的交联聚合。该现象是年轻的一个基本因素,脂褐素是丙二醛与蛋白质等生物大分子的交联聚合产物,由于它不溶于水而不易被排泄,在机体细胞中大量堆胞免疫力下降导致皮肤肿瘤易感性提高;脂褐素在脑细胞中积累,会消失记忆力减退或智力障碍等。(2)器官组织细胞的损伤与削减此现象主要是由于自由基引起的脂质过氧化而造成对细胞膜与细胞质膜的损害,另外自由基作用于核酸引起基因突变,导致蛋白质和酶的合成错误以及酶活性的降低,这些作用的积累造成了器官组织细胞的老化与死亡。(3)免疫力量的降低自由基作用于免疫系统或淋巴和胞膜使其受损,引起老年人细胞免疫与体液免疫力量降低。SOD作为自由基清除剂,在清除自由基时就会对延缓年轻

31、起到显著效果。2、提高人体对自由基损伤而诱发疾病的反抗力,包括肿瘤、炎症、肺气肿、白内障和自身免疫疾病等。当SOD作为功能性食品基料加入食品中时,可有效反抗很多疾病的发生、发展,对人体健康有很大作用。3、提高人体对自由基外界诱发因子的反抗力,如烟雾、辐射、有毒化学品和有毒药品等,提高机体对外界环境的适应力量。电离辐射引起生物体内产生O2、OH等自由基。OH对机体损伤作用大且其产生部位常为其作用部位,故远离OH产生部位的生物大分子受损的机会小。O2损伤作用虽远小于OH,但可从产生部位集中到其他部位,并在铁离子螯合剂存在下与H2O2反应生成OH,从而造成DNA、生物膜等损伤。烟雾、有毒化学品和药品

32、也产生过量的O2损伤与机体,SOD同样可以削减这些损伤。4、清除机体疲惫,提高对超负荷大运动量的适应力。在军事、体育和救灾等超负荷大运动量过程中,机体中部分组织细胞会交替消失临时性缺血及重灌流现象,引起缺血后重灌流损伤,加之乳酸量的提高,导致肌肉的疲惫与损伤。若在运动前供应SOD,则可爱护肌肉避开消失上述现象。单次猛烈运动可使体内自由基水平明显上升,过量的自由基作为引发剂攻击细胞膜中的不饱和脂肪造成脂质过氧化,引起膜流淌性下降,脆性提高,过氧化脂质的一个特征是生成丙二醛,形成磷脂之间的交联,也可与血红蛋白形成高铁卟啉褐色产物。机体经猛烈运动后,ATP含量有所降低、肌酸激酶活力临时下降,AMP含

33、量上升,在腺嘌呤转氨酶的作用下促使IMP增高,然后在51-核苷酸酶和核苷酶作用下,生成次黄嘌呤化酶的作用下,形成过量的O2。因此补充外源SOD能够有效抑制运动引起死回生的细胞损伤。142 SOD作为保健食品功能因子的可行性SOD在pH值为7.8、温度为75以内的各温度下保温10min,其活力无明显降低;在pH值为7.8的8mol/L脲中,其活力亦无明显降低。由此可见,SOD试验报道,以酸奶为载体,将含SOD酸奶放置24,48及72h,酸奶中SOD的流行性与0h相比基本不变(P0.05),即SOD活性在酸奶中于4条件下保质目前,只有个别食品厂商生产含SOD的保健的保健酒、SOD牛奶、SOD口服液

34、及一些其他类型保健食品。绝大多数酶在一般状况下是不稳定的,而SOD却特别稳定,放置较长时间活性也不降低。在类似胃液环境中(如在盐酸溶液中)放置很长时间,SOD活性仍未显著降低;与消化酶类(如溶菌酶)混合在一起,其活性也未被破坏,因此SOD可以口服或做成保健食品。假如先做成饮料再添加SOD,其补破坏的机会更小,即SOD先经滤膜超滤去除微生物,再经无菌操作将SOD添加到饮料中,这样既不会降低饮料质量,又不降低SOD活性。综上所述,SOD作为超氧自由基的清除剂,对人体健康是特别有益的。随着人们生活水平的日渐提高,养分与保健已成为人们生活中的重要内容,而SOD给人们带来的重要功效不行低估,通过外源摄入

