普微实验之一培养基的制备与无菌检测技术2012版课件

1、微生物学实验的目的及实验室的要求普通微生物学实验普通微生物学实验主讲：郑海涛一、微生物学实验的目的1、微生物学实验是微生物学的重要组成部分，也是学习微生物学的一个重要环节2、通过实验操作，可以加深和巩固对课堂讲授内容的理解。3、训练学生掌握最基本的操作技能；了解微生物学的基本知识；培养学生观察、思考、分析解决实际问题的能力；实事求是、严肃认真的科学态度和勤俭节约、爱护公物的良好作风。 二、微生物实验室的要求 为了上好微生物学实验课，并保证安全，实验时要注意如下事项：1、为了保证实验室的整洁和实验的顺利进行，非必要的物品和书包，不得带入室内，实验时不得高声谈话和随意走动2、每次实验前要对实验内容

2、进行充分预习，了解实验的目的、原理和方法，做到心中有数，并作合理安排。3、实验中要认真观察，及时做好实验记录。对于当时不能得到结果而需要连续观察的实验，则需记下每次观察的现象和结果，以便分析。4、实验操作应严格按操作规程进行，万一遇有带菌物品洒漏、皮肤破伤或菌液吸入口中等意外情况发生时，应立即报告指导教师，及时处理，切勿隐瞒。 微生物实验要点 干净利落 胆大心细实验一无菌检测技术与常用培养基的制备、灭菌普通微生物学实验普通微生物学实验一、实验目的1、通过本次实验证明微生物无处不在，并在今后的试验中注意无菌操作。2、了解配制培养基的一般程序，掌握配制、分装培养基的方法3、掌握高压蒸汽灭菌的原理及

3、操作技术（一）环境中微生物的检测一、目的和要求 1、微生物在自然界广泛存在，在实验室内亦不例外。由于其个体小，人们用肉眼看不到。只有通过微生物的大量繁殖形成微生物群体，即菌落，肉眼才能看到它们。2、通过本次实验证明实验室内有各种微生物的存在，对微生物有初步的认识，并在今后的微生物学实验中注意无菌操作，防止杂菌污染，保证实验结果的可靠性。 二、实验材料 1、牛肉膏蛋白胨（营养琼脂）培养皿、75%酒精棉球 2、37恒温箱、酒精灯、剪刀、火柴、镊子、灭菌棉球、灭菌牙签、记号笔等四、结果观察 1、同组成员共同观察并记录结果，并与对照皿进行比较。 2、描述你处理的培养皿中长出的菌落，如形状、颜色、大小、

4、边缘等特征（二）培养基的制备与灭菌1、培养基：人工配制、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的混合基质。2、营养要素：碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水3、要 求：应具备6大营养要素；物质比例合适；必须灭菌。 一、实验原理消毒与灭菌消毒：消灭病原菌和有害微生物的营养体灭菌：杀灭一切微生物的营养体，芽胞和 孢子。方法：一、物理的方法：加热、过滤、辐射二、化学的方法：用化学试剂抑制或杀灭微生物。主要破坏细菌代谢机能。如重金属离子，磺胺类药物及抗生素等。 培养基的分类1、物理状态分 （1）固体培养基 （2）半固体培养基 （3）液体培养基 (4）脱水培养基（干燥培养基） 2、营养成分分 （1）天然培养

5、基 （2）合成培养基 （3）半合成培养基3、不同功能分 （1）选择性培养基 （2）鉴别培养基 1%-2%琼脂0.5%琼脂不加琼脂营养琼脂高氏一号PDA乳酸菌培养基MRSEMB二、实验材料及仪器(一)药品 牛肉膏，蛋白胨，葡萄糖，马铃薯、NaCl，琼脂等。(二)试剂 40KOH，l0HCl。(三)其它 电子天平，电炉，硫酸纸，牛皮纸，线绳，棉花，纱布，石棉网、精密pH试纸，标签，烧杯，量简，玻棒，三角瓶，灭菌锅等。三、方法步骤 1、培养基的种类很多，配制方法也不完全相同，但其基本程序和要求是大体相同的。一般培养基的配制程序如下 一般培养基的配制程序如下 计算 称量 溶解定溶调节PH值 过滤 加琼脂并溶解 分装 灭菌 包扎 加塞 摆斜面 无菌检查。 分 装漏 斗乳胶管玻璃管弹簧夹铁架台分装试管 灭菌后，固体培养基如需制成斜面，应趁热将试管上部垫于一根玻棒或木条上，使培养基斜面长度为试管长度的12摆斜面五、实验报告 简述你所制备培养基的制备程序。六、思考题 (1)在你制备的培养基中，何为碳源?何为氮源? (2)配制合成培养基加入微量元素时，最好用什么方法加入?天然培养基为什么不需另加微量