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1、关于实验三死活细胞的鉴别第1页，共12页，2022年，5月20日，22点8分，星期三一、实验目的1.学习并掌握死活细胞鉴别的原理及方法。2.能够辨别死、活细胞。第2页，共12页，2022年，5月20日，22点8分，星期三二 实验原理死活细胞鉴别有许多不同的方法，其中最常用方法是台盼蓝染色排除法。其原理是：许多酸性染料不容易穿过活细胞的质膜进入胞内，却能渗入死亡的细胞内，使其着色，以此来鉴别死活细胞。第3页，共12页，2022年，5月20日，22点8分，星期三荧光排除法活细胞具有较强的酯酶活性，可将二丙酸酯荧光素中的荧光素分解出来，从而使细胞发出强烈的黄绿色荧光，死亡细胞由于酯酶失活，不能分解二

2、丙酸酯荧光素，不能发出荧光。第4页，共12页，2022年，5月20日，22点8分，星期三染色排除法：染成蓝色的为死细胞第5页，共12页，2022年，5月20日，22点8分，星期三三、试剂与器材1.材料：血细胞2.试剂：0.4台盼蓝溶液（生理盐水配制）、PBS。3.器材：显微镜、血细胞计数板、载玻片、滴管等。第6页，共12页，2022年，5月20日，22点8分，星期三四、实验内容1.血细胞悬液的制备取一定量的新鲜血液加入20等份的PBS。2.染色制片取0.5ml细胞悬液放入干净试管中，加入12滴台盼蓝染液，混合，2min后制成临时装片，镜检。第7页，共12页，2022年，5月20日，22点8分，星期三3.结果死细胞染成蓝色，活细胞不着色。细胞计数：单位视野内死细胞个数、活细胞个数。第8页，共12页，2022年，5月20日，22点8分，星期三第9页，共12页，2022年，5月20日，22点8分，星期三细胞活力公式根据下式求细胞活力： 活细胞率（）（细胞总数-死细胞数）/细胞总数100第10页，共12页，2022年，5月20日，22点8分，星期三五、注意事项1.计数时应多选择几个视野，以多个视野内的平均值作为细胞的存活率。2.以台盼蓝排除法在倒置显微镜下计数死活细胞数目需注意染色时间。第11页，共12页，2022年，5月20日，22点8分，星期三2

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