35、SOD可延缓年轻、反抗各种疾病的侵害等。但需特殊指出的是,尽管SOD有如此重要的生理功能,然而有些疾病的患者(如肾功能衰竭、尿毒症、精神病患者入患孤独症的小孩)血液中的SOD浓度比正常人高很多,这些人群不但不需补充SOD,相反还要抑制或削减SOD。因此,应针对不同人群制定不同摄入量标准,正确生疏SOD的生理功效,让更多的人生疏和正确用法含SOD的养分保健食品。第五节SOD活力测定SOD测活方法有近二十种,一般分为二大类:一类是挺直测定法,即挺直测SOD催化反应的底物消耗速度或产物生成速度。例如法,脉冲射解法,超氧化钾法等,因受仪器或试剂限制,此类方法一般试验室难于应用;另一类是间接测定法,其原

36、理是:有一产生2的系统,使-2再产生另一个便于检测的反应,通过测SOD对这个反应的抑制程度间接定量SOD活力。这类方法较多,也常用。例如经典的邻苯三酚自氧化法。改良邻苯三酚自氧化法、黄嘌呤氧化酶法、完还原法等。但此类方法有个共同缺点,即酶活力与抑制率之间是曲线关系。这就引出了以下两个问题:1、如何才能精确测活这类方法的酶活力单位定义一般都是:在确定反应条件下,以达到50%抑制率的酶量作为一个酶单位。因此严格讲,每次测量都要通过调整酶量使抑制率正好达50%后才可进行酶活力计算。但这样工作量较大。为了既不过多增大工作量,又不产生较大误差。规定达4852%的抑制率才可用法,不然要调整酶量重测。2、曲

37、线的直线化要使抑制率达4852%,不娴熟者往往要测多次,即使娴熟者一般也要测23次。这样工作量相当大(如几十、几百个样品)。解决的方法是将上述曲线关系通过数学变换为直线关系。即先测57个梯度酶量的抑制率得一曲线,然后用数学方法将其转换为直线,以后每个样品只要测1次即可(在此直线范围内),不受50%抑制率限制,亦不会引入较大误差。第六节 SOD来源及制备1、由动物血提取目前国内基本上以动物血为原料制备,典型的制备工艺是先经溶血,然后接受热变性和有机溶剂处理提取,最终用柱层析纯化。2、从植物中提取从植物中提取是最近探究的热点,植物SOD克服了动物SOD不宜内服和易与身体起反应的缺点,且提取工艺简洁

38、,原材料来源丰富,将成为SOD产品的主要来源。3、微生物的探究对各种微生物含量的探究结果显示,真核微生物的含量一般高于原核微生物。已筛选出多株高产酵母菌株:曲爱琴等选育出-22,发酵水平含量为9.6104/发酵液;杨完礼等分别到-215,提取所得为、-,比活为4580/;张博润等经初选、单倍体分别、诱变、杂交这一育种途径选育出-48,细胞含量高达1350/湿菌体;高蒲渝等筛选到143菌株,在确定条件下产酶力量高达1.5105/发酵液。另外还分别到产-的嗜热栖杆菌、产-的嗜热脂肪芽孢杆菌及产于胞外的高产菌株。发酵生理学探究表明,养分和培育条件对含量影响较大,且的存在与细胞的需氧代谢亲密相关,通常

39、在空气中能存活的厌氧微生物中的含量低于需氧微生物。微生物的提取经破壁、硫酸铵分段盐析、透析、-纤维素层析纯化几个步骤进行。破壁方法有传统的超声波破壁法和工业上可行的氯仿破壁法。另外,应用基因工程手段生产的探究也方兴未艾,日本和美国都已进行的试产和临床试验工作。我国在这方面差距较大,最新报道的是中科院张博润等进行的酵母菌基因的克隆和表达。第七节 SOD的应用自从1973年Weisiger等在鸡肝中发觉二种SOD以来,至今已接受了各种分别及分析方法,成功地从各种动物肝脏及液中,分别纯化了SOD。同时发觉SOD的存在可能与机体年轻、肿瘤发生、自身免疫性疾病和辐射防护等有关。目前临床上主要用于延缓人体

