葛根素对去卵巢大鼠机体骨代谢影响的观察

1、葛根素对去卵巢大鼠机体骨代谢影响的观察【关键词】葛根素;去卵巢大鼠;骨代谢【Keyrds】Puerarin;varietizedrats;Bneetablis一般认为，妇女进入更年期后由于卵巢功能减退，雌激素分泌降低，影响钙代谢，钙过多的从骨骼中游离出来，最终导致骨量丧失而形成骨质疏松13。因此雌激素替代疗法曾经是预防和治疗绝经后骨质疏松(P)的首选方法，但由于雌激素有一定的副作用4，5，使雌激素替代治疗疗法具有争议。葛根素是异黄酮类化合物，具有与雌激素相似的化学构造6，属于植物雌激素，具有一定的雌激素活性7。本实验采用国内外公认的雌性大鼠去卵巢建立P模型，观察葛根素对去卵巢大鼠骨代谢的影响，

2、旨在开发新的治疗P的药物。1材料与方法1.1实验动物与仪器3月龄清洁级(SpragueDaley，SD)雌性大鼠60只，体重240310g。由中国科学院上海实验动物中心提供。葛根素(Puerarin)本实验室自提纯化，高效液相色谱法测定含葛根素89.69%。己烯雌酚(Diethylstilbestrl)片剂，0.5g/片，合肥九联制药消费。饲料：参照AIN93饲料配方配制半成品饲料，用菜粕交换饲料中的大豆饼，以防止大豆异黄酮等植物雌激素对实验结果的干扰。见表1。仪器：Avanta型原子吸收分光光度计：澳大利亚GB公司;lypulsAU640型全自动生化分析仪。1.2方法1.2.2血清生化指标的

3、测定采用lypuls全自动生化分析仪测定血清钙(a)、磷(P)含量及血清碱性磷酸酶(ALP)活性。1.2.3胫骨干重、灰重及骨矿含量(B)的测定取大鼠右侧胫骨，烘至恒重，记录干骨重量。将烘干的胫骨在电炉上炭化至无烟后，置于550马福炉中68hs灰化，称量灰重，胫骨灰重与骨干重之比为骨矿含量(g/g)。1.2.4胫骨钙磷含量测定准确称取上述所得胫骨灰分0.1g，11盐酸溶解后用双蒸水定容至50l，再取1l于100l容量瓶中，双蒸水定容后即为待测溶液。钙含量测定采用Avanta型原子吸收分光光度计，磷含量测定采用无机磷液体试剂盒上lypuls全自动生化分析仪。1.3统计学处理所有实验数据以xs表示

4、,采用SPSS10.0软件进展方差分析和差异显著性检验。转贴于论文联盟.ll.2结果2.1葛根素对去卵巢大鼠血清生化指标的影响去卵巢后，VX组大鼠血清钙磷浓度比Sha组降低，差异不显著;ALP活性增加了151.1%，差异极显著(P0.01)。见表2。表1实验日粮组成及营养程度表2葛根素对去卵巢大鼠血清钙磷含量及碱性磷酸酶活性的影与VX组相比：1)P0.05,2)P0.01;与Sha组相比：3)P0.05,4)P0.01;下表同2.2葛根素对去卵巢大鼠胫骨a、P含量的影响切除卵巢后，大鼠的胫骨钙含量显著下降了46.5%(P0.01);磷含量变化差异不显著。见表3。2.3葛根素对去卵巢大鼠胫骨干重

5、、灰重及矿物质含量的影响切除卵巢后，VX组大鼠胫骨干重降低，灰重增加，但差异不显著;胫骨矿物质含量显著下降(P0.01)。见表4。2.4葛根素对去卵巢大鼠体重的影响实验前，各组大鼠的体重没有显著差异。经过3个月的喂养后，各组大鼠体重均随时间增长。VX组、葛根素各处理组体重的增长显著大于Sha组(P0.01)。葛根素各处理组大鼠的体重增长与VX组相比都没有显著差异。E组大鼠的体重显著低于Sha组和VX组。见表5。表3葛根素对去卵巢大鼠胫骨钙、磷含量的影响表4葛根素对去卵巢大鼠胫骨干重、灰重及矿物质含量的影响表5葛根素对去卵巢大鼠体重的影响3讨论大量资料说明，主要的食物异黄酮大豆异黄酮对P有较好的

6、预防和治疗效果811，葛根中总异黄酮含量可达8%10%，是大豆的几十倍甚至上百倍，而且提取纯化非常方便12。a,P为骨骼中主要的无机元素，是骨基质的根本原料。骨中a维持着骨骼的强度。a流失过多，骨的显微构造发生改变，那么骨强度减弱。a代谢受多种因素影响，其中之一就是雌激素的程度。雌激素作用于成骨细胞，拮抗了糖皮质激素对成骨细胞生长的抑制，阻滞了a过多的从骨骼中游离出来2。本实验中，大鼠去卵巢后，a含量显著降低，提示去卵巢能影响钙代谢，使骨骼中钙流失过多。服用己烯雌酚和葛根素3个月后，钙含量显著增加，提示钙代谢得到了改善。测定骨代谢生化指标可以直接理解骨骼的生理代谢变化。一般说来，更年期P表现为

7、骨形成和骨吸收的生化指标都增高。另外，通过测定骨代谢生化指标可以有效评价药物对骨代谢的影响和对P的治疗效果，能使骨吸收指标得到控制或骨形成指标增加的药物可以防止骨质的进一步流失从而治疗P。血清ALP是最常见的评价骨形成和骨转换的生化指标，血清ALP的活性可以反映骨形成的活泼程度。血清中约50%的ALP来源于骨，50%来源于肝，极少数来源于小肠和胎盘。在绝经后10年内血清中骨ALP的含量可高达77%。更年期P是高转换型P，即表现为骨形成和骨吸收的生化指标都增高。本实验中卵巢摘除3个月后骨量丧失和ALP活性明显升高，即表现出典型的P病症并伴有骨转换的增加，这与相关文献报道的结果相似13。一般认为这种ALP活性的升高是伴随着骨吸收亢进而出现的代偿性骨形成增加引起的。服用葛根素或己烯雌酚3个月后，与VX组相比拟，ALP活性都得到了有效的控制，可以推测己烯雌酚和葛根素可以抑制ALP活性升高的趋势，