光果莸多酚物质的抗氧化作用研究

1、光果莸多酚物质的抗氧化作用研究【摘要】目的建立光果莸不同部位中多酚的含量测定方法，研究其对羟自由基的去除作用。方法采用索氏提取法以95%乙醇为溶剂提取光果莸不同部位的多酚物质，用紫外分光光度法测定各部位多酚含量及对羟自由基H的去除作用，以I50值为参考指标评价了多酚物质的抗氧化作用。结果光果莸花、叶、茎多酚含量分别为：1.44%，2.08%，0.49%。在试验浓度范围内(0.050.2g/l),光果莸不同部位多酚对羟自由基(H)均有不同程度的去除作用，在浓度为0.2g/l时，光果莸叶多酚的去除率达93.8%，与阳性对照Vit的去除率98.0%相当，其I50值为0.07g/l，小于Vit的I50

2、值0.08g/l。结论光果莸叶多酚抗氧化活性最强，是一种天然有效的自由基去除剂。【关键词】光果莸多酚；抗氧化；去除自由基；半数抑制率浓度hinaAbstrat：bjetiveTestablishthedeterinatinethdsfplyphenlfrdifferentpartfarypteristangutiaaxi,andtstudythesavengingativitynhydrxylfreeradial.ethdsThedifferentpartsfplyphenlpsitinsereextratedbysxhletextratinithethanl(95%),andplyphenl

3、ntentandHsavengingapaityeredeteinedbyultraviletspetrpHteter.TheantixidaniveativitiesftheextrutsereevaluatedbyI50.ResultsFlers,leaves,stesplyphenlfarypteristangutiaaxiere1.44%，2.08%，0.49%.PlyphenlfrdifferentpartsfarypteristangutiaaxihadvariusdegreesavengingativityagainstHatthenentratinfr0.05g/lt0.2g/

4、l.Atthenentratinf0.2g/l,learaneratearypteristangutiaaxileavesplyphenlreahedt93.8%,andaslsetthatfpsitiventrlV.I50as0.07g/l,lessthanthatfV0.08g/l.nlusinLeavesplyphenlfarypteristangutiaaxihasthestantixidantiveativityanduldbeaeffetivenaturalfreeradialsavenger.Keyrds：arypteristangutiaaxi.plyphenl;Antixid

5、ant;Freeradialsavenging;I50多酚类化合物是高等植物中普遍存在的次级代谢产物，具有广泛的生物活性，多酚具有抗肿瘤、抗病毒、抗衰老等方面的生理活性。多酚的这些生理活性与其具有的去除自由基和抗氧化性能亲密相关1。研究说明,多酚的抗氧化才能很强，它在阻止血脂升高的同时，还可以增加高密度脂蛋白的含量2。因此,多酚可用在保健食品中,起到强身健体的成效，也可用于食品中,以延长食品的货架期。光果莸arypteristangutiaaxi.为马鞭草科莸属植物，在秦巴山区资源丰富3，可用于治疗因酗酒过量所致的酒疮和湿疹等4。本实验对光果莸多酚进展了测定,并对其去除自由基活性进展研究，为其

6、资源合理的开发利用及质量控制提供理论根据。1器材1.1材料1.2试剂没食子酸，陕西省药检所提供；Vit，福林酚，Siga公司产品；硫酸亚铁，双氧水，水杨酸，95%乙醇，均为国产分析纯。1.3仪器2方法2.1光果莸不同部位多酚的提取精细称取一定量的光果莸花、叶、茎粉末用石油醚作为溶剂于索氏抽提器中回流8h除去脂类,然后再用95%乙醇回流提取3次,合并提取液,减压浓缩后并定容至250l容量瓶中备用。2.2没食子酸对照品的配制精细称取没食子酸对照品10.0g,用95%的乙醇溶解后定容至100l的容量瓶中，得终浓度为100g/l的标准品溶液5。2.3标准曲线的绘制精细汲取浓度为100g/l没食子酸对照

7、品溶液0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6l于10l的容量瓶中，并分别补充适当95%乙醇至1.0l。再分别参加0.5lFR溶液0.25lFR溶液+0.25l的蒸馏水，3in后，再分别参加1.5l的Na23(0.2g/l)溶液，然后各补充7.0l蒸馏水，振荡混匀后静置2h，以95%乙醇作为空白，调零，于760n处测定其吸光值6。绘制标准曲线，得回归方程为：Y=21.829X+0.0469,R2=0.9987。其中Y为吸光度,X为没食子酸对照品溶液浓度(g/l)。结果说明，没食子酸在0.0010.006g/l的范围内呈良好的线性关系。2.4方法学考察精细汲取100g/l对照品溶液，其他实

8、验步骤同“2.3项下，同一样品做6个重复，得RSD=0.9673%，所得数据的重现性较好；同一样品溶液反复测6次吸光值，得RSD=0.3962%，说明仪器精细度良好7；在8h内对同一样品溶液每隔30in测1次吸光值，RSD=1.7756%，说明该实验体系在8h内根本稳定8。2.5样品溶液的制备将“2.1项下所得光果莸各部位乙醇提取液浓缩至浸膏状，50枯燥至恒重。精细称取枯燥后的花、叶和茎的乙醇提取物各25g于10l容量瓶中，用95%乙醇溶解并定容，得终浓度为2.5g/l的样品溶液。2.7光果莸不同部位多酚对羟自由基H的去除作用取7支具塞试管，分别向各试管中参加2.0l/LFeS43.0l，1.