40、年轻,防上色素镇静,消退局部炎症,特殊是治疗风湿性关节炎、慢性多发性关节炎及放射治疗后的炎症,无抗原性,毒副作用较小,是很有临床价值的治疗酶。SOD不仅在临床上大显身手,而且近年来又被广泛地应用于日用化工行业。含有SOD的化装护肤品倍受女士的青睬,其产品具有很强的竞争力。如市场上销售的奥琪、大宝、紫罗兰、水芳等高级护肤化装品,都因添加了SOD而成为抢手货。随着SOD被广泛应用于护肤霜、洗面奶、香皂等领域,以及活性氧、疾病诊断和抗辐射等方面的探究,SOD将成为宽敞药厂和日用化工厂的重要原料。假如体内自由基过多、机体自身清除过慢,就会加速机体年轻而诱发各种疾病。SOD通过清除人体内过多的氧自由基延

41、缓年轻、提高机体免疫力并提高对疾病的反抗力。SOD作为一种临床药物在治疗自由基损伤引起的疾病方面效果显著,应用范围也逐步扩大。SOD在治疗自身免疫病、组织缺血后重灌流损伤、肿瘤、老年性白内障、炎症及肺气肿等方面的探究正在深化。第二章 SOD的来源第一节 畜禽血液生产SOD家禽血液约占其体重的8%,一般屠宰后可以收集50%以上。血液中含有丰富的养分和生物活性物质,完全符合人类、家禽机体的需要,是一种全价养分物质,经科学工艺加工,可以用作人体可畜禽生理生化调整剂。我国畜禽血液资源特别丰富,目前基本上未被利用,有些地方还造成严峻环境污染。开发、生产畜禽血液产品,既提高了屠宰企业经济效益,提高了食品、

42、医药工业原料,又削减了环境污染,是一件利国利民的好事。1、凝血酶(TON):血液经分别得到血浆可提取凝血酶。TON主要用于局部止血、外科手术等的出血止血。临床证明,TON的止血效果优于止血敏,较氨基苯甲酸、止血环酸、止血素、去甲肾上腺素等是目前国际新型高效局部止血药,TON止血快速、无毒副作用,深受用户欢迎。以每天处理200公斤血液计,设备投资100万元,可产1000的TON43.8万支,每支售价10元,年产值为430万元,生产成本约70万元。2、超氧化物歧化酶(SOD):SOD是主要的副产品,SOD是国内外学者所公认的最佳自由基的清洁剂。由于它的分子最小,可挺直被皮肤、粘膜吸取。广泛应用于化

43、装品、牙膏、食品、医药工业,也可以经特殊工艺制成微胶囊后口服。按上述生产力量,年产SOD73公斤,以售价每公斤2万元计,年产值为140万元。3、血浆蛋白粉、血红蛋白(Hb)粉:血浆蛋白粉完全可以替代全鸡蛋白,其消化率为92.1%,生物效价为97.0%,蛋白质利用率为80%,目前多用于食品工业和饲料工业,如面条、蛋糕、蛋卷、午餐肉等。Hb粉的真消化率为83%,生物效价微72%,蛋白质利用率为60%,主要用于巧克力糖、饼干等,可提高食品的蛋白质和铁的含量。按上述按上述生产力量,可副产血浆蛋白粉6吨左右,血红蛋白粉15吨左右,销售价在2500元/吨左右。此外,副产的纤维蛋白粉也具有止血作用,但效果比

44、TON差,不常用。纤维蛋白粉可用来制备蛋白胨等产品。上述五个产品在加工过程中可以同时获得,综合开发利用,其投入产出比特别可观,如扩大生产规模,经济效益更为可观。211 牦牛血提取SOD牦牛血在药品、食品、养分品、化装品等方面应用前景宽敞青海省高原医学探究所遗传工程室助理探究员余满堂,从生活在海拔米以上的土著动物牦牛的血中探究高原特色基因时,意外地获得重要发觉:牦牛血中含有大量的超氧化物歧化酶()。他将牦牛与我国内地的鸡、狗、羊、水牛、黄牛等动物进行比较分析,发觉牦牛血中的含量比内地黄牛的含量高三倍多,证明白牦牛确系“原始畜种基因库”,是多功能、高价值的畜种资源。牦牛主要分布在我国的青藏高原。我

45、国现有牦牛多万头,相当于世界牦牛存栏总量的。青海省高原医学科研人员在发觉牦牛血富含后,到全国各地考察,发觉在治疗类风湿关节炎、抗肿瘤、消解清除使人类年轻的氧自由基等方面的应用前景宽敞,目前在药品、食品、养分品、化装品等方面都有特别广泛的应用。依据市场考察和当地丰富的牦牛资源现状,青海省高原医学探究所打算将这一科研成果作为科技扶贫项目,和地处青藏高原腹地的青海省玉树藏族自治州高原生化制剂股份有限责任公司联合,共同开发牦牛血资源。212 蚯蚓SOD近年来发达国家已兴起一个开发蚯蚓保健食品热,蚯蚓的年贸易额在20亿美元左右,而每年正以20%25%的速度递增。美国、加拿大、日本等国都在大力发展蚯蚓养殖

