生黄合剂对病毒性心肌炎小鼠血清IL

1、生黄合剂对病毒性心肌炎小鼠血清IL【关键词】生黄合剂；,病毒性心肌炎；,细胞因子摘要：目的观察生黄合剂对病毒性心肌炎小鼠血清IL2及IL10的影响。方法对昆明种小鼠采用柯萨奇病毒VB3腹腔注射染毒，制成病毒性心肌炎动物模型，观察生黄合剂对模型鼠的一般情况、生存率及IL2及IL10的影响。结果各治疗组小鼠的生存率明显高于病毒对照组，实验所试药物对VB3感染鼠均有保护作用，生黄合剂11，12组对感染鼠的治疗作用要好于阳性药物组，尤其是11液组的治疗作用最正确；生黄合剂对模型鼠血清IL2及IL10有调节作用。结论生黄合剂对实验性病毒性心肌炎小鼠具有治疗作用。关键词：生黄合剂；病毒性心肌炎；细胞因子近

2、年来病毒性心肌炎viralyarditis，V的发病率呈上升趋势,已成为临床的常见病和多发玻肠道病毒中的柯萨奇病毒B组xsakievirusB3，VB3是引起病毒性心肌炎的主要病原体，调查说明病毒性心肌炎患者中有近50%的是由VB3感染所致1。V的发病主要与病毒直接损伤心肌细胞、免疫损伤及生化机制有关。目前对该病的治疗仍缺乏有效手段。生黄合剂由黄芩茎叶总黄酮和传统名方生脉饮组成。预试验证明生黄合剂具有较好的抗病毒作用。本研究观察了生黄合剂对实验性小鼠病毒性心肌炎的作用，为临床试验及进一步讨论其作用机制提供根据。1材料与方法1.1材料VB3病毒Nany株由河北医科大学微免教研室惠赠。在Hela细

3、胞上传代，反复冻融3次，用微量法测定其半数组织感染量TID50为10-5.5。实验动物为180只45周龄昆明种小鼠，雌雄各半，体重1618g，二级实验动物，由山西医科大学实验动物中心提供。中药配制：生脉饮人参五味子麦冬=121与总黄酮承德医学院中药研究所提供按不同比例制成11，12合剂。利巴韦林注射液0.1g/l济南利民制药有限责任公司。1.2方法将小鼠随机等分为6组，每组30只。A组为生脉饮治疗组；B组为11液治疗组；组为12液治疗组；D组为阳性药物对照组；E组为病毒对照组；F组为正常对照组。AE组腹腔注射1000TID50/0.1l的VB30.1l，F组腹腔注射RPI1640维持液0.1l

4、，1h后A组灌胃给药，0.2l/10g，D组利巴韦林0.1l/10g80g/kg腹腔注射，F组给予一样剂量的生理盐水灌胃，2次/d，持续给药10d，观察14d。分别于第7，14d每组随机抽取6只小鼠摘眼球取血，别离血清，用AB-HRP夹心ELISA法试剂盒购自美国Bisue公司测定其IL2和IL10的程度变化。实验数据以s表示，采用SPSS11.0统计软件进展方差分析、SNK检验，卡方检验，检验水准=0.05。2结果2.1小鼠一般情况及生存率F组小鼠活动自如，无一例死亡。AD组小鼠的一般情况好于E组，E组小鼠在接种VB3后第3天开场死亡，主要集中在第610天，而AD组小鼠的死亡时间推延到第6天

5、，第14天各组小鼠存活情况见表1。AD组与E组之间有统计学差异2=40.11，P0.005,A组与B组之间有统计学差异2=4.46，P0.05,B组和组分别与D组比拟均有统计学差异2=10.24，2=5.33，P0.05。结果说明实验所试药物对VB3感染鼠均有保护作用，B、组对感染鼠的保护和治疗作用要好于D组，尤其是11液组的保护和治疗作用最正确。结果见表1。表1各组小鼠染毒第14天的存活率比拟略与E、F组比拟，aP0.005；与D组比拟，bP0.05；与A组比拟，P=0.0352.2细胞因子检测在接种VB3后第7，14天各组小鼠血清中IL-2和IL-10的测定结果见表23。用析因方差分析对不

