DNA测序样品要求_第1页
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文档简介

1、各类样品模板均应提供相应的模板和引物信息,并清楚地填写生工生物测序订单生工是ULTRAPAGE纯化方式捷瑞是PAGE纯化方式模板要求未纯化PCR产物片段大于200 bp;提供30 p l以上的PCR扩增产物(总量1-2 p g);取2-3 p l样品,能够清晰的检测出目的条带;自带引物。已纯化PCR产物PCR产物溶于ddH2O中(请勿溶解在TE溶液中);浓度大于30 ng/p 1,体积大于10 p 1,长片段需适当增加提供量;电泳检测条带单一明亮;自带引物。质粒质粒溶于30-50 p l ddH2O中(请勿溶解在TE溶液中),电泳检测浓度大于50 ng/p 1; 20ul 量建议用相关试剂盒提

2、取质粒;如有可能,同时提供1 ml含有相应质粒的菌液备用;需注明载体全称和插入目的片段长度及测序要求。菌样说明载体、抗性类型;我们提供氨苄青霉素,卡那霉素,四环素及氯霉素四种抗生素;其余类型抗生素需自备并附使用说明;应为咼拷贝质粒,对于低拷贝质粒,请直接提供约1 p g纯化质粒;提供1 ml左右过夜培养(12 h)的菌液,加入终浓度为15%的灭菌甘油, 于EP管中封口保存,防止交叉污染或渗漏;大量样品测序,建议在一次性塑料培养皿固体培养基上穿刺培养;建议尽量提供穿刺培养或斜面培养的菌种(装在EP管中)。自带引物浓度不低于5 pmol/p 1(即5 p mol/L),体积20-50 p 1,并请

3、注明浓度;随机引物(RAPD引物)、简并引物、长度不足15 bp或大于30 bp引物、 有特殊标记的引物或不纯的引物均不能用于测序;尽可能提供引物全序列、PCR退火温度等信息,以供参考。免费提供的通用引物M13+即 M13(-47), M13-即 M13(-48), M13(-20), M13(-26), T7promoter,T7 terminator, SP6, T3, BGH,573AOX, a -factor, -96gIII, pBV220+/-, PT5, pEGFP-N5/3, pEGFP-C5,3,pCMV5-F/R, pQE30+/-, 5/3AD,pGEX5/3, pGL3+/-, Pact2F/R, 27F, 1492R, CMV, U6promoter, S-Tag 等通用引物。如您需要的引物不在此列,请电话咨询或自带引物,如需生工合成,请注明。温馨提示:对于甘油菌

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