46、业,目前已发展到工厂化养殖和商品化生产,养殖蚯蚓成了前景宽敞的新兴养殖事业,蚯蚓的开发价值,引起了广泛的留意。1997年美国的300个大型蚯蚓养殖企业组成了国际蚯蚓养殖者协会,以帮助促进这个行业。江西的科技工作者,从蚯蚓活体提取超氧化物岐化酶(SOD)获得成功,研制出帝龙SOD自然系列产品,从而使该技术的开发应用获得了新发展。超氧化物岐化酶,具有很强的抗肿瘤、抗年轻、抗辐射、提高免疫功能等作用,还可治疗高血压、心脏病、肺气肿等。在化装品方面,SOD作为抗年轻主要成分被广泛用法。第二节 植物提取SOD221 玉米提取SOD据哈尔滨市日报报道,以500克玉米为原料,提取50克SOD,可卖200多元

47、。哈尔滨龙琪实业有限公司拥有的一项填补世界空白的项目,使玉米身价提高近据专家介绍,SOD即超氧化物歧化酶,有极强的抗氧化、抗辐射、消炎、防年轻和抗癌作用,经它处理的香烟,尼古丁含量极少。美国和日本也拥有SOD提取技术,但其成本是玉米提取的近百倍。另外,玉米提取SOD后的剩余物90%都是玉米粉,用途也特别广泛。用玉米提取超氧化物歧化酶,是一项填补国内外空白的先进技术。目前市场中的SOD大部分为牛马血SOD全都,但在制取、应用、经济效益与社会效益上相差却是很大的,前者大大优于后者。二者优劣性如下:(1)玉米作为生产原料易于收集存放。血液来源不一。(2)制造玉米SOD加工简洁,与淀粉的生产工艺类似。

48、(3)玉米SOD制剂比血液SOD制剂性能稳定用法平安。(4)在副产物的综合利用方面,血液SOD的副产物是血红蛋白,目前只能做饲料,由于适口性不好及消化率太高,在饲料中只能加5%左右。而玉米SOD的副产物为玉米粉,可加工成变性淀粉或淀粉糖化后加工成饴糖或1.6一二磷酸果糖,后者是高级输液原料,临床急需。也可做为饲料。鉴于上述缘由,血液SOD制品不宜内服,这样将大大的限制它的应用范围。玉米SOD克服了血液SOD的缺点,所用技术方法先进牢靠,已达到国际领先水平。开发SOD,提纯后制成纯品,对医疗、保健新药开发、克服动物源制品可能存在的的致病因子有重要意义,对玉米的深加工也将发挥重要作用。亲密结合科学

49、与社会实际,本项制取技术在解决种子细胞破壁物质,用法抗氧化剂处理等方面均有独到之处,所得产品在线纯度、产率、酶活力方面均达到企业标准。因此扩大生产规模,开拓市场势在必行。第三节 富含SOD植物的开发和利用231 SOD鲜桃被国家有关部门命名为“中国桃乡”的河北省乐亭县开发生产自然功能果品SOD鲜桃获得成功。SOD是一种生物活性酶,它可以清除人体内的氧自由基,从而达到祛病健身、强身益寿的作用。SOD鲜桃生产是接受现代生物工程高新技术把SOD活性酶植入桃树树体,使生产的鲜桃富含SOD,SOD鲜桃产品既保持了原有的养分价值和口感风味,又提高了医疗保健作用,成为延年益寿的自然保健功能果品。为搞好这项生

50、产开发,乐亭县特地成立课题小组,建立了生产示范基地。同中国农业高校协作开发生产SOD鲜桃。生产中,除按SOD产品技术规程严格操作外,还严格依据无公害果品生产技术标准实施。2001年,首批生产的SOD鲜桃经检测,果品达到无公害标准,SOD酶活含量极其丰富,每100克鲜桃含SOD活性酶6000个以上,在市场上引起消费者的关注。为加快这一新技术产品的开发,2002年乐亭县又开拓100亩生产示范基地,明年将在全县大面积推广。232 SOD草莓SOD(超氧化物岐化酶)是动植物体内一种活性酶,它能消退体内的超氧阴离子(此物质可以损伤细胞内的遗传基因DNA、RNA,使人体逐步年轻、生病),具有保健、美容效果

