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文档简介
1、硝酸盐还原试验什么是硝酸盐还原测试?这是一种根据产生硝酸还原酶的能力区分肠杆菌科成员的程序,该酶将硝酸盐水解 为亚硝酸盐,并最终降解为不同的氮产物,例如一氧化二氮,一氧化氮和氨。硝酸盐还原试验的其他用途如下:它有助于区分分枝杆菌。减少硝酸盐含量的测试可以帮助鉴定奈瑟氏球菌,并将其与莫拉氏菌和金 氏菌等其他菌种区分开。它有助于区分林病奈瑟氏球菌和反硝化克氏杆菌。它有助于识别棒状杆菌。硝酸盐还原测试的主要目的是检查生物体产生硝酸还原酶的能力。通过进行该测试,将容易区分具有能够从不产生所述酶的革兰氏阴性生物产生硝酸 还原酶的能力的肠杆菌科成员。硝酸盐还原试验原理在厌氧环境下,某些微生物具有将硝酸盐(
2、如KNO3)还原为亚硝酸盐的能力。该 过程称为无氧呼吸,其中硝酸盐分子充当电子受体。硝酸盐与试剂A和B反应,由于形成偶氮染料而引起红色。在某些情况下,某些 微生物可以进一步将亚硝酸盐还原为游离氮和氨。将待测生物的接种物在硝酸盐肉汤中孵育。应孵育四个小时,并检查肉汤中硝酸盐 是否还原为亚硝酸盐。通过添加磺胺酸试剂和a-萘胺来完成。如果被测微生物的硝酸盐还原为亚硝酸盐,您会注意到亚硝酸的形成。如果添加磺 胺酸,它会到达并产生重氮化的磺胺酸,然后与a-萘胺反应生成红色化合物。颜色变化:如果添加硝酸盐试剂后培养基变成红色,则被测试的硝酸盐还原生物为阳性。如果 添加试剂后培养基的颜色没有变化,则表明被测
3、生物没有还原硝酸盐的能力。这也 可能意味着该生物已经将硝酸盐或亚硝酸盐反硝化,从而产生氨或分子氮。如果介质的颜色没有变化,则需要进行下一步,即添加少量锌粉。如果介质变成红 色,则表明存在未还原的硝酸盐,表明结果为真阴性。请记住,如果添加锌粉后培养基没有变红,则意味着硝酸盐还原测试结果为阳性未能产生红色的原因:被测生物未能还原硝酸盐。被测生物具有强大的硝酸盐还原酶,可将硝酸盐进一步还原为氨或分子N2。注意:仅需向培养物中添加少量锌粉,便需要进一步测试。锌粉的作用是将硝酸盐还原为 亚硝酸盐。注意颜色的变化。添加锌粉后,如果颜色变为红色,则表示硝酸盐未还原。硝酸盐还原测试需要哪些材料?用倒置的Dur
4、hams管专门培养基硝酸盐肉汤试剂种类o a萘胺试剂o亚硫酸试剂o锌粉刻录机接种环滴管被测试的生物保温箱硝酸盐还原测试如何进行?第一步是用无菌方法将正在测试的生物体生长接种到硝酸盐肉汤中。孵化。向肉汤中加入一滴磺胺酸和一滴a萘胺。如果颜色变为红色,则表示被测生物对硝酸盐还原测试呈阳性。附加步骤:如果在添加必要的试剂后培养物未变红,则需要执行下一步,即添加锌粉。仔细检 查颜色是否变化。如果颜色变为红色,则表示被测生物对硝酸盐还原测试呈阴性。解释结果:阴性如果培养基的颜色不变,则硝酸盐还原试验为阴性。这意味着不存在 亚硝酸盐。但是,应执行另一步骤以确认结果是否为真阴性。为什么?因 为某些生物体具有将硝酸盐进一步还原为亚硝酸盐的另一个分子的能力。 因此,您需要在肉汤中添加少量锌粉。锌的作用是它将催化硝酸盐还原为 亚硝酸盐。如果介质的颜色变为红色,则表示结果为真负片。如果添加锌 粉后颜色未发生变化,则表示结果为阳性。阳性-如果添加试剂后颜色变为樱桃红色,则硝酸盐还原测试为阳性。如果 采取了其他步骤(例如添加锌粉),则在添加锌粉后介质的颜色未变为红色 的情况下,结果为肯定。安全措施试剂a萘胺和亚硫酸是有毒的,吞咽时可能极为有害和致命。这些试剂应具有良好 的腐蚀性,因此应妥善处理,并且不应与皮肤,眼睛和呼吸道接触。如果试剂与您的眼睛接触,应立即用水冲洗
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