实验血清甘油三酯含量测定_第1页
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文档简介

1、关于实验血清甘油三酯含量测定第1页,共8页,2022年,5月20日,22点18分,星期三实 验 目 的了解血清甘油三酯含量测定的 正常值与临床意义掌握血清甘油三酯化学法测定的 基本原理及主要技术方法第2页,共8页,2022年,5月20日,22点18分,星期三甘油三酯KOH60-7020min钾皂甘油+HIO4+NH4+甲醛乙酰丙酮3,5-二乙酰-1,4二氢-2,6 二甲基吡啶(黄色带荧光)甘油甲醛皂化氧化显色32实 验 原 理第3页,共8页,2022年,5月20日,22点18分,星期三实 验 步 骤取3(或4)只小试管,依次加入蒸馏水、标准液、样品,抽提剂及硫酸,边加边摇,用力振摇10min,

2、静置10min分层 注意:试管必须干燥吸取上层液体0.5ml,加入对应的3 (或4)只大试管中,加入异丙醇、皂化试剂,充分混匀,65水浴5min注意:吸上层液时,务必当心,绝对不可吸入下层液体(分光光度计预热)加入氧化试剂,充分混匀后,加入乙酰丙酮和氨的混合液,摇匀,65水浴15min取出试管,流水/室温冷却,测420nm的吸光度抽提皂化氧化显色比色第4页,共8页,2022年,5月20日,22点18分,星期三拉杆,0-4档样品池读数波长毛面1、分清光面、毛面。手应接触毛面,光从光面通过2、用溶液润洗2-3次,装至2/3至4/5体积3、粗纸吸水、柔纸擦亮光面比色杯的使用分光光度计的使用1. 打开

3、电源,调节旋钮至需要的波长,预热2030min2. 1档(空白管),T模式调100%,显示“Blank”、“100”3. 拉杆拉至1.5档,T模式调0%,显示“0.00”4. 换到A模式,拉至2、3、4档,读取各个样品的吸光度光面第5页,共8页,2022年,5月20日,22点18分,星期三Lambert-Beer 定律正常参考值为0.301.7mmol/L mg/mlmmol/L国际单位 mg/ml 1000 摩尔质量g/mol (885)实 验 结 果 A1 c1 m1标准管法 = = (终体积相同时) A2 c2 m2 A样品 m标准品 A标准品样品TG浓度 = V样品 A样品 1mg/ml 0.2ml A标准品= 0.2ml第6页,共8页,2022年,5月20日,22点18分,星期三注 意 事 项抽提时摇匀静置,待完全分层后才能吸取上层液,吸取上层液时不能吸入下层液;实验完成后,试管和比色杯必须用皂粉洗干净,不能有油污,将水甩干,倒置晾干;枪头必须清洗干净,甩干选用小试管时试管口径不能太细;试管使用时必须要干燥;第7页,共8页,20

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