51、。日完温室SOD,保健草莓是由北京三利果树探究所开发并试验成功的高科技产品,其果实不仅个大、味美,而且含有较多的对人体有益的SOD酶,平均每100克果实比一般草莓高500个国际单位。SOD草莓在市场销售价高达80233 SOD西红柿哈慈集团与中国农业高校合作在山东寿完科研基地生产的含有SOD的西红柿(爱吉果),最近将在北京市场上上市。这种被命名为“爱吉果”的产品经中国绿色食品发展中心审核,已获得绿色食品标记用法权。爱吉果集绿色无污染、保健与食疗于一身,是一种上佳的防病、抗年轻的养分保健食品。234 SOD枸杞宁夏枸杞企业(集团)公司。企业现有枸杞基地130公顷,主要产品为“碧宝”牌系列枸杞干果

52、。“碧宝”牌枸杞为宁夏枸杞之冠,质量最优,连获3届中国农业博览会金奖,为国家级名牌产品绿色食品,产品畅销全国及欧美和东南亚地区。近年来,企业科技人员由探究开发出了枸杞富硒生产栽培技术,提高了枸杞产品的硒含量和SOD酶活性,从而提高了宁夏枸杞抗氧化力量,是宁夏枸杞的抗年轻、抗疫病、抗肿瘤等方面的作用越发突出。235 大蒜SOD大蒜化学指出,大蒜含有丰富的养分成分,尤其是具有独特生物活性的蒜素等含硫化合物和超氧化歧化酶(即SOD)及硒蛋白等功能成分,这些物质具有显著的医用的食用价值。大蒜的SOD含量甚高,超过20u/g,是目前发觉的植物中含量最高的。大蒜素对动脉硬化、心肌梗塞、血栓症、预防中风、糖

53、尿病、抗菌消炎、抗病毒、抑制血小板分散(抗血栓形成)、防冶癌症和肿瘤、提高免疫机能、延缓年轻等都有特别好的药效。植物来源的SOD无抗体干扰,SOD作为一种活性酶,催化清除超氧基团,并和过氧化酶等协作作用,能有效地防备活性氧对生物体的毒害作用。SOD和硒蛋白等在抗炎症、预防年轻和治疗癌症肿瘤等方面都起到了重要作用。蒜素和SOD及硒蛋白等有机组合制成保健食品具有显著的降血脂、抗肿瘤及延缓年轻作用。具有特殊生理调整作用的功能食品是第三代食品,也是21世纪时评的代表。236 螺旋藻SOD螺旋藻可延缓年轻:螺旋藻含有-胡萝卜素、维生素E、-亚麻酸等多处抗年轻的活性物质,螺旋藻中含有大量的超氧化物歧化酶(

54、SOD),可以有效地清除体内自由基,延缓机体的年轻过程,促进人体机能正常化,提高细胞活力,促进人体新陈代谢,延缓性腺萎缩,防止动脉硬化。同时,螺旋藻中硒的含量丰富,能有效地提高淋巴细胞和巨噬细胞清除细菌的力量,还具有抗氧化爱护细胞不受损伤的功能,并可促进免疫球蛋白的生成,提高机体免疫力。另外,螺旋藻含有丰富的临床维生素E和维生素C,具有抗氧化作用,可延缓年轻。237 北冬虫夏草SOD虫草素:人工培育的北冬虫夏草中的虫草素含量高于自然虫草,虫草素具有抑菌,抗病毒,抗癌作用。虫草酸:人工培育的北冬虫夏草中的虫草酸含量略低于自然虫草,虫草酸具有止咳平喘、有扩张气管、冷静、抗多种细菌的作用。SOD:人

55、工培育的北冬虫夏草中的SOD酶活性和比活性明显高于自然虫草。SOD酶具有抗类风湿,红斑狼疮,皮肌炎,防辐射,抗癌,抗年轻和美容的作用。虫草多糖:人工培育的北冬虫夏草含有的虫草多糖明显高于自然虫草,虫草多糖能提高人体免疫力,起到扶正固本作用,对老年性慢性支气管炎,肺原性心脏病有显著疗效,能提高肝脏的解毒力量,起护肝作用。第三章 近期国内外对SOD的探究世界各地学者从不同的角度,不同领域,不同范围和深度,接受不同的方法和手段,对SOD的化学性质、生物学特性,分子结构,药理,化工等方面进行了探究并建立了一整套快速有效的分别制备及分析鉴定方法,取得了令人瞩目的成就。美国著名的生物化学家Michelso