6、同时间小鼠血清中IL-2浓度进展比拟F=4.211，P0.005，不同时间与分组之间存在交互作用,然后分析不同时间的单独效应。接种病毒后第7天各组小鼠血清中IL-2程度比拟有统计学差异F=7.427，P0.05,生脉饮组、11液组和12液组与病毒对照组相比有统计学差异(P0.05)；第14天各组小鼠的血清中IL-2程度比拟有统计学差异F=11.529，P0.005，11液组小鼠的血清中IL-2程度低于病毒对照组(0.01P0.05)。同样用析因方差分析对不同时间小鼠血清中IL-10浓度进展比拟F=6.788，P0.005，不同时间与分组之间仍存在交互作用，然后分析不同时间的单独效应。接种病毒后

7、第7天各组小鼠血清中IL-10程度比拟有统计学差异F=46.597，P0.005,病毒对照组与其它治疗组相比有统计学差异(P0.05)，生脉饮组及11液组和12液组及阳性药物对照组相比仍有统计学差异(P0.05)。第14天各组小鼠血清中IL-10程度比拟有统计学差异F=8.977，P0.001，11液组与其它组相比仍有统计学差异(P0.001)。转贴于论文联盟.ll.3讨论本试验研究证实：利巴韦林对VB3感染鼠有一定治疗作用，但治疗效果不够理想，可能与V的免疫损伤有关。生脉饮能有效地保护VB3感染鼠，使血清中IL2程度第7天低于病毒对照组，提示：生脉饮可能通过调节免疫，抑制过氧化脂质及自由基的

8、产生，增强过氧化物酶的活性，保护心肌细胞等机制对VB3感染鼠起到治疗作用。自20世纪80年代以来，承德医学院中药研究所对黄芩茎叶有效成分进展了广泛系统的研究，发现黄芩茎叶提取物总黄酮的主要化学成分为野黄芩苷，具有广泛药理活性，如抗炎、抗病毒作用，黄芩苷对流感病毒有抑制作用24，有改善心律失常作用5等。因黄芩茎叶总黄酮与生脉饮均有调节免疫、改善心律失常的作用，但两者的药理作用不尽一样。在病毒诱发的炎症至感染后自身免疫反响的产生及进展过程中，细胞因子被认为具有重要作用6。关于心肌炎免疫反响，目前人们极为关注Th1细胞及Th2细胞的穿插作用。Th1相关细胞因子IL2对诱导细胞免疫起关键作用；而Th2

9、相关细胞因子IL10对增强体液免疫即IgG及Ig抗体的产生起到重要作用。不同类型细胞因子间可互相影响及调节6。病毒性心肌炎存在免疫失常，包括TH1/TH2失衡、NK细胞活性降低等。黄芩茎叶总黄酮与生脉饮可能通过调节细胞因子网络来调节TH平衡，降低TH1类细胞因子程度，进步TH2类细胞因子的浓度。第14天11液组小鼠血清中IL10程度高于其它各组，IL2程度低于病毒对照组。表2染毒第7天各组小鼠血清IL-2及IL-10的程度比拟略与E组比拟，P0.05；与其它各组比拟，P0.05表3染毒第14天各组小鼠血清IL-2及IL-10的程度比拟略与E组比拟，P0.05；与其它各组比拟，P0.001本文研

10、究结果显示生脉饮与黄芩茎叶总黄酮按11配方与按12配方均对VB3感染鼠有保护作用，尤其生脉饮与黄芩茎叶总黄酮按11配方效果最好，疗效明显优于生脉饮及利巴韦林，生黄合剂对模型鼠血清IL2及IL10有调节作用，其作用机制有待于进一步研究。参考文献：1JakF,druffD.Viralyarditis.Arevie.AJPathl,1980,101(2):425.2周晓霞，李素婷,周晓慧,等.黄芩茎叶总黄酮抗炎作用的实验研究J.中国中医药信息杂志,2000,2(6):150.3颜正华.中药学.北京:人民卫生出版社,1991:136.4NagaiT,SuzukiY,TiriT,etal.Antiviralativityfplantflavnid,5,7,4rihydrxy8ethxyflavne,frthertsfSutellariabaialensisagainstinfluenzaA(H3N2)andBvirusesJ.Bil-Phar-Bull,1995,18(2):295.5佟继铭，刘玉玲，周崇坦,等.黄芩茎叶总黄酮抗心