9、0l/LH223.0l,振荡，摇匀。再分别参加6.0l/L水杨酸3.0l，摇匀，于37水浴加热15in。加热完毕后，以蒸馏水调零，应用紫外分光光度计于510n处测定吸光度Ai，然后分别向7支试管中参加样品溶液0.2，0.3，0.4，0.5，0.6，0.7，0.8l,用蒸馏水补充各试管溶液至1.0l，继续水浴15in，待加热完毕再次测定其吸光值Aj,其样品溶液自身颜色的吸光值为Ablank。抑制率按如下公式计算：抑制率%=(Ai-Aj+Ablank)/Ai100%2.8半数抑制率的计算I50为半数抑制率浓度，也就是指自由基去除率为50%时的自由基去除剂的浓度，根据不同浓度抗氧化剂的去除率作曲线求

10、出10。I50值是评价自由基去除剂效果的常用指标，其值越小，表示到达50%自由基去除率时，所用的自由基去除剂的浓度剂量越小，其自由基去除效果也就越好。转贴于论文联盟.ll.3结果3.1H体系的生成根据Fentn反响体系模型，二价铁离子在过氧化氢存在的条件下，可以迅速产生H,反响生成的H存活时间短，假设在该反响体系中参加水杨酸，它将能有效地被水杨酸捕捉并同时生成有色物质,该有色物质在510n处有一强吸收峰,但假设在该体系中参加具有去除H的样品溶液，那么会与水杨酸竞争性的与H结合，而使水杨酸与H作用下生成的紫色物质减少，最终导致反响体系的颜色变浅，吸光度减小11，12。3.2没食子酸标准曲线的绘制

11、见图1。3.3光果莸不同部位多酚的含量实验结果说明，光果莸叶中多酚含量最高，花次之，茎中含量最低。各个部位的含量见表1。表1光果莸不同部位多酚的含量略3.4光果莸不同部位多酚对H自由基的去除率分别在反响体系中参加浓度为2.5g/l的样品多酚提取液0.2，0.3，0.4，0.5，0.6，0.7，0.8l，测定不同体积样品溶液在该体系下对H自由基的去除活性。实验结果说明，光果莸花、叶和茎多酚提取物对H自由基均有不同程度的去除作用，其中去除作用最强的是叶，花次之，茎最差，这和它们提取物中多酚含量百分比是一致的，其中光果莸叶多酚提取物在参加体积0.8l时，其去除羟自由基的活性与Vit不相上下，到达93

12、.8%以上，由此说明，高浓度的光果莸叶多酚具有很强的抗氧化活性。其实验结果见图2。3.5不同部位光果莸多酚对H自由基去除作用的I50值不同部位光果莸多酚对H自由基去除作用的I50值见表2。从表2中可以看出叶多酚提取物的I50小于花、茎多酚的I50值，具有较好的抗氧化活性，但与Vit的I50比拟，还存在很大的差距，有待于提取并纯化光果莸多酚，进一步别离出有效的单体成分。表2不同部位光果莸多酚对H自由基去除作用的I50值略4讨论植物多酚因具有很强的抗氧化作用而备受人们的重视。植物多酚的抗氧化才能使它可以有效地去除人体内的过剩自由基，减缓人体组织器官的衰老。此外，植物多酚还具有明显的抑菌、抗癌和抑制

13、胆固醇上升等成效13，14。本实验发现样品多酚测定的稳定性较好，含量以光果莸叶多酚含量较高，达2.08%.采用体外产生活性自由基系统,通过对自由基的去除作用实验证实，光果莸多酚在试验质量浓度范围内对羟自由基均有一定的去除作用,尤以光果莸叶多酚的去除作用最强，到达93.8%，与Vit的去除作用相当。由此说明光果莸叶多酚是一种较好的天然抗氧化物质，有较好的开发和应用前景。【参考文献】1宋立江,狄莹.植物多酚的研究与利用的意义及开展趋势J.化学进展,2022,5(2):162.2李雪莹，王文杰.植物单宁的生理作用及经济价值J.内蒙古林业科技，2022，4(4):22.3西北植物研究所.秦岭植物志.北

14、京:科学出版社，1983.4钟国跃，秦松云，钟延渝，等.羌族民间药用莸属植物的生药学鉴定J.中国中药杂志，1993，18(7):392.5Zheng,S.Y.ang.AntixidantativityandphenlipundsinseletedherbsJ.JAgriFdhe.2001,49(11):5165.6曹炜，陈卫军，陈纪蓉，等.不同种类蜂蜜总酚酸含量测定和抗氧化作用的研究J.食品科学，2022，26(1):48.7吴德玲，金传山，刘金旗，等.益智仁中总黄酮含量的测定J.安徽中医学院学报，2022，24(5):38.8于敏，弥宏，焦连庆.蜂胶总黄酮中阿魏酸与总酚酸的含量测定J.中药材，2022，28(12):1116.9石碧，狄莹.植物多酚.北京:科学出版社，2000:19.10邱金东,汤昆.DPPH和ABTS法测定核桃仁的体外抗氧化活性J.中成药，2022，8(30):1215.11丁利君，周圳辉，林燕如.芒萁中总黄酮物质的提取及抗氧化研究J.食品科学，2022，26(8)：77.12