56、n教授在欧洲分子生物学学会1976年6月在法国班生诺斯组织召开的首届超氧化物和超氧化物歧化酶的讨论会的二集前言中写了这样的一段话:1969年Fridovich和MCcord首先从红细胞中发觉了SOD,并发表了关于超氧阴离子自由基的生物学意义的文章。自此以后,接踵而来的有关活性氧代谢的分子生物学方面一系列的制造性的探究工作,简直可以与1953年Watson和Crick发表出名的DNA双螺旋结构学说后所引起的轰动相比拟。由此可见,SOD的探究在整个生化界造成了很大影响。我国探究从70年月末80年月初开头的,虽然起步较晚,但发展速度令人惊异。80年月以来我国也掀起了一股探究热潮,并于1988年、19

57、90年分别在宁波,兰州召开过两次全国性的学术讨论会。与此同时,上海,汕头等地也先后召开过多次专题讨论会。因此被称为东方探究热,很多专家,教授以及专业探究人员被这块巨大的磁铁所吸引,所诱惑,他们纷纷加入了探究的行列,探究成果呈直线上升,简直到了一发而不行整理的地步。仅仅化学文摘()19851986年的两年间收载的有关论文高达441篇。1989年美国召开的第五届国际学术会上,与会代表全都认为深化进行的科学及应用探究,不仅具有重大的理论和实践意义,而且也具有重大的经济价值和宽敞的应用前景。第一节 超氧化物歧化酶探究综述超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,简称)是一种金属酶类。它

58、几乎存在于全部的生物体中,依据所含金属离子的不同而分为三种类型:(1)-:主要存在于真核细胞的细胞浆中,由两个亚基组成,每个亚基中各含有一个和一个。(2)-:主要存在于原核细胞和真核细胞的线粒体中,来自原核细胞中的-是由二个亚基组成,而来自真核细胞线粒体中的-,是由四个亚基组成,每个亚基中各含一个-。(3)-:只存在于原核细胞中,是由二个亚基组成,每个亚基中各含一个。在生物体内的功能是催化超氧化物阴离子自由基( 2)进行歧化反应: 2+ 2+2+22+2。可见具有清除生物体内产生的超氧化物阴离子自由基(2)的作用。现代医学的探究结果表明,的存在可能与机体的年轻、肿瘤、炎症、氧中毒和自身免疫性疾

59、病等有关。因此,关于的探究引起国内外学者的高度重视。我国学者对于-的探究比较多,而对于-和-的探究则特别少。因此本文仅就-的提取纯化、分子量的测量、氨基酸的组成、吸取完谱和等电聚焦电泳的国内探究状况作一简要综述。1、-的提取纯化迄今为止,我国学者已经分别从牛血、猪血、鸭血、猪肝、小白菜及人血红细胞中纯化出-。其提取纯化的方法均是在和法的基础上加以改进而用来纯化-,因此由这些方法纯化的-,其活力回收在60%左右。如袁勤生等1从牛血中提取纯化的-,其活力回收约为70%,而从猪血中纯化的-,其活力回收为61%2。林秀坤3由猪的肝脏中纯化的-,活力回收约为51%。虽然关于酶活性测定的方法比较多,但国内

60、学者多用连苯三酚自氧化法来测定的酶活性。对于纯化后-的酶比活测定结果见表1。从表1中我们看到,由动物体中提取纯化的-,其酶的比活在1000020000/蛋白之间,而从小白菜叶细胞溶质和叶绿体中纯化的-,酶的比活则分别为594 7/蛋白和471 6/蛋白,明显低于动物体中-的酶比活。现在国内纯化-的方法多数具有步骤多,活力回收不高等缺点。而周立等4用法的金属螯合亲和层析法则具有操作步骤少、活力回收高等优点。用这种方法纯化了猪红细胞中的-,结果活力回收达到了90 .4%,而酶的比活却较低,仅为4508/蛋白。导致金属螯合亲和层法纯化-的酶比活较低的缘由有待于进一步的探究。为了制备大量高纯度的